半固体培养法制备非洲猪瘟病毒pA104R蛋白的单克隆抗体

为了快速、高效制备非洲猪瘟病毒(ASFV)单克隆抗体,本研究通过大肠杆菌系统表达并纯化了ASFV重组蛋白pA104R。以ASFV重组蛋白pA104R为抗原,分别比较了CpG ODN联合氢氧化铝佐剂和常规弗氏佐剂两种免疫策略,并重点比较半固体培养法和常规有限稀释法来制备ASFV pA104R单克隆抗体的效率。结果显示,本研究获得了相对分子质量为3.5×104的ASFV重组可溶性蛋白pA104R,通过其与CpG ODN联合氢氧化铝佐剂免疫小鼠,在第21 d即可达到融合要求,本试验方法(重组蛋白pA104R与CpG ODN联合氢氧化铝佐剂免疫)较重组蛋白pA104R与常规弗氏佐剂免疫节省14 d时间。通过半固体培养法筛选单克隆的试验周期比有限稀释法缩短28 d,并减少了亚克隆的工作量。半固体培养法获得5株阳性杂交瘤细胞,挑选效价较高的3株(9A4、9H6、11F5)进行鉴定,重链均为IgG,轻链均为KAPPA。纯化后的3株单克隆抗体针对pA104蛋白和全病毒蛋白质的效价分别达1∶160000~1∶320000和1∶200~1∶400。本研究优选了CpG ODN联合氢氧化铝佐剂结合半固体培养法筛选pA104R的单克隆抗体,为单克隆抗体制备提供了快速高效的新策略。

母乳喂养质量改进在NICU极低出生体重儿中的应用

目的 探讨母乳喂养质量改进对新生儿重症监护室(NICU)极低出生体重儿的影响。方法 选取2021年1月1日—2021年12月31日南京市妇幼保健院NICU收治的70例极低出生体重儿(VLBWI)作为研究对象,按组间基线资料均衡可比的原则分为观察组和对照组,每组35例。对照组采取常规母乳喂养管理和宣教方式,观察组在常规母乳喂养管理的基础上通过增设人力资源、完善管理制度、加强医务人员培训、加大产妇及家属的宣教力度及加强院感监测共五个方面进行母乳喂养质量改进,比较两组VLBWI住院期间母乳喂养情况、生长发育情况、静脉营养时长、住院时长及并发症发生情况。结果 两组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05),观察组首次亲母母乳喂养时间、恢复出生体质量时间较对照组提前,住院期间纯母乳喂养率、体质量增长速率较对照组有所提升,静脉营养持续时间及总住院时长较对照组有所缩短,喂养不耐受、坏死性小肠结肠炎(NEC)、支气管肺发育不良(BPD)及视网膜病变(ROP)并发症总发生率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 母乳喂养质量改进措施可提升NICU住院VLBWI纯母乳喂养率,促进其体质量的增长,缩短静脉营养持续时间及总住院时长,减少相关并发症的发生率。

猪肺炎支原体通过抑制SPLUNC1功能破坏呼吸道炎性反应平衡

【背景】猪肺炎支原体(Mycoplasmahyopneumoniae,Mhp)通过定植猪呼吸道黏膜层,破坏呼吸道炎性反应平衡,引起炎性损伤和持续性感染。短的上腭、肺及鼻咽上皮克隆1蛋白(short palate lung and nasal epithelial clone1,SPLUNC1)是呼吸道黏膜分泌的具有重要抗菌和抗炎功能的蛋白,被认为是呼吸道黏膜面对危险信号时的“信号传感器”。【目的】从Mhp和SPLUNC1相互作用入手,分析Mhp感染对SPLUNC1表达的影响以及SPLUNC1对Mhp引起的炎性反应的调控作用,揭示Mhp引起炎性损伤的新机制,为解决Mhp持续性感染问题提供参考。【方法】利用猪肺炎支原体对猪支气管上皮细胞(porcine bronchial epithelial cells,PBECs)感染模型和猪体感染模型,通过荧光定量PCR、间接免疫荧光和Western-blotting等方法,分别检测Mhp感染后对肺脏中SPLUNC1以及体外PBECs中SPLUNC1转录和表达的影响。克隆并扩增猪源SPLUNC1基因通过酶切鉴定,构建成功SPLUNC1真核和原核表达重组质粒pCDNA3.1-SPLUNC1以及pET28a-SPLUNC1。与此同时,设计靶向SPLUNC1的siRNA干扰片段。利用体外SPLUNC1蛋白孵育、体内呼吸道黏膜SPLUNC1抗体封闭,通过Mhp CCU50检测明确SPLUNC1对Mhp体内外生长的影响。在猪支气管上皮细胞中,通过过表达或siRNA干扰SPLUNC1基因,后感染Mhp,利用Western-blotting、间接免疫荧光以及酶联免疫吸附方法,明确SPLUNC1对Mhp的黏附作用、诱导炎性因子表达以及MAPK信号通路活化的影响。【结果】Mhp感染猪后可引起肺脏实变,主要组织病理表现为肺脏炎性损伤,同时显著上调肺泡灌洗液中趋化因子CXCL8和炎性因子TNFα和IL-1β分泌。Mhp体内外感染后,体内肺脏和体外猪支气管上皮细胞中SPLUNC1的转录和表达均显著下调。以上研究表明,Mhp可诱导肺脏炎性反应,抑制SPLUNC1表达。另一方面,体外PBECs中过表达SPLUNC1后,Mhp感染引起的CXCL8表达显著减少;siRNA干扰SPLUNC1后,Mhp感染引起的CXCL8表达显著增加,表明SPLUNC1负调控Mhp感染引起的CXCL8表达。基于Mhp感染入侵呼吸道过程,本研究进一步解析SPLUNC1负调控CXCL8表达的机制。结果表明:无论是SPLUNC1和Mhp体外孵育,还是SPLUNC1抗体体内封闭,Mhp的体内外生长均未受影响;SPLUNC1的过表达或siRNA干扰对Mhp体外黏附PBECs的能力也无显著影响;过表达SPLUNC1可抑制pERK和IκBα的激活,相反SPLUNC1 siRNA干扰后,可促进pERK和IκBα的激活。以上研究证明SPLUNC1不是通过调控Mhp的生长和黏附,而是通过负调控MAPK-ERK通路的活化来调控CXCL8的表达。【结论】SPLUNC1可通过MAPK-ERK信号通路来调控炎性因子的过度表达,维护宿主炎性平衡;与此同时,Mhp感染后可通过抑制SPLUNC1的表达来破坏宿主炎性反应的平衡调控,进而引起炎性损伤。本研究为解析Mhp感染损伤机制提供依据。

胎龄≤32周早产儿中重度支气管肺发育不良与早期母乳喂养的相关性分析

目的探讨胎龄≤32周早产儿中重度支气管肺发育不良(BPD)与早期母乳喂养的相关性。方法回顾性分析220例胎龄≤32周早产儿的临床资料,根据是否发生中重度BPD将早产儿分为中重度BPD组37例和对照组183例,比较2组早产儿的临床特征、母乳喂养量和亲母母乳(MOM)喂养率,并分析母乳喂养与早产儿发生中重度BPD的关系。结果单因素分析结果显示,中重度BPD组出生体质量<1500 g、出生胎龄<28周、分娩方式为阴道分娩、出生后1 min Apgar评分≤7分、机械通气时间≥7 d者占比均高于对照组,静脉营养时间长于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);中重度BPD组出生后0~7 d母乳摄入量、MOM摄入量、MOM喂养率和出生后8~14 d母乳摄入量均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,出生后0~7 d母乳喂养量高是早产儿发生中重度BPD的独立保护因素(OR=0.865,95%CI:0.767~0.976,P<0.05),胎龄<28周(OR=5.238,95%CI:1.158~23.686,P<0.05)、机械通气时间≥7 d(OR=22.386,95%CI:6.769~74.030,P<0.05)是早产儿发生中重度BPD的独立危险因素。结论出生后早期母乳喂养可显著降低胎龄≤32周早产儿发生中重度BPD的风险,临床应积极推行早期母乳喂养措施。

基于Web of Science护理教育领域虚拟现实研究的知识图谱分析

目的:厘清近10年国外护理教育领域虚拟现实研究的现状和热点,以期对我国护理研究的深入和实践成果运用提供参考依据。方法:运用CiteSpace软件对Web of Science核心合集的519篇文献进行可视化分析,绘制机构和作者共现、关键词聚类、文献共被引图谱,展现该领域研究现状、热点、前沿、知识结构及流动方向。结果:近年来,虚拟现实研究文献数量倍增,发文量排名居前3位的机构分别是瑞尔森大学、百年理工学院、圣保罗大学;以Verkuyl M学者发文量最多,共16篇;研究热点包括学习者知识、技能、表现、体验,健康照护及虚拟现实技术类型等方面;虚拟学习、虚拟仿真是当前研究前沿。结论:虚拟现实在国外护理教育领域日益受到关注,并形成多个研究热点,国内学者可借鉴参考,开展进一步研究,助推我国护理教育改革发展。

阴道镜下宫颈环切术治疗宫颈鳞状上皮内瘤变的临床效果

目的分析阴道镜下宫颈环切术治疗宫颈鳞状上皮内瘤变(CIN)的临床效果。方法选择本院门诊收治的460例CIN患者,按照随机数字表法分两组。研究组(236例)行阴道镜下宫颈环切术治疗,对照组(224例)行冷刀锥切术治疗。比较两组患者的疗效。结果研究组各项手术情况指标均优于对照组(P<0.05)。研究组并发症发生率低于对照组(P<0.05)。两组术后复发率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论阴道镜下宫颈环切术治疗CIN的效果显著优于冷刀锥切术,能有效降低手术时间、减少手术损伤,降低并发症的发生率,减少疾病复发,值得临床推广。

猪支原体肺炎活疫苗与灭活疫苗联合免疫效果评价

为探寻一种更加合理高效的猪支原体肺炎(MPS)免疫方式,本研究使用MPS弱毒疫苗进行基础免疫后14 d再使用灭活疫苗进行加强免疫,通过人工感染猪肺炎支原体来评价其免疫效果。同时将这种免疫程序在规模化猪场进行应用,通过计算一定时期内的日增重来评价其免疫效果。结果显示:联合免疫在保证黏膜免疫效果的同时并未降低体液免疫水平;更为重要的是,联合免疫不但具备较高攻毒保护率,而且在攻毒后剖杀时其肺泡灌洗液中抗原含量远低于其他免疫方式。以上结果表明,联合免疫可以产生较好的免疫协同作用,从而提高了机体的综合免疫保护能力。田间试验结果发现:联合免疫组猪群从21日龄至80日龄平均增重27.31 kg,比活疫苗免疫组猪群多增重3.02 kg,比灭活疫苗免疫组猪群多增重3.73 kg;其平均日增重可达0.46 kg/d。本研究为防治猪支原体肺炎提供了新的思路。

后非瘟时代猪场PRRSV类NADC30感染防控案例分析

猪繁殖与呼吸综合征一直是影响养猪业最严重的疾病,通过对1个PRRSV阴性猪场母猪突发大量流产的病例进行抗体和病原检测,细菌分离鉴定和MIC测定,然后制定和实施防控措施和评价指标。结果发现:(1)50份流产母猪PRRSV抗体检测阳性率100%;(2)母猪血清、流产物、睾丸去势液及保育猪组织样本,PRRSV阳性率分别为90.0%、80.0%、100.0%及85.7%,但所有样本CSFV、PRV、PPV及SIV病原均为阴性;(3)4份PRRSV阳性样本经ORF3、ORF5及Nsp2测序和比对,结果均与NADC30同源性最高;(4)保育猪组织样本分离到链球菌和副猪嗜血杆菌,MIC测定结果显示氟苯尼考和阿莫西林对上述2种分离菌最敏感;(5)控制措施实施后的3个月,母猪的流产率从发病期的43.6%,下降至3.6%,断奶7 d内配种率从发病期的63.3%上升至87.5%,哺乳仔猪和保育猪的死亡率分别从发病期的28.4%和38.8%下降至3.8%和4.7%。通过对该病例的诊断和疫情分析,采用灭活苗免疫接种和药物保健综合防控措施可快速取得效果,为规模化种猪场的PRRSV暴发防控提供参考。

明清两代木刻“驱疫”门神图式的模件化生产——以“神荼—郁垒”和“秦琼—尉迟恭”为例

古人发明“驱疫”门神、张贴门神画的行为是一种源初的“避疫”之需,在瘟疫爆发最为频繁的明清两代,相对落后的社会生产技术如何满足“疫区”对门神画的巨大需求呢?本文主要从考察中国汉字的“模件系统”入手,窥探了“神荼—郁垒”和“秦琼—尉迟恭”两组“标准化”图式中的“模件化”思维,剖析了图式对批量生产门神画的重要性:图式的“装饰体系”被归纳、规范和固定,使之成为门神图像便于识别和制作的标准单元,生产者通过木刻版画的复制“技术体系”,实现了门神画的“模件化生产”。

事业单位经济责任审计风险控制分析

经济责任审计是领导干部在任职期间对所在单位部门财政财务收支真实性、合法性、效益性进行监督的重要活动,有效地提高了单位的综合发展水平,尤其是在事业单位中,经济责任审计所发挥的价值较为突出,然而由于整体工作较为复杂,在具体落实方面难免会存在一定的问题,因此相关部门人员要加强对问题发生原因的深入性分析,在此背景下提出有效的应对策略,以此来保障事业单位经济责任审计风险控制的效果。

早产儿经口喂养促进的最佳证据总结

目的:全面检索并总结早产儿经口喂养促进的最佳证据。方法:系统检索国内外数据库及官方网站,检索时限为建库至2022年7月30日。对纳入的文献质量进行评价,并对文献进行证据提取。结果:共纳入9篇文献,包括指南2篇、临床决策1篇、系统评价5篇、专家共识1篇。最终形成的早产儿经口喂养促进的最佳证据包括喂养前评估、喂养时机、喂养工具选择、喂养过程的管理、经口喂养促进干预措施、特殊情况喂养6个方面,共24条证据。结论:形成的早产儿经口喂养促进的最佳证据可以为医务人员帮助早产儿尽快达到全经口喂养提供临床实践的循证依据。

Thera-Band弹力带改善脑卒中偏瘫病人下肢运动功能的效果

目的 探讨Thera-Band弹力带抗阻力训练对脑卒中偏瘫病人下肢运动功能的影响。方法 选取2022年1月至2023年4月我院收治的脑卒中偏瘫住院病人60例为研究对象,按随机数表法分为观察组和对照组,每组各30例。对照组采取常规康复治疗,观察组在对照组基础上进行Thera-Band弹力带抗阻力训练。采用简化Fugl-Meyer下肢运动功能评定(FMA)、Berg平衡功能量表(BBS)、计时起立行走测试(TUGT)、改良Barthel指数(MBI)对2组病人的康复治疗效果进行评价。结果 治疗后,2组病人FMA、BBS、TUGT、MBI评分较治疗前均有明显改善(P<0.05或P<0.01),与对照组比较,观察组FMA、BBS、TUGT、MBI评分改善更为显著(P<0.05或P<0.01)。结论 脑卒中偏瘫病人采用Thera-Band弹力带治疗,能够提高病人下肢运动功能,改善病人的步行和平衡功能,提高病人生活自理能力,值得临床进一步推广。

极低/超低出生体质量儿经外周静脉穿刺中心静脉置管过程中发生机械性静脉炎的影响因素分析

目的分析新生儿重症监护室(NICU)极低/超低出生体质量儿(VLBWI/ELBWI)经外周静脉穿刺中心静脉置管术(PICC)过程中发生机械性静脉炎(MP)的影响因素。方法回顾性分析行PICC的VLBWI/ELBWI的临床资料,采用多因素Logistic回归模型分析PICC后发生MP的影响因素。结果VLBWI/ELBWI行PICC后,MP的发生率为26.1%(116/444)。单因素分析结果显示,导管尖端位置、置管静脉、出生胎龄、出生体质量、置管时胎龄、置管时体质量、穿刺次数、置入长度是VLBWI/ELBWI行PICC后发生MP的影响因素(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,PICC导管尖端位置异常(OR=2.526,95%CI:1.532~4.164)及穿刺次数≥2次(OR=1.952,95%CI:1.017~3.747)是VLBWI/ELBWI发生MP的独立危险因素。结论导管尖端位置异常、穿刺次数≥2次会增高VLBWI/ELBWI行PICC后发生MP的风险。因此,临床医护人员应尽早采取措施加以预防,以减轻患儿痛苦,提升临床护理质量。

食品消费模式的碳足迹差异研究

为研究食品消费模式的碳足迹差异,基于生命周期评价方法,以水饺为例,评估了家庭手工、速冻零售、连锁经营和个体经营四类消费模式在运输、加工、包装、存储与烹饪环节的碳足迹差异.结果表明,水饺不同消费模式整体碳足迹由低到高分别为:家庭手工(1.85,kg CO_(2)eq/kg,下同)、市内连锁(1.86)、省内连锁(1.89)、速冻零售(1.96)、个体经营(1.96)和邻省连锁(1.97).其中运输环节碳足迹差异显著(2.13%~7.80%),速冻零售模式最高,连锁经营模式在中央厨房设置合理时展现出减排优势.此外,讨论了不同消费模式的食物损失与浪费环节碳足迹差异.研究指出,分片区设置中央厨房与配送中心、优化运输路径,减少全过程的食物损失与浪费等,将是居民食品消费系统碳减排的有效发力点.

基于利益相关者理论的企业环境绩效影响因素研究

基于利益相关者理论,通过构建企业环境绩效与企业受到各利益相关者环境压力的计量模型,并在江苏常熟地区展开问卷调查,分析了影响企业环境绩效的利益相关者,结果表明:在该实证区域,以主动性环境管理行为度量企业环境绩效时,投资者、竞争者、消费者和社区居民等外部利益相关者对企业环境绩效的提高有显著的正影响;政府虽然给企业造成了很高的环境压力,但并不是造成企业之间环境绩效差异的原因;媒体和环保非政府组织等外部利益相关者作用尚不明显。结论说明:我国政府通过引入利益相关者参与企业环境治理,已经取得一定成效。建议我国政府继续推动环境政策创新,积极创造更多利益相关者成长的制度空间,为我国企业环境绩效的提高提供更多动力。

医疗失效模式与效应分析提高NICU新生儿手术转运安全性的研究

目的:探究医疗失效模式和效应分析(HFMEA)在NICU新生儿手术安全转运中的实践运用效果。方法:将我院2021年9月1日—11月30日收治的17例手术新生儿作为对照组,采用常规护理;将2021年12月1日—2022年3月31日收治的19例手术新生儿作为干预组,应用HFMEA对手术患儿转运流程进行潜在的风险识别、制定并实施控制方案进行院内安全转运。比较两组危急值评分、转运平均时长、不良事件发生情况及转运参与者满意度。结果:干预组失效模式RPN评分、转运平均时长、不良事件发生情况、转运参与者满意度均优于对照组(P<0.05)。结论:对NICU手术新生儿实施HFMEA管理,可以优化转运流程,提高医护人员快速反应能力,降低转运风险。

北京部分社区55岁及以上人群颈动脉粥样硬化性病变的超声筛查

目的调查北京部分社区年龄≥55岁人群颈动脉粥样硬化病变的情况。方法以整群随机抽样的方法,从北京城乡3个区(宣武、大兴、怀柔)中各选出一个社区,选取1557人(男706人,女851人)年龄≥55岁的人群进行颈动脉粥样硬化性病变的筛查。采用颈动脉超声检测颈动脉内一中膜厚度(IMT,≥1 mm为动脉粥样硬化病变开始的标志)、斑块、血管狭窄或闭塞等病变,记录高血压、糖尿病、冠心病、高血脂、吸烟等危险因素的发生情况。结果①颈动脉粥样硬化性病变的检出率为88.4%。其中单纯IMT增厚、单发斑块、多发斑块、至少一处存在狭窄或闭塞病变的检出率分别为22.7%、21.3%、38.9%和5.6%。②单纯IMT增厚、多发斑块及狭窄或闭塞病变的检出率均随年龄增长而逐渐升高;且男性检出率均高于女性(91.3%比84.5%;40.1%比28.7%,7.7%比3.9%),均P<0.01。按每5岁为一个年龄段,男性65～69岁年龄段检出率增长最快,女性则为70～74岁年龄段。③城市居民颈动脉IMT增厚、多发斑块及狭窄或闭塞的发生率分别为90.9%、37.7%和7.4%,高于乡村居民的87.1%、31.9%和4.7%,P<0.05。④城市居民的高血压、糖尿病、冠心病及高血脂的发生率(57.4%、22.2%、20.5%和34.1%)均高于乡村(39.6%、8.6%、12.1%和13.0%),而吸烟的比例低于乡村(15.5%比30.4%),均P<0.01。结论北京地区人群颈动脉粥样硬化的检出率较高,男性高于女性,且发病年龄早于女性。城市居民动脉粥样硬化病变的检出率及严重程度高于乡村。

长江三角洲城市间环境公平性研究

定义了环境公平性包括基于自然资源禀赋的环境公平性及基于经济产出的环境公平性。为表征基于自然资源禀赋的环境公平性,构造并计算了长江三角洲(简称长三角)各地环境压力指数。为表征经济产出的环境公平性,构造了环境基尼系数与绿色贡献系数。根据2004年环境经济发展水平及污染排放数据(COD与SO2排放量),计算了长三角各地级市的环境压力与基于GDP的COD与SO2环境基尼系数与各地的绿色贡献系数。借助分层聚类分析,得出以下结论:(1)从基于自然资源禀赋的环境公平性上讲,上海面临的环境压力最高,江苏省城市较浙江省高;(2)从基于经济产出的环境公平性上讲,长三角地区基于GDP的COD、SO2环境基尼系数分别为0.17与0.13,相较全国,长三角实现了更高发展水平上的均衡;(3)在长三角内部比较,镇江、泰州等部分城市COD、SO2排放的生态效率仍需进一步提高。最后指出:在区域层面上合理分布区域环境压力,在比较中提高各地生态效率是推动长三角环境保护发展、促进长三角环境保护一体化的重要举措。

酒石酸亚铁比色法测定黄鹂芽中茶多酚的含量

目的测定黄鹂芽茶中茶多酚的含量。方法采用国家标准酒石酸亚铁比色法,在535nm处测定吸光度,用对照品标准曲线法测定黄鹂芽茶中茶多酚的含量。结果茶多酚在10～100μg.L-1呈良好的线性关系;回归方程:Y=8.104 X-0.000 9,r=0.999 8,平均加样回收率为96.5%,RSD为2.1%(n=5)。结论酒石酸亚铁比色法测定茶多酚准确、可靠,可作为黄鹂芽中茶多酚的含量测定方法。

城市与城市群气候变化适应的机制、策略与方案

气候变化深刻影响了自然—社会—经济系统,给城市建设及发展带来严峻挑战。城市与城市群通过气候变化适应行动,可加强风险识别与管理,增强系统韧性,有效减缓气候导致的多维不利影响。本文阐释了以城市与城市群为主体适应气候变化的必要性和特殊性,在此基础上解析了城市与城市群气候适应的动态调控机制,分析了自然生态、经济、社会、基础设施、综合治理5个维度的适应策略,并基于区域异质的气候风险特征提出了典型城市群的适应方案,为我国城市与城市群气候韧性建设与可持续发展提供支撑。