一文读懂丙戊酸治疗药物监测

丙戊酸是一种临床常用的广谱抗癫痫药物,同时也是治疗双相情感障碍的一线药物。《神经精神药理学治疗药物监测共识指南》强烈推荐对丙戊酸实施治疗药物监测(therapeutic drug monitoring, TDM)。现就临床申请丙戊酸TDM需要做哪些准备工作,以及如何解读丙戊酸血药浓度检测结果作出详细阐述,以期能够合理使用治疗药物监测工具,更好地发挥丙戊酸的治疗效果。

将ISO-15189要素融入临床化学检验实习带教及其效果评估

目的评价将ISO-15189要素融入临床化学检验实习的教学效果。方法对72名临床检验诊断学专业学生采用不同教学模式带教实习,评估其考核成绩、教学效果、用人单位追踪评价等指标。结果实验组学生的考核成绩优于对照组(P<0.05);实验组学生对教学效果的评价优于对照组(P<0.05),且教研室管理层对教学效果的评价与学生一致(P<0.05)。用人单位评价方面,实验组学生专业技术能力、质量体系文件执行力和标准化理念三方面打分均优于对照组(P<0.05)。结论将ISO-15189要素融入临床化学实习的教学模式有助于提高学生的专业素养和业务能力,值得在以临床实践和应用为导向的临床检验诊断学专业教学中进行更深入的探讨。

血清外泌体miRNA-193b诊断阿尔茨海默病的价值

目的探讨血清外泌体miR-193b在阿尔茨海默病(AD)早期诊断的应用价值。方法以2015年9月至2016年8月就诊于首都医科大学宣武医院的患者为研究对象,使用荧光定量PCR法检测主观认知障碍(SCD)、轻度认知障碍(MCI)、痴呆期(DAT)患者及正常对照组血清外泌体miR-193b水平并进行组间比较,用ROC曲线来评价分析miR-193b对SCD的诊断能力。结果 SCD、MCI和DAT患者血清外泌体内miR-193b水平均低于对照组,且DAT组低于MCI组,MCI组低于SCD组,差异有统计学意义(P <0.05)。诊断SCD时,AUC为0.947(95%CI:0.886～0.981),当诊断临界值为1.83时,特异度为94.7%,灵敏度为83.3%。结论血清外泌体miR-193b有望成为AD早期诊断的生物标志物。

microRNA-135a在阿尔茨海默病患者中的检测价值

目的初步探讨microRNA-135a(miR-135a)作为阿尔茨海默病(AD)生物标志物的潜在价值。方法使用实时定量PCR检测痴呆期AD(DAT)患者、轻度认知障碍(MCI)患者和表面健康受试者血清和脑脊液中miR-135a含量。结果 MCI和DAT患者血清miR-135a水平均低于对照组(P<0.05),且DAT组低于MCI组(P<0.05);MCI和DAT患者脑脊液总体miR-135a水平均低于对照组(P<0.05),且DAT组低于MCI组(P<0.05);且miR-135a对于早期AD的诊断价值可能优于Aβ42。结论血清miR-135a可能为AD,特别是早期AD诊断的标志物。

医学认证背景下临床检验诊断学教学运行和改革的几点思考

2008年9月,教育部和卫生部联合颁布了《本科医学教育标准——临床医学专业（试行）》,其医学教学质量标准达到了世界领先水平[1]。首都医科大学于2014年通过了国内外专家联合评定组的考核,取得临床医学专业认证资格。在后医学认证时代,作为临床医学的二级学科,临床检验诊断学专业的教学团队通过一年多以来在培养理念、专业课教学、实验教学和临床实习教学几个教学层次的专业认证运行,累积了一些经验和思考。

外泌体内microRNA-135a跨血脑屏障转运的初步研究

目的初步研究外泌体内micro RNA-135a(miR-135a)跨血脑屏障和细胞转运的现象。方法提取APP/PS1双转基因小鼠脑脊液(CSF)的高miR-135a外泌体,将其注射入野生型小鼠脑室并干预SH-SY5Y细胞,检测小鼠外周血和培养基外泌体内miR-135a水平及SH-SY5Y细胞β分泌酶-1(BACE-1)的表达和活性。结果高miR-135a外泌体脑室注射能使野生型小鼠CSF和血浆外泌体miR-135a显著升高(P<0.05);经APP/PS1双转基因小鼠CSF源外泌体干预的SH-SY5Y细胞,其细胞内的miR-135a含量显著高于其他干预组和对照组(P<0.05);SH-SY5Y细胞的BACE-1活性显著降低(P<0.05),且其m RNA表达水平的变化趋势与活性变化趋势一致。结论外泌体可将脑脊液中的"高miR-135a"这一生物信号跨越血脑屏障传递至外周血,这为将血浆外泌体miR-135a作为阿尔茨海默病诊断生物标志物提供了更坚实的实验依据。

外泌体ABCA1蛋白在阿尔茨海默病诊断中的价值

目的通过小鼠实验和临床标本检测初步研究外泌体ATP结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白作为阿尔茨海默病(AD)诊断标志物的价值。方法提取9月龄组APP/PS1 AD模型小鼠脑脊液(CSF)和血清外泌体分别进行质谱分析和ABCA1蛋白酶联免疫吸附试验(ELISA)检测。将3、6、9月龄组APP/PS1小鼠CSF外泌体注射至3月龄组野生型(WT)小鼠的第三脑室后分别检测0、2、4、6 h组血清和CSF外泌体ABCA1水平。检测69例主观认知下降(SCD)组、43例轻度认知障碍(MCI)组和35例痴呆期(DAT)组及30例对照组受试者的血清外泌体ABCA1水平。结果质谱和ELISA结果示:3、6、9月龄组APP/PS1双转基因小鼠CSF和血清外泌体ABCA1蛋白水平分别高于同月龄WT小鼠(P<0.05);6月龄组APP/PS1双转基因小鼠CSF和血清中外泌体ABCA1蛋白水平显著高于3月龄组APP/PS1双转基因小鼠(P<0.05),9月龄组APP/PS1双转基因小鼠CSF和血清中外泌体ABCA1蛋白水平显著高于6月龄组APP/PS1双转基因小鼠(P<0.05)。外泌体注射后2、4、6 h组的WT小鼠血清外泌体ABCA1蛋白水平显著升高(P<0.05),4 h组最高;外泌体注射后2、4、6 h组的WT小鼠CSF外泌体ABCA1蛋白水平均显著降低(P<0.05),6 h组最低。SCD组与对照组血清外泌体ABCA1蛋白水平比较差异无统计学意义(P>0.05);MCI组和DAT组血清外泌体ABCA1蛋白水平较对照组显著升高(P<0.05),且DAT组显著高于MCI组(P<0.05)。当截断值为0.39时,血清外泌体ABCA1蛋白诊断MCI的敏感度为72.5%,特异度为75.4%;当截断值为0.52时,血清外泌体ABCA1蛋白诊断DAT的敏感度为70.1%,特异度为69.2%;血清外泌体ABCA1对MCI和DAT的诊断效能显著高于SCD(P<0.05)。结论ABCA1蛋白外泌体可经透过血脑屏障到达外周血而被有效检测,其可作为AD诊断的候选标志物,但在SCD的诊断中还需积累更多的研究数据。

血浆外泌体microRNA-29c在阿尔茨海默病早期诊断价值的初步研究

目的初步探讨血浆外泌体内microRNA-29c(miR-29c)在阿尔茨海默病(AD)早期诊断种的价值。方法明确血浆外泌体内miR-29c提取和检测过程的稳定性;检测202例轻度认知障碍(MCI)和痴呆期(DAT)AD患者及120例表面健康受试者的血浆外泌体内miR-29c,建立其生物参考区间,确定截断值,比较其诊断效能。结果对照组、帕金森患者、血管性痴呆患者、MCI和DAT患者miR-29c的回收率均在95%-105%之间,且各组受试者间的回收率无统计学差异(P>0.05);MCI和DAT患者血浆外泌体内miR-29c均显著低于对照组、帕金森患者和血管性痴呆患者(P<0.05),且DAT患者显著低于MCI患者(P<0.05);对照组、帕金森患者和血管性痴呆患者血浆外泌体内miR-29c水平无显著性差异(P>0.05);使用截断值诊断MCI和DAT的灵敏度高于生物参考区间法(P>0.05)。结论外泌体内miR-29c可作为AD诊断,特别是早期诊断的候选生物标志物,且应使用其截断值而不是生物参考区间对AD进行早期诊断。

缺血性脑血管病患者绿色通道标本周转时间改进与分析

目的分析缺血性脑血管病患者绿色通道检验标本的周转时间(TAT)等质量指标,以考察绿色通道标本检验路径TAT质量目标的实施效果,为持续改进提供支撑。方法以120例缺血性脑血管病绿色通道患者作为绿色通道组,以相应的普通急诊患者120例作为普通急诊组,统计开具检验申请单、标本采集、标本接收和报告发出4个时间段的TAT;分析各检验指标的阳性率、复检率、TAT超时原因和临床反馈指标。结果 97.5%的绿色通道标本的检测结果均在目标TAT(30min)内发出,绿色通道标本各个时间段的TAT及总TAT均明显高于同时间段普通急诊标本(P<0.05);绿色通道溶栓患者血常规的白细胞阳性率明显高于同时间段其他绿色通道患者(P<0.05);绿色通道溶栓患者的凝血检测结果阳性率明显高于普通急诊患者(P<0.05)。结论该科绿色通道标本的TAT控制取得了较好效果,达到了预定的质量目标,较好地支持了急性脑血管病的临床诊治。

卡马西平对小儿癫痫患者血清钠的影响

目的探讨卡马西平、苯巴比妥、苯妥英钠和丙戊酸钠对癫痫患儿血清钠的影响。方法随机选取分别服用上述四种药物的癫痫患儿和成人癫痫患者各180例,并随机选取性别年龄匹配的儿童和成人健康对照,测定其血药谷浓度时的血清钠水平。结果服用卡马西平的患儿,其血药浓度谷水平时的血清钠浓度均显著低于小儿对照组、服用苯巴比妥的小儿癫痫组和服用卡马西平的成人癫痫组(P <0. 05)。服用苯妥英钠、苯巴比妥和丙戊酸钠的小儿癫痫患者,其血药浓度谷水平时的血清钠浓度与小儿对照组间无统计学差异(P>0.05)。服用卡马西平的患儿,其血药浓度谷水平时的血清钠阳性率(低于生物参考区间下限)均显著高于表面健康对照组和其他药物组和成年癫痫患者(P>0.05)。当血清钠离子浓度截断值为132.1 mmol/L时,对小儿癫痫的高血清卡马西平具有较好的诊断效率(灵敏度为83. 70%,特异性为87.65%)。结论本研究结果提示服用卡马西平的小儿癫痫患者,在用药期间,除应监控血药浓度外还应密切关注血清钠的变化趋势,以预防药物不良反应的发生。

外吐小体内microRNA-193b在阿尔茨海默病患者中的检测

目的初步探讨microRNA-193b(miR-193b)作为阿尔茨海默病(AD)生物标志物的潜在价值。方法使用超速离心法提取痴呆期AD(DAT)患者和轻度认知障碍(MCI)患者和健康对照组血清和脑脊液外吐小体并检测其miR-193b水平。结果 MCI和DAT患者脑脊液及血清外吐小体内miR-193b水平均低于对照组(P<0.05),且DAT组低于MCI组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论脑脊液和血清外吐小体内miR-193b可能为AD,特别是早期诊断AD的标志物。

充血性心力衰竭患者血清抗碳酸酐酶Ⅱ和Ⅲ自身抗体检测的意义

目的：使用已建立的方法检测充血性心力衰竭（CHF）患者血清中的抗碳酸酐酶Ⅱ和Ⅲ自身抗体、抗氧化物及细胞因子水平，初步评价其临床意义。方法选取58例3个月～1年前曾发生心肌梗死的CHF患者和58名健康对照者，测定其血清抗碳酸酐酶Ⅱ和Ⅲ自身抗体、红细胞沉降率（ESR）、超氧化物歧化酶（SOD）等5种抗氧化物和白细胞介素2（IL-2）等5种细胞因子的水平。结果 CHF患者血清抗碳酸酐酶Ⅱ自身抗体和ESR水平显著高于对照组（P＜0．05），SOD、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）、过氧化氢酶（CAT）和总抗氧化能力（TAC）显著低于对照组（P＜0．05），丙二醛（MDA）水平显著高于对照组（P＜0．05）。CHF患者血清的IL-2和白细胞介素17（IL-17）水平较对照组显著升高（P＜0．05），白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和γ干扰素（IFN-γ）与对照组差异无统计学意义（P＞0．05）。结论 CHF患者可能存在自身免疫的现象，IL-2、IL-17和抗氧化能力的检测可能作为判断抗碳酸酐酶Ⅱ抗体出现的指标。

糖化清蛋白/糖化血红蛋白比值在5种肝脏疾病中的测定分析

目的分析糖化清蛋白(GA)/糖化血红蛋白(HbA1c)比值以及谷氨酰转肽酶(GGT)和凝血酶原时间国际标准化比值(PT-INR)等指标在肝硬化等5种肝脏疾病中的意义。方法选取伴随或不伴随2型糖尿病(2DM)的肝硬化和肝癌等患者,测定并分析其GA/HbA1c比值以及GGT和PT-INR的改变。使用受试者工作特征曲线对GA/HbA1c比值应用于上述疾病的诊断价值进行评价。结果不伴DM的肝硬化和肝癌患者的GA/HbA1c比值较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),但伴随2DM的肝硬化和肝癌患者GA/HbA1c比值与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。GA/HbA1c比值对不伴DM的肝硬化患者的诊断界值为3.55,GA/HbA1c比值对不伴DM的肝癌患者的诊断界值为3.41,GA/HbA1c比值与GGT和PT-INR对上述5种肝脏疾病的诊断价值无相关性。结论关注GA/HbA1c的比值的变化对不伴2DM的肝硬化和肝癌患者的诊断有一定价值。

脑脊液谷胱甘肽氧化酶在阿尔茨海默病中的诊断价值

目的通过检测阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)患者脑脊液(CSF)中肌酸激酶(CK)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)等活性初步研究其在AD诊断中的价值。方法使用酶学方法检测轻度认知障碍(MCI)、痴呆期AD(DAT)患者、血管性痴呆患者(疾病对照组)及健康对照组受试者CSF的CK、GPx等酶学指标。结果 DAT受试者CSF的CK显著高于MCI组、正常对照组和血管性痴呆组(P <0. 05); MCI受试者CSF的GSSG水平显著高于健康对照组和血管性痴呆组(P <0. 05); DAT受试者的GSSG水平显著高于健康对照组、血管性痴呆组和MCI组(P <0. 05),其GPx、GR和GSH显著低于健康对照组、血管性痴呆组和MCI组(P <0. 05);使用生物参考区间时,CK和GPx具有较高的阳性率和阴性率。结论 AD患者CSF中的CK等损伤性酶学标志物及GR等氧化还原酶学标志物在AD的早期诊断和疾病分期中具有一定价值。

使用自上而下法评估23项临床生化项目的测量不确定度

目的 :利用自上而下法对23项常用临床生化检测项目的不确定度进行评估。方法:针对日立7600全自动生化分析仪所测定的23项指标,利用室内质量控制和室间质量评价计算不确定度,再计算合成标准不确定度。结果:矫正前除Cl-、P、TCH和TG外,测量不确定度结果均可满足CLIA′88推荐可允许误差;矫正后除Cl-外所有结果均可满足CLIA′88推荐可允许误差。结论:通过自上而下法可对临床生化项目的不确定度有一定了解,但具体的测量不确定度评估合格标准还有待进一步探讨。

碳酸酐酶Ⅲ自身抗体在1型糖尿病人中的测定

目的探讨1型糖尿病(T1D)患者血清抗碳酸酐酶Ⅲ自身抗体水平的变化及其与抗氧化物、细胞因子之间的关系。方法选取T1D患者共368例(T1D组),另选取性别年龄匹配的健康受试者为对照组,测定其血清抗碳酸酐酶Ⅲ自身抗体、红细胞沉降率、超氧化物歧化酶(SOD)等4种抗氧化物和白细胞介素(IL)-2等4种细胞因子的水平。结果 T1D患者血清抗碳酸酐酶Ⅲ自身抗体水平显著高于健康对照组(P<0.05);T1D患者的SOD、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和丙二醛(MDA)水平显著低于健康对照组(P<0.05);T1D患者的IL-2、IL-3和干扰素(IFN)-γ显著高于健康对照组(P<0.05)。结论抗氧化物和细胞因子水平的变化可能参与了T1D患者碳酸酐酶Ⅲ抗体的产生。

血清抗碳酸酐酶Ⅲ抗体ELISA检测方法的建立与初步应用

目的建立人血清抗碳酸酐酶(CA)Ⅲ抗体的ELISA检测方法,并对系统性红斑狼疮、皮肌炎、糖尿病肾病、高血压肾病患者和健康人群的血清抗CAⅢ抗体水平进行初步调查。方法使用抗CAⅢ抗体标准品、CAⅢ及相应酶标抗体建立血清抗CAⅢ抗体ELISA检测方法,验证试剂稳定性、标本保存稳定性,并进行精密度、灵敏度、回收率、抗干扰性等方法学评价;各项技术指标均合格后对系统性红斑狼疮、皮肌炎、糖尿病肾病和高血压肾病患者的血清进行抗CAⅢ抗体水平检测。结果成功建立ELISA检测人血清抗CAⅢ抗体的方法,其批内精密度为6.2%,批间精密度为8.2%,灵敏度为0.025,回收率为106%,且具有较好的抗干扰性、试剂稳定性和标本保存稳定性。系统性红斑狼疮和糖尿病肾病患者的血清抗CAⅢ抗体水平高于健康对照相(P<0.05),阳性率分别为43%和18%。皮肌炎和高血压肾病患者的血清抗CAⅢ抗体水平与健康对照组比较无统计学差异(P>0.05),且未出现阳性结果。结论使用现有市售试剂进行人血清抗CAⅢ抗体的ELISA检测是可行的,抗CAⅢ抗体可能参与了系统性红斑狼疮和糖尿病肾病的发生发展。

microRNA-135a突变体对β分泌酶-1的调控作用及初步临床调查

目的初步研究微小核糖核酸(microRNA,miR)-135a 3523 C→G突变对β分泌酶-1(BACE-1)表达的调控和其在阿尔茨海默病(AD)患者中的发生频率。方法分别合成野生型miR-135a(野生型组)、miR-135a 3523C→G突变体(突变体组)和无意义miR(对照组)并转染含BACE-1 mRNA荧光载体的细胞,使用酶学检测和荧光载体实验等分析miR-135a 3523 C→G突变体对BACE-1活性的影响及其初步机制;对轻度认知障碍患者(MCI)、痴呆期AD患者(DAT)和表面健康受试者进行miR-135a的测序分析。结果 miR-135a突变体转染组的BACE-1活性显著高于野生型miR-135a转染组和对照组(P<0.05)。荧光素酶实验结果显示miR-135a 3523 C→G突变体转染组的荧光强度显著高于野生型miR-135a转染组(P<0.05)。MCI患者miR-135a 3523 C→G突变携带率为3.85%(3/78),DAT患者的携带率为4.84%(6/124)。MCI患者和DAT患者的血清miR-135a水平显著高于相应的对照组(P<0.05),MCI表面健康对照组与DAT表面健康对照组的血清miR-135a水平无显著性差异(P>0.05)。结论 miR-135a 3523 C→G突变体能导致其对BACE-1表达调控的失控,其可能参与了AD的发生发展;miR-135a突变体和表达量的联合检测能提高AD的检出率。

缺氧状态下雌二醇对H9c2细胞碳酸酐酶Ⅳ表达的影响

目的缺氧为心血管事件中导致心肌细胞损伤的重要因素,本研究利用H9c2心肌细胞研究缺氧状态下雌二醇对碳酸酐酶(CA)Ⅳ表达的影响。方法使用常规培养箱和缺氧培养箱分别以0.01、1、100nmol/L和1μmol/L浓度的雌二醇作用H9c2细胞24h,测定CAⅣ的mRNA和蛋白表达水平和CAⅣ漏出量。结果缺氧状态下,CAⅣ的mRNA和蛋白表达水平较对照组显著降低(P<0.05),1μmol/L的雌二醇能有效逆转缺氧带来的H9c2细胞CAⅣ表达的下调(P<0.05)。1μmol/L的雌二醇能有效逆转缺氧条件下培养基中的CAⅣ浓度的升高(P<0.05)。结论 CAⅣ表达的改变可能参与了缺氧状态下心肌细胞的病理生理改变,雌二醇可能对缺氧状态下心肌细胞具有保护作用。

利用尿蛋白／肌酐比值测定进行尿微量清蛋白预警

目的通过对临床数据的分析总结，力图寻找尿蛋白／肌酐比值与尿微量清蛋白检测结果之间的联系，确定使用尿蛋白／肌酐比值预测尿微量清蛋白阳性结果的界值．方法选取尿微量清蛋白阳性的耱尿病、高血压患者各120例，对其尿液进行尿肌酐和尿蛋白检测，分析尿蛋白／肌酐比值与尿微量清蛋白检测结果之间的相关性，使用ROC曲线寻找使用尿蛋白／肌酐比值预测尿微量清蛋白阳性结果的界值。结果高血压、糖尿病患者及上述两种患者综合分析的尿蛋白／肌酐比值与尿微量清蛋白之间存在相关性（r^2分别为0．96，0．92和0．94）．高血压患者尿蛋白／肌酐比值诊断尿微量清蛋白的界值分别为47．2mg／L和115．4g／L，糖尿病患者分别为50．1mg／L扣137．6mg／L，两种患者综合分析结果为52．5mg／L和123．1mg／L。结论该实验成功界定了使用尿蛋白／肌酐比值对尿微量清蛋白进行预警的界值，对降低相关痰病患者检查的经济负担，缩短TAT时间及方便基层医院对患者尿微量清蛋白进行早期预警提供了一种方案。