下调ETS1对人膀胱癌细胞侵袭能力的影响

目的:探究E26转录因子1(ETS1)在膀胱癌(BCa)组织中的表达以及下调ETS1对人膀胱癌T24细胞侵袭能力的影响。方法:通过免疫组织化学方法检测人正常膀胱上皮组织和BCa组织(组织均来源于我院泌尿外科)中ETS1蛋白的表达;体外实验,将人工合成的靶向ETS1的小干扰RNA(siRNA)转染至T24细胞中,根据细胞转染情况和siRNA序列,将T24细胞分为阴性对照组(NC组)和敲低组(siETS1-1和siETS1-2组);采用Transwell小室实验检测T24细胞系NC组、siETS1-1组和siETS1-2组细胞侵袭能力;采用蛋白印迹法(Western blot法)和荧光定量PCR法检测NC组、siETS1-1组和siETS1-2组中ETS1、基质金属蛋白酶2(MMP2)和基质金属蛋白酶9(MMP9)等蛋白及mRNA的表达;采用Pearson相关性分析膀胱癌肿瘤基因组图谱(TCGA)临床数据库中ETS1与MMP2和MMP9的相关性。结果:ETS1在人正常膀胱上皮组织中相对表达水平为3.36±0.53,低于BCa组织的5.52±0.39,差异有统计学意义(P<0.01);转染后,荧光定量PCR结果显示,NC组、siETS1-1组和siETS1-2组ETS1相对表达水平分别为1.00±0.05、0.32±0.04和0.28±0.02,差异均具有统计学意义(P<0.05);Transwell结果显示,NC组、siETS1-1组和siETS1-2组侵袭细胞数分别为25.67±3.48、12.67±1.86、9.67±2.60,NC组高于siETS1-1、siETS1-2组,差异均具有统计学意义(P<0.05);Western blot结果显示,siETS1-1、siETS1-2组与NC组比较,MMP2和MMP9都明显下调;Pearson相关性分析结果显示,在BCa组织中,ETS1的表达与MMP2(P<0.0001)和MMP9(P<0.0001)的表达均呈正相关,且差异均具有统计学意义。结论:通过免疫组织化学实验和体外细胞实验检测显示,ETS1在膀胱癌组织中表达上调,且下调ETS1可以抑制膀胱癌细胞的侵袭特性。

下调SOX9对肾细胞癌细胞侵袭能力影响研究

目的 SOX9是一个重要的转录因子,参与了多种肿瘤细胞的侵袭和转移过程,但是其在肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)中的作用尚不清楚。本研究探讨SOX9在RCC侵袭中的作用及其相关机制。方法通过免疫组织化学方法(Immunohistochemistry,IHC)检测人正常肾组织和RCC组织(n正常=12,nRCC=26)中SOX9蛋白表达;使用小干扰RNA(siRNA)沉默RCC细胞系7860中的SOX9;通过Transwell小室实验检测阴性对照(negative control,NC)和SOX9敲低(knockdown,KD)的7860细胞系的侵袭能力,并通过蛋白质印迹法检测上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)上皮性标志物(E-cadherin)和间质性标志物(N-cadherin和vimentin)蛋白表达水平。结果 SOX9蛋白在人正常肾组织中相对表达水平为3.25±0.22,低于RCC组织的表达水平5.69±0.38,差异有统计学意义,t=4.246,P<0.001;Transwell结果显示,下调SOX9可以抑制RCC 7860细胞的侵袭能力,其中NC组、KD1组和KD2组侵袭细胞数分别为46.67±4.41、25.21±2.89和23.38±3.46,差异均有统计学意义(NC组与KD1组比较:t=4.111,P=0.014 7;NC组与KD2组比较:t=4.221,P=0.013 5);7860细胞系中下调SOX9可引起E-cadherin表达上调,N-cadherin和vimentin表达下调。结论 SOX9参与了RCC的侵袭过程,可作为RCC靶向治疗的潜在靶点。