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弓形虫GRA4基因体外扩增、克隆及在耻垢分枝杆菌中的表达
被引量:
9
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作者
李俊华
吴少庭
+7 位作者
翁亚彪
甘燕
刘洪波
刘茂铃
张仁利
高世同
黄达娜
耿艺介
《中国病原生物学杂志》
CSCD
2006年第6期428-431,共4页
目的体外扩增弓形虫RH株致密颗粒蛋白4(GRA4)基因,构建大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭质粒ps3000-GRA4,重组耻垢分枝杆菌,鉴定重组蛋白的抗原性。方法用聚合酶链式反应(PCR)方法从弓形虫RH株基因组DNA中扩增GRA4基因,克隆入pGEM-T载体,然后亚...
目的体外扩增弓形虫RH株致密颗粒蛋白4(GRA4)基因,构建大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭质粒ps3000-GRA4,重组耻垢分枝杆菌,鉴定重组蛋白的抗原性。方法用聚合酶链式反应(PCR)方法从弓形虫RH株基因组DNA中扩增GRA4基因,克隆入pGEM-T载体,然后亚克隆法构建ps3000-GRA4大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭质粒,经电转化方法,将GRA4基因片断的穿梭质粒转化到耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatismc2155)中,用重组耻垢分枝杆菌免疫小鼠,Western blot方法检测免疫小鼠血清中的弓形虫抗体。结果成功扩增了弓形虫的GRA4基因并构建克隆质粒pGEMT-GRA4、穿梭质粒ps3000-GRA4,Western blot分析显示,GRA4重组蛋白能被重组质粒免疫小鼠血清识别,分子质量单位约为40.0 ku。结论重组耻垢分枝杆菌在小鼠体内表达出了重组蛋白GRA4,具有抗原性,刺激小鼠机体产生了抗弓形虫的抗体,为弓形虫重组BCG(Bacillus Calmette-Guerin)疫苗的研究奠定了基础。
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关键词
弓形虫
GRA4
耻垢分枝杆菌
BCG
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职称材料
题名
弓形虫GRA4基因体外扩增、克隆及在耻垢分枝杆菌中的表达
被引量:
9
1
作者
李俊华
吴少庭
翁亚彪
甘燕
刘洪波
刘茂铃
张仁利
高世同
黄达娜
耿艺介
机构
华南农业大学兽医学院
深圳市疾病预防控制中心
华中科技大学同济医学院
出处
《中国病原生物学杂志》
CSCD
2006年第6期428-431,共4页
文摘
目的体外扩增弓形虫RH株致密颗粒蛋白4(GRA4)基因,构建大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭质粒ps3000-GRA4,重组耻垢分枝杆菌,鉴定重组蛋白的抗原性。方法用聚合酶链式反应(PCR)方法从弓形虫RH株基因组DNA中扩增GRA4基因,克隆入pGEM-T载体,然后亚克隆法构建ps3000-GRA4大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭质粒,经电转化方法,将GRA4基因片断的穿梭质粒转化到耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatismc2155)中,用重组耻垢分枝杆菌免疫小鼠,Western blot方法检测免疫小鼠血清中的弓形虫抗体。结果成功扩增了弓形虫的GRA4基因并构建克隆质粒pGEMT-GRA4、穿梭质粒ps3000-GRA4,Western blot分析显示,GRA4重组蛋白能被重组质粒免疫小鼠血清识别,分子质量单位约为40.0 ku。结论重组耻垢分枝杆菌在小鼠体内表达出了重组蛋白GRA4,具有抗原性,刺激小鼠机体产生了抗弓形虫的抗体,为弓形虫重组BCG(Bacillus Calmette-Guerin)疫苗的研究奠定了基础。
关键词
弓形虫
GRA4
耻垢分枝杆菌
BCG
Keywords
Toxoplasrna gondii
Dense Granule Protein 4
Mycobacterium smegmatis mc^2 155
Bacillus Calmette-Guerin
分类号
R382.5 [医药卫生—医学寄生虫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
弓形虫GRA4基因体外扩增、克隆及在耻垢分枝杆菌中的表达
李俊华
吴少庭
翁亚彪
甘燕
刘洪波
刘茂铃
张仁利
高世同
黄达娜
耿艺介
《中国病原生物学杂志》
CSCD
2006
9
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