慢性淋巴细胞白血病免疫表型及凋亡相关蛋白分析

目的探讨慢性淋巴细胞白血病(CLL)免疫表型和凋亡相关蛋白表达特征及其临床意义。方法应用CD45/SSC设门方案,通过三色流式细胞术对150例CLL患者、105例急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者骨髓或外周血进行免疫分型。结果 150例CLL患者均高表达CD19;HLA-DR、CD20、CD5、CD22、CD38、CD23阳性率依次为96.67%、95.33%、84.67%、86.67%、40.67%、60.66%;CD10、cCD79a、CD3、CD25、CD34、ZAP70、FMC7阳性率较低,依次为3.33%、15.33%、4.67%、1.33%、3.33%、11.43%、8.67%。其他抗体均无表达;与B-ALL患者相比,CLL患者CD5、CD20阳性率升高(P<0.05),CD10、CD34、CD22、Ccd79a阳性率降低(P<0.05),CD19、HLA-DR表达率无统计学差异(P>0.05)。CLL患者凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax阳性率分别为74.67%和7.33%。结论 CD5、CD20、CD19是CLL特异性免疫表型,ZAP70、CD38可作为预后判断指标,CLL细胞Bcl-2高表达、Bax低表达,在疾病发生、发展中意义重大。

流式细胞术检测多发性骨髓瘤免疫表型的研究

目的探讨多发性骨髓瘤(MM)细胞的免疫表型特征,为临床提供早期诊断、治疗及预后判断的依据。方法采用多色流式细胞术,通过CD45/SSC设门的方法。分析118例MM骨髓标本的免疫表型,并选取15例正常人浆细胞作为对照组。结果 118例MM患者中CD138、CD38、CD117、CD56、CD33、CD13、CD9、Lambda、Kappa、HLA-DR的阳性率依次为91.53%、94.92%、44.07%、72.03%、25.42%、17.80%、29.66%、39.83%、30.51%和62.71%,其他抗体阳性率极低或均不表达。结论流式细胞术免疫分型是检测MM细胞的有效方法,MM细胞的免疫分型有助于MM的准确诊断及预后监测。

肝病患者血脂变化的临床价值

[目的 ]探讨肝病患者血清总胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)、脂蛋白胆固醇 (HDL -C、LDL -C)、载脂蛋白 (ApoA -Ⅰ、ApoB10 0 )的变化及临床意义。[方法 ]测定肝病患者 (肝炎、肝硬化、肝癌 )15 3例的血清TC、TG、HDL -C、LDL -C、ApoA -Ⅰ、ApoB10 0 的水平。 [结果 ]与正常对照组比较 ,肝病患者血脂的各项指标均发生显著变化 (P <0 .0 5 )。 [结论 ]血清脂类水平可反映出肝脏脂类的代谢状况 ,对肝病的诊断和治疗具有一定的应用价值。

糖化血红蛋白检测在糖尿病诊治中的临床价值

糖尿病是一种很常见的内分泌代谢疾病,其病因和发病机制尚未完全明确,然而它引起的并发症严重危害人们的身体健康。目前糖尿病已经成为威胁人类生命健康的第三大慢性病,不仅发病率高,且呈增长趋势,故糖尿病的早期发现和早期诊断刻不容缓。由于早期糖尿病起病隐匿,缺乏或无典型的临床症状,监测和控制血糖水平对糖尿病及其并发症的诊治非常关键。

免疫印迹法检测胰岛自身抗体系列在糖尿病分型诊断中的应用

目的探讨免疫印迹法检测胰岛自身抗体系列——抗谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)、抗胰岛细胞抗体(ICA)、抗胰岛素自身抗体(IAA)在糖尿病分型诊断中的应用及临床意义。方法应用免疫印迹法联合检测187例糖尿病患者及30例健康体检者血清中的GADA、ICA、IAA。结果应用免疫印迹法检测T1DM组中GADA、ICA、IAA阳性率分别为65.22%、53.62%和28.99%,显著高于T2DM组(P<0.05)及正常对照组(P<0.05);T2DM组GADA、ICA、IAA阳性率分别为12.71%、11.02%和5.93%,与正常对照组比较有统计学差异(P<0.05)。结论免疫印迹法检测胰岛自身抗体系列对于临床糖尿病的诊断及分型具有重要的临床应用价值。

内毒素的测定与临床意义

内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁中的成分 ,既可对机体产生许多致病作用 ,又可对机体发挥有益的生物学活性。本文对其主要检测方法如比色法、凝胶法、浊度法、酶联免疫吸附法、流式细胞术法等以及内毒素的检测对消化系统疾病、细菌感染性疾病。

糖尿病患者血清GAD-Ab、ICA、IAA联合检测的临床意义

[目的 ]探讨糖尿病患者血清谷氨酸脱羧酶抗体 (GAD -Ab)、胰岛细胞抗体 (ICA)和胰岛素自身抗体 (IAA)的联合检测在临床中的重要意义。 [方法 ]用ELISA法测定 4 3例 1型糖尿病 (ID DM )患者、5 5例 2型糖尿病 (NIDDM )患者和 5 0例正常人血清中的GAD -Ab、ICA、IAA。 [结果 ]1型糖尿病组中GAD -Ab、ICA、IAA的阳性率分别为 76 .7%、37.2 %、2 5 .6 % ;2型糖尿病组中 3种抗体的阳性率分别为 9.1 %、1 0 .9%、1 0 .9% ;正常对照组中GAD -Ab、ICA、IAA均为阴性。 1型糖尿病患者的GAD -Ab、ICA、IAA阳性率都高于 2型糖尿病患者 (P <0 .0 5 )及正常对照组 (P<0 .0 5 )。 [结论 ](1 )测定GAD -Ab在糖尿病分型及预测中优于ICA和IAA。 (2 )GAD -Ab、ICA、IAA的联合检测是鉴别 1型糖尿病和 2型糖尿病的重要血清学指标。 (3)在预测 1型糖尿病发病及早期诊断中 ,GAD -Ab、ICA、IAA的联合检测可提高检出阳性率 ,避免漏诊 。

多发性骨髓瘤免疫表型特征及其意义

本研究探讨多发性骨髓瘤细胞的免疫表型特征及其意义。采用流式细胞仪多参数直接免疫荧光技术、CD45/SSC设门,对31例多发性骨髓瘤患者骨髓瘤细胞标记CD138、CD38、CD56、CD117、HLA-DR、CD3、CD7、CD13、CD33、CD19、CD20、CD22、CD34进行检测,并辅以瘤细胞的形态学检查。结果表明:形态学检查观察到瘤细胞比例为10%-68%,CD45/SSC设门证实可疑瘤细胞比例为9.72%-67.77%;抗原阳性表达比例分别为CD13861.29%,CD38 100%,CD56 46.15%,CD13 70.00%,CD33 29.03%,HLA-DR74.19%,CD117 33.33%,其余抗原均为阴性表达。结论:CD45/SSC设门技术可以较准确地设定需要分析的多发性骨髓瘤细胞群,与形态学分类瘤细胞的比例相接近;瘤细胞以表达CD138、CD38、CD56抗原为主,部分患者可伴有髓系抗原CD13、CD33、CD117表达,有关这些抗原表达的生物学意义尚待进一步研究。

流式细胞术在159例急性白血病免疫分型中的应用

目的探讨急性白血病免疫分型的特点及其临床意义。方法利用CD45/SSC双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术免疫表型分析。结果(1)在119例AML患者中髓系相关抗原CD13(91.59%)、CD117(86.97%)和CD33(84.03%)阳性表达率最高,还有14.28%的AML患者伴有淋系抗原的表达,主要为CD7(14.28%)和CD19(1.68%)。29例B-ALL患者,CD19和HLA-DR全部阳性(100%),其次为CD34(92.03%)、CD22(62.07%)。11例T-ALL患者,CD7表达的阳性率最高(100%),CD3(72.73%)和CD2(63.64%)次之。(2)AML患者中,除大多数AML-M3患者CD34和HLA-DR为阴性表达外,其他亚型患者CD13、CD117、CD33、CD34和HLA-DR均为高表达。结论在流式细胞仪上采用CD45/SSC双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术分析,使得免疫分型的结果更为可靠。

利用CFSE标记检测CD8^+淋巴细胞增殖

[目的 ]介绍一种新的检测淋巴细胞增殖的方法。 [方法 ]用本室构建的重组蛋白疫苗hsp6 5-CAP3对C5 7小鼠进行 3次免疫后 ,分离小鼠的脾细胞 ,以照射灭活的CAP3转基因细胞为刺激细胞 ,在体外刺激淋巴细胞的增殖反应。淋巴细胞在与刺激细胞共培养之前用绿色荧光染料羧乙基锗倍半氧化物 (CFSE)进行标记。在共培养 72h后 ,用PE标记的抗鼠CD8分子的单抗标记淋巴细胞。收集细胞进行FACS检测 ,出现在二维点图左上象限的细胞代表CFSE含量减少的CD8+淋巴细胞 (CD8+CFSElow)即增殖的CD8+淋巴细胞 ,利用流式细胞仪记数左上象限CD8+CFSElow细胞的比例。 [结果 ]经体外刺激的脾淋巴细胞中 ,实验组CD8+CFSElow的平均百分比值为 (16 .4 7± 2 .10 ) % ,对照组CD8+CFSElow 的平均百分比值为 (7.6 9± 1.6 5 ) % (P <0 .0 5 )。 [结论 ]通过FACS结果判定CD8+淋巴细胞发生了特异性的增殖。CFSE标记是一种有效的检测淋巴细胞增殖的方法。

姜黄素对肝癌细胞株SMMC7721凋亡的研究

[目的]探讨姜黄素对人肝癌SMMC7721细胞株的生长凋亡作用及机制。[方法]用MTT法检测姜黄素对肝癌细胞系SMMC7721增殖的影响;应用流式细胞术检测不同浓度姜黄素对SMMC7721细胞凋亡及线粒体膜电位的影响。[结果]姜黄素对SMMC7721细胞具有明显的增殖抑制作用,在6.25～50μmol/L范围内成剂量依赖性,与对照组相比差异具有显著性意义,P〈0.01。姜黄素6.25、12.5、25、50μmol/L诱导SMMC7721细胞24 h的凋亡率为6.3%、7.2%、37.3%、72.3%,线粒体膜电位下降为6.3%、13.8%、47.8%和87.9%。[结论]姜黄素可通过诱导细胞凋亡而有效抑制肝癌细胞SMMC7721增殖,并与线粒体膜电位降低相关。

凉血活血复方治疗进展期银屑病疗效及安全性评价

目的评价凉血活血复方治疗进展期银屑病的疗效与安全性。方法随机、双盲、安慰剂对照的实验设计,治疗进展期银屑病62例,凉血活血复方治疗组35例,安慰剂对照组27例,疗程8周,比较其疗效和不良反应。结果凉血活血复方治疗组的有效率57.6%,明显高于安慰剂对照组的24.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。凉血活血复方治疗组的不良反应率17.14%,未见毒副作用。结论凉血活血复方治疗进展期银屑病疗效确切,不良反应少,安全性好。

三色流式细胞术分析急性淋巴细胞白血病免疫分型

本研究探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)各亚型免疫分型的特点及其临床意义。利用CD45/SSC双参数散点图设门方法,对40例ALL进行三色流式细胞术免疫表型分析。结果显示:采用CD45/SSC双参数散点图设门法能清楚地区分骨髓或外周血中的淋巴细胞、单核细胞、粒细胞、有核红细胞和原始细胞群。40例ALL中B-ALL26例,T-ALL11例,HAL3例。26例B-ALL中CD19全部(100%)阳性表达,而11例T-ALL中CD7表达的阳性率最高(100%)。伴髓系抗原表达的ALL(My+ALL)比较常见,本实验中共有12例,约达到30.0%,经常累及B淋巴系统(占My+ALL的75.0%);在髓系抗原中以CD13表达阳性率最高;有3例患者为急性杂合性白血病(HAL),发病率为7.5%,且全部为髓系、B系共同表达,其中有2例患者CD34阳性表达,占66.67%。结论:在流式细胞仪上采用CD45/SSC双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术分析,能排除正常细胞的干扰,使免疫分型的结果更为准确、可靠。

中西医结合治疗功能性消化不良及其与Cajal间质细胞关系的研究进展

功能性消化不良(FD)是临床常见消化系统疾病,具有持续性和反复发作性的特点。关于FD的病因和发病机制尚不明确,胃肠动力障碍是FD发病的主要病理生理基础。Cajal间质细胞(ICC)是胃肠道起搏细胞,也具有信号传导功能,对胃肠动力的发生和调控起重要作用,深入了解ICC与FD之间的关系将为中西医结合治疗FD提供新思路。

四磨汤与功能性消化不良模型大鼠胃RhoA及ROCK的关系研究

目的研究四磨汤与功能性消化不良模型大鼠胃RhoA及ROCK的关系,探讨其治疗机制。方法通过碘乙酰胺灌胃、孤养及平台站立剥夺睡眠制备功能性消化不良大鼠模型。观察大鼠的一般状态,通过旷场试验和糖水试验鉴定大鼠模型。采用胃平滑肌肌条收缩实验检测抑制剂 Y27632和四磨汤对胃平滑肌肌条作用。采用荧光定量PCR法检测大鼠胃组织RhoA及ROCK表达情况。结果构建完成功能性消化不良大鼠模型;抑制剂 Y27632干预了四磨汤对胃平滑肌肌条的增强作用;荧光定量PCR结果显示模型组RhoA及ROCK基因mRNA的表达较正常组表达降低且有统计学意义(P<0.05;P<0.01);四磨汤干预后,四磨汤组RhoA及ROCK基因mRNA的表达较模型组表达升高且有统计学意义(P<0.01;P<0.05)。结论成功构建功能性消化不良大鼠模型。RhoA及ROCK的表达可能与四磨汤对功能性消化不良作用有相关性。

简易的沙眼衣原体扩增及纯化方法的建立

目的建立扩增培养和纯化沙眼衣原体的简化方法。方法采用HeLa细胞培养扩增衣原体,并应用一步法将沙眼衣原体纯化回收。结果获得了具有高感染活性的沙眼衣原体。结论该方法与常规方法相比更简便、快速,同时减少污染机会、不需要超声和超速离心机等设备。

菝葜乙醇提取物对大鼠离体胃肠道平滑肌收缩活动的作用

目的研究菝葜乙醇提取物对大鼠离体胃肠道平滑肌收缩活动的影响及作用机制。方法以大鼠离体胃肠道平滑肌条作为研究对象,用生物功能实验系统记录和观察20、40和80 mg/mL的菝葜乙醇提取物分别在正常条件下及阿托品作用下对大鼠胃肠道平滑肌振幅的影响。结果菝葜乙醇提取物可显著增强大鼠胃肠道平滑肌条的振幅,且随浓度呈升高趋势;而菝葜乙醇提取物对阿托品引起的胃肠道平滑肌松弛效应具有明显拮抗作用。结论菝葜乙醇提取物对大鼠胃肠道平滑肌条的收缩活动具有显著的加强作用。

大黄素对豚鼠胃窦环形肌自发性收缩活动的影响及相关机制

目的:观察大黄素(emodin)对豚鼠胃窦环形肌自发性收缩活动的影响及相关机制.方法:用四道生理记录仪记录豚鼠胃窦环形肌自发性收缩活动;用膜片钳记录豚鼠胃窦环形肌细胞上L型钙电流,观察L型钙电流在大黄素增强豚鼠胃窦环形肌自发性收缩活动中的作用.结果:大黄素在一定的浓度范围内增强豚鼠胃窦环形肌自发性收缩活动并呈剂量依赖性,给予5、10、15、20、25、50mol/L的大黄素后豚鼠胃窦环形肌自发性收缩的幅度分别为对照组的108.2%±6.2%、150.6%±8.3%、198.2%±7.6%、200.2%±8.6%、160.0%±6.8%、81.2%±6.2%.预先加入10mol/L的硝苯地平,完全阻断大黄素增强豚鼠胃窦环形肌自发性收缩活动.10mol/L和20mol/L的大黄素明显增强豚鼠胃窦环形肌细胞上钡电流(IBa),用10mol/L的大黄素灌流开始后200s左右时IBa电流峰值变化趋于稳定,20mol/L的大黄素灌流开始后170s左右时IBa电流峰值变化趋于稳定.加药后IBa电流峰值分别增加到对照组电流最大值的137.88%±5.79%和158.69%±6.11%.结论:大黄素增强豚鼠胃窦环形肌自发性收缩,细胞外钙通过L型钙通道内流入细胞内引起平滑肌收缩是大黄素促进豚鼠胃窦环形肌自发性收缩的作用机制之一.

抗核糖体P蛋白在神经精神病性系统性红斑狼疮的临床诊断价值

系统性红斑狼疮（systemic lupus erythemato-是可累及全身任何脏器的自身免疫性疾病，侵犯中枢神经系统可表现为各种各样的神经、精神症状，此类型患者被称作神经精神病性系统性红斑狼疮（neuropsychiatric SLE, NPSLE），是SLE病情严重的表现，也是导致SLE患者死亡的主要原因之一，约17％-75％的SLE患者在病程中出现中枢或周围神经系统受累，所以早期发现系统性红斑狼疮的神经精神病损尤为关键。本研究利用ELISA监测SLE患者Rib—P，探讨Rib-P蛋白抗体对早期发现SLE神经狼疮的诊断价值。

逆转录病毒滴度测定新方法的实验研究

[目的]研究一种简便、快速的能获取较高病毒滴度的体外培养方法。[方法]用质脂体转移法将逆转录病毒载体pLXIn转染到包装细胞PA317中,用G418筛选出抗性克隆,扩大培养,再收集上清,并测定病毒滴度。比较不同方法产生病毒的多少,为提高病毒滴度而进一步感染靶细胞奠定良好的实验基础。[结果]改良后的新方法(低温32℃、无CO2条件以及反复冻融法)较常规方法(37℃、5%CO2)可提高病毒滴度至少10倍。PTs,PTas和PLXIn组病毒颗粒数分别提高到1.3×105CFU/mL、1.2×105CFU/mL、1.5×105CFU/mL。[结论]逆转录病毒滴度测定新方法简便、快捷,能获取较高病毒滴度。