靶向NKG2D配体的嵌合抗原受体巨噬细胞具有肿瘤杀伤功能

目的 制备表达NKG2D嵌合抗原受体(CAR)的巨噬细胞(NKG2D CAR-M),研究其是否可以增强巨噬细胞对表达靶抗原的肿瘤细胞系的杀伤效应。方法 合成包含NKG2D的胞外段,CD8α铰链区和穿膜区,CD3ζ胞内信号域的NKG2D CAR基因,构建到腺病毒Ad5F35载体中,利用重组Ad5F35腺病毒感染人原代CD14^(+)单核细胞分化而来的巨噬细胞,制备NKG2D CAR-M。通过流式细胞术和荧光显微镜检测其嵌合抗原受体在巨噬细胞上的表达,通过荧光素酶法检测检测NKG2D CAR-M对高表达NKG2D配体的前列腺癌细胞系PC-3细胞杀伤效果。结果 我们成功制备了NKG2D CAR-M细胞,该细胞对高表达NKG2D配体的PC-3细胞具有非常显著的杀伤效果。结论 NKG2D CAR-M对高表达NKG2D配体的肿瘤细胞具有显著的杀伤效果。

两种靶向间皮素的CAR-T细胞杀伤三阴乳腺癌效果的对比研究

间皮素(Mesothelin)是一个潜力巨大的治疗三阴乳腺癌(Triple Negative Breast Cancer,TNBC)的CAR-T靶点。目前,在临床试验中开发的Mesothelin CAR-T大多使用小鼠单克隆抗体SS1来源的scFv作为抗原结合结构域,易引起体内抗CAR的抗体产生,导致治疗效果不甚理想,因此,亟需开发新的抗原结合结构域构建CAR-T。该研究选择了靶向Mesothelin的纳米抗体VHH,其亲和力与SS1scFv相似,基于scFv和VHH的序列,该文分别构建了scFv CAR-T和VHH CAR-T细胞,并比较了两种CAR-T对靶点阳性TNBC细胞系的体外杀伤效果。结果显示,与临床试验中常用的scFv CAR-T相比,VHH CAR-T对TNBC细胞系的体外杀伤能力更好,且可表达更高水平的CD107a和CD69。这是目前国内外报道的第一个基于VHH序列构建的Mesothelin CAR-T,为后续靶向Mesothelin CAR-T的开发奠定了基础。

复方阿胶浆对肾性贫血大鼠的治疗作用及其机制

目的研究复方阿胶浆(FEJ)对肾性贫血大鼠的治疗作用及其可能的作用机制。方法采用腺嘌呤制备肾性贫血大鼠模型;模型制备成功后,动物随机分为6组:对照组,模型组,FEJ低、中、高剂量(3、6、12 mL/kg)组和促红细胞生成素(EPO,200 U/kg)阳性对照组;连续给药24 d后,检测各组大鼠外周血红细胞(RBC)计数、血红蛋白(Hb)水平、红细胞压积(Hct)和血清中血尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)、EPO、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的量以及红细胞脆性;采用HE染色法观察肾脏组织病理形态,采用实时定量PCR法检测肾皮质EPO和骨髓单个核细胞EPO受体(EPOR)的mRNA表达水平。结果中、高剂量FEJ均可显著升高外周血RBC、Hb、Hct水平,显著降低BUN、Scr的量,显著升高血清SOD、GSH和GSH-Px的量(P<0.05),同时有升高血清EPO水平的趋势;低、中、高剂量FEJ均可以显著降低红细胞脆性(P<0.05);中、高剂量FEJ能够明显改善肾脏组织病理状态,同时显著上调肾皮质EPO和骨髓单个核细胞EPOR mRNA水平(P<0.05)。结论 FEJ能够在整体上有效治疗肾性贫血大鼠,其发挥治疗作用可能的机制为增强体内自由基清除系统的功能,延缓肾脏病变的进程,降低红细胞脆性;上调肾皮质EPO mRNA和骨髓单个核细胞EPOR mRNA的水平,促进体内EPO的表达,增强骨髓红系造血功能。