支座用石墨烯/导电炭黑橡胶材料的制备与性能

以石墨烯和特制导电炭黑为功能填料,溴化丁基橡胶(BIIR)为基胶,制备出阻尼性能较好的导电橡胶材料.针对石墨烯/导电炭黑10种不同的组分,开展了力学性能、动态力学性能与电阻率测试实验,探究了加入石墨烯与导电炭黑对BIIR性能的影响规律.结果表明,导电炭黑对BIIR材料有补强效果,石墨烯/导电炭黑协同并用可以有效提高BIIR的阻尼性能与导电性能.在每100 g总胶料中添加40 g导电炭黑时,BIIR/导电炭黑复合材料的拉伸强度与撕裂强度分别达到20.28 MPa和45.66 kN/m.当导电炭黑和石墨烯并用组分的质量比为40∶10时,BIIR/导电炭黑/石墨烯复合橡胶材料最大损耗因子提升至0.5,电阻率为3 646Ω·cm.复合材料的导电炭黑和石墨烯组分最优质量比为40∶5.制备得到的新型复合材料具有较好的力学性能、阻尼性能与导电性能,可为隔震支座用高阻尼导电橡胶的制备提供参考.

进境苇状羊茅和多年生黑麦草种子携带内生真菌带菌率的研究

苇状羊茅内生真菌和多年生黑麦草内生真菌曾给一些国家的畜牧业造成巨大损失。为防止内生真菌随进境草籽传入我国并在中国扩散危害,我们对该2种进境草籽内生真菌的带菌率进行了研究。首先通过分离培养,得到了苇状羊茅内生真菌和黑麦草内生真菌,然后采用染色法对1998年以来收集到的从天津口岸进境的部分苇状羊茅和黑麦草种子进行了初步检验,经检验,37份苇状羊茅样品中有18个品种带菌,34份多年生黑麦草样品中14个品种带菌,带菌率最高可达86.7%。早熟禾、剪股颖等其它禾本科草籽目前尚未发现带有内生真菌。

Neotyphodium coenophialum和N.lolii的PCR检测

以N·coenophialum和N·lolii及其近似种N·huerfanum、N·chisosum、N·aotearoae、N·sp·共6个种18个菌株及苇状羊茅和多年生黑麦草8个品种的供试种子,通过对Tub-2基因引物IS1~IS3和NC25基因引物F1~R1进行扩增,设计了种子中Neotyphodium属内生真菌套式扩增的通用引物Tub-2-F^Tub-2-R,设计了N·coenophialum和N·lolii的特异引物F3~R3,建立了N·coenophialum和N·lolii的菌丝常规PCR和单粒种子套式PCR检测方法,使N·coenophialum和N·lolii的检测达到了单粒种子的水平,缩短了检测时间。建立的N·coenophialum和N·loliiPCR检测方法特异性强,结果可靠,检测速度快。

Cr含量对X120级管线钢组织及耐酸性腐蚀性能的影响

运用SEM,TEM和失重法研究了Cr元素对X120级管线钢力学性能及耐CO2/H2S腐蚀性能的影响。力学性能结果表明:四种实验钢显微组织均为回火马氏体,力学性能均达到API 5L标准中X120级别,且随Cr含量增加,板条束数量增加,宽度变窄,使得屈服强度和抗拉强度逐渐增大;钢中析出物主要为(Nb,Ti)(C,N),当Cr含量达到3%(质量分数)时,析出物中发现极少量Cr。腐蚀实验结果表明:在CO2/H2S环境下,四种钢腐蚀产物膜均分为两层,内层主要为CO2腐蚀产物FeCO3,外层是FeS;Cr主要存在于腐蚀产物膜的内层,且随钢中Cr含量的增加,Cr在内层腐蚀产物中的富集量加大;钢中的Cr元素使腐蚀产物膜变得致密且具有离子选择性,阻止腐蚀液中的阴离子到达基体,进而提高钢的耐CO2/H2S腐蚀性能。

苇状羊茅内生真菌与多年生黑麦草内生真菌实时荧光PCR检测研究

苇状羊茅内生真菌Neotyphodium coenophialum和多年生黑麦草内生真菌N．lolii对美国、新西兰等国家的畜牧业曾经造成过巨大损失。以N．coenophialum和N．lolii及其近似种N．huerfanum、N．chisosum、N．aotearoae、N．sp．共6种18个菌株,以及苇状羊茅和多年生黑麦草8个品种种子为供试材料,根据Tub-2基因设计了通用Taqman探针及引物,根据NC25基因设计了N．coenophialum和N．lolii的特异Taqman探针及共用引物,通过通用探针的单色荧光PCR和特异探针的双色荧光PCR,建立了N．coenophialum和N．lolii的菌丝及单粒种子稳定可靠、特异性强的荧光PCR检测方法,检测灵敏度达到单粒种子,使检测时间由至少一个月缩短至7～8个小时。

实时荧光RT-PCR检测辣椒轻斑驳病毒的初步研究

本研究选取辣椒轻斑驳病毒PMMoV、烟草花叶病毒TMV、黄瓜花叶病毒CMV和马铃薯Y病毒PVY作为试验材料,根据PMMoV衣壳蛋白(CP)RNA的序列特异性位点,设计出Taqman荧光探针及其引物,采用实时荧光RT-PCR技术对PMMoV进行快速检测,同时与ELISA方法进行了灵敏度比较,结果表明:该方法具有较高的灵敏度及较强的特异性,PMMoV检测结果为阳性,TMV、CMV和PVY均无荧光信号,为阴性,灵敏度是传统的ELISA方法的100倍,而且大大缩短了检测时间。该方法快速、准确、灵敏、简便、安全,具有实际应用价值,适用于植物病毒病害的快速检测。

寄生霜霉Peronospora parasitica(Pers.)Fr.孢子囊萌发方式的观察

寄生霜霉Peronospora parasitica（Pers.）Fr.主要为害十字花科植物,引起许多蔬菜及油菜的霜霉病,常造成严重损失,寄主范围较广,常见寄主有油菜、甘蓝、花椰菜、白菜、芥菜、萝卜等,是霜霉属最重要的种之一（陆家云2001;张中义等1986）。侵染白菜引起白菜霜霉病。白菜小苗被害时,初在叶背面出现白色霜状霉层，叶正面没有明显病状，严重时幼苗及予叶变黄枯死。

基于rbcL基因序列的欧洲菟丝子分子检测

菟丝子属(Cuscuta L.)被列为我国禁止进境的植物检疫性有害生物,目前进出境口岸使用常规形态学鉴定方法对菟丝子属的检测很难鉴定到种。本文通过扩增寄生于大豆上的6种菟丝子的1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶大亚基基因(rbcL)序列,通过Clustal X比对分析该6种菟丝子基因序列的差异,设计了针对欧洲菟丝子的特异引物,实现了对欧洲菟丝子(Cuscuta europaea)快速、准确的PCR分子检测,灵敏度达到单粒种子,满足各口岸对欧洲菟丝子的检测需求。

Cr对Q125级套管钢组织性能及CO_2/H_2S腐蚀行为的影响

为了明确Cr元素对深井、超深井用Q125级套管钢性能的影响，本文设计了4种不同Cr含量的石油套管钢，研究了Cr含量对试验钢组织、力学性能以及CO2／H2S腐蚀行为的影响．试验结果表明：Cr质量分数在0．4％～3％变化时，试验钢的屈服强度、抗拉强度随着Cr含量的增加而增大，但横向、纵向冲击功及延伸率则呈现先增大后减小的趋势，当Cr质量分数为1％时，冲击功和延伸率达到最大值；在CO2／H2S共存环境下，4种试验钢腐蚀产物膜均分为两层，内层以FeCO3为主，外层则是FeS和FeS1-x为主，而Cr主要在腐蚀产物膜的内层富集，且随着基体中Cr含量的增加腐蚀产物内层膜的Cr含量也随之增加；Cr的富集增加了腐蚀产物的致密性，进而提高了阻碍基体表面与液体之间离子扩散的能力，使得钢的腐蚀性能得到提高．

苇状羊茅与多年生黑麦草内生真菌菌丝基因组DNA提取的优化及PCR初步检测

感染内生真菌的禾草在牧草和草坪业上具有重要的生态和经济意义，家畜采食感染Neotyphodium coenophialum和N．lolii的苇状羊茅Festuca arundinacea和多年生黑麦草Lolium perenne会发生中毒。研究收集天津口岸1998年以来进境的部分苇状羊茅和多年生黑麦草种子，对经镜检确认带有内生真菌的种子进行分离培养，对疑似菌株的茵丝用改进的Moiler等方法进行基因组DNA抽提，测定浓度及纯度，对照原方法，DNA的纯度有较大提高，浓度略有上升。Tubulin2基因的引物IS1～IS3扩增结果显示为单一的条带，结合形态学和序列比对，分离培养得到的茵株可以基本确定为N．coenophialum和N．lolii。根据Genbank中N．coenophialum和N．lolii的NC25基因序列设计出引物F1～R1，扩增得到能区分开N．coenophialum和N．lolii的单一条带（相差160bp），建立了N．coenophialum和N．lolii的PCR检测方法，结果准确可靠。

多年生黑麦草中小麦矮腥黑穗病菌PCR检测方法的建立

寄生于多年生黑麦草的Tilletia属腥黑粉菌共有4种,即小麦矮腥黑穗病菌Tilletia controversa(TCK)、黑麦草腥黑粉病菌T.lolii、T.vankyi、黑麦草粒腥黑穗病菌T.walkeri。本研究分析了黑麦草上冬孢子形态非常相似的3种腥黑粉菌的DNA序列差异,设计了TCK的特异引物,成功建立了TCK菌丝基因组DNA的特异PCR检测方法和冬孢子的套式特异PCR检测方法。

翦股颖上腥黑粉菌近似种多重分子检测

匍匐翦股颖(Agrostis stolonifera)和细弱翦股颖(A.tenuis)是优良的牧草和草坪草。寄生于翦股颖上的腥黑粉菌共有3种,即小麦网腥黑穗菌(Tilletia caries,TCT)、翦股颖腥黑穗菌(T.sphaerococca)和苍白腥黑粉菌(T.pallida)。在形态、自发荧光和萌发生理3方面比较研究的基础上,选取冬孢子形态非常相似的2种腥黑粉菌TCT和T.sphaerococca为研究对象,依据序列特点设计4套引物,成功建立了TCT和T.sphaerococca菌丝基因组DNA的特异双重PCR检测方法和冬孢子的特异套式双重PCR检测方法。

Q125级1% Cr套管钢焊接接头CO_2腐蚀行为

采用高温高压反应釜和电化学测试手段对含Cr质量分数为1%的Q125级套管钢焊接接头的CO2腐蚀行为进行了研究。结果表明:焊接接头的母材和热影响区的耐CO2腐蚀性能相近,母材为回火马氏体,热影响区为回火索氏体,组织对实验钢的耐CO2腐蚀性能影响不明显。焊缝区的Cr含量较高,腐蚀产物中的Cr富集加剧,且结构致密,其更能有效的阻止阴离子的通过,从而保护金属基体免受腐蚀介质的腐蚀。电化学分析可得,焊缝区的自腐蚀电位最正,自腐蚀电流最小,不易发生腐蚀;母材区的自腐蚀电位最负,自腐蚀电流最大,母材金属将作为阳极首先发生腐蚀,焊缝作为阴极得到保护。

黑麦草腥黑粉菌分子检测方法的研究

寄生于黑麦草属植物有4种腥黑粉菌,分别是小麦矮化腥黑穗病菌(Tilletia.Controversa(TCK))、黑麦草腥黑粉菌(T.lolli)、黑麦草粒腥黑粉菌(T.walkeri)和新种(T.vankyi)。其中TCK、T.lolli和T.vankyi冬孢子形态非常相似,难以区分。本研究以寄生于黑麦草上的这3种腥黑粉菌为研究对象,设计T.lolli的特异引物,成功建立了T.lolli冬孢子的套式特异PCR检测方法。

苇状羊茅与多年生黑麦草内生真菌菌丝基因组DNA提取的优化及PCR初步检测

感染内生真菌的禾草在牧草和草坪业上具有重要的生态和经济意义，家畜采食感染Neotyphodium coenophialum和N.lolii的苇状羊茅和多年生黑麦草会发生中毒。本研究收集天津口岸1998年以来进境的部分苇状羊茅和多年生黑麦草种子，对经镜检确认带有内生真菌的种子进行分离培养，对疑似菌株的菌丝用改进的Moiler等方法进行基因组DNA抽提，测定浓度及纯度，对照原方法，DNA的纯度有较大提高，浓度略有上升。Tubulin2基因的引物IS1-IS3扩增结果显示为单一的条带，结合形态学和序列比对，分离培养得到的菌株可以基本确定为N．coenophialum和N。lolii。根据Genbank中N.coenophialum和N.lolii的NC25基因序列设计出引物F1-R1，扩增得到能区分开N.coenophialum和N．lolii的单一条带（相差160bp），建立了N．coenophialum和N．lolii的PCR检测方法，结果准确可靠。

渍水土壤中小麦矮化腥黑穗病菌活性研究

小麦矮化腥黑穗病菌(Tilletia controversa K(?)hn)冬孢子具有很强的抗逆性,在土壤中可存活10 a以上,该病害的阻断是一个历久弥新的问题.试验将小麦矮化腥黑穗病菌冬孢子埋于种植水稻的稻田,通过对埋土前后冬孢子的萌发率和自体荧光率的测定,研究小麦矮化腥黑穗病菌在稻田中活性的变化及冬孢子萌发与自体荧光之间的关系.2a试验结果表明:随着处理时间的延长,冬孢子的萌发率和自体荧光率均逐渐降低,经过一个完整稻季处理后,病菌冬孢子萌发活性和自体荧光特性都全部丧失,丧失自体荧光的冬孢子,其萌发活性也相应丧失.

等温扩增方法检测耐高温α-淀粉酶基因

建立耐高温α-淀粉酶Amy797E基因环介导等温扩增快速检测方法。LAMP引物,优化反应条件,FIP,BIP浓度为0.8μmol/L,F3,B3浓度为0.2μmol/L,镁离子浓度为2 mmol/L,甜菜碱浓度为1.4 mmol/L,反应时间为40 min,反应温度为62℃,SYBR Green法检测需2 h,电泳法检测共需2.5 h。与实时荧光和普通PCR比较特异性良好,转基因成分检测限达到0.01%。

磷酸甘露糖异构酶基因快速初筛方法的建立

建立磷酸甘露糖异构酶(PMI)基因环介导等温扩增快速检测方法。设计了两对内引物和两对外引物,优化后的反应条件为:FIP,BIP浓度为0.8μmol/L,F3,B3浓度为0.2μmol/L,镁离子浓度为2.0 mmol/L,甜菜碱浓度为1.6 mmol/L,反应时间为40 min,反应温度为62.0℃。SYBR Green法检测需2 h,电泳法检测共需2.5 h。与实时荧光和普通PCR比较特异性良好,转基因成分检测限达到0.01%。结果表明该检测方法简单且快速。

α-乙酰乳酸脱羧酶克隆表达方法

双乙酰是啤酒生产工艺中重要的风味物质,为控制啤酒生产中双乙酰的含量,缩短啤酒熟化时间,基因工程技术改造啤酒酵母已应用得非常广泛。综述国内外基因工程技术克隆表达方法,介绍检测策略。