负压引流与创面修复

探讨负压引流(VSD)促进创面修复的可能机制,寻找促进创面修复的最佳负压引流条件。本文回顾性分析了众多学者的研究成果,总结VSD技术促进创面修复的最佳条件。

腔内大量盐水灌洗辅助取出乳房内聚丙烯酰胺水凝胶临床应用

目的：探讨聚丙烯酰胺水凝胶注射隆胸后取出新方法.方法：对48例注射聚丙烯酰胺水凝胶隆胸患者术前行双乳MRI或彩超检查结合触诊准确定位.全麻小切口开放直视下吸出水凝胶,再用大量生理盐水反复灌洗所有腔隙,直至手感探测不到硬结,盐水中无水凝胶为止.结果：48例患者术后无继发感染和出血等并发症.术前诸症状体征消失,无明显乳房变形,乳房形态术后恢复满意.术后双乳MRI复查未见明显异物残留.术后1 ～12月（6.2±0.3月）45例随访复查MRI亦未见异物残留,乳房修复完好.结论：注射隆乳后腔内大量盐水灌洗辅助取出水凝胶具有创伤小、出血少、操作简单、费用低廉的优点,是一种较好的、值得推广的凝胶取出术式.

人表皮生长因子基因转染原代角质形成细胞

目的：将带信号肽的人表皮生长网子基因转染原代成人角质肜成细胞，证实细胞活性及hEGF的有效表达，为后期的皮肤修复研究打下基础。方法：先酶切验证pcDNA3．1－hEGF，后消化成人皮肤组织，以Defined Keratinocyte—SFM（DKSFM）传代培养角质形成细胞并鉴定，脂质体转染质粒pcDNA3．1－hEGF人细胞，转基因细胞培养48h再作RT－PCR和Western—blot分析，上清分别进行放射免疫测定和MTT测定。结果：质粒peDNA3．1－hEGF上的hEGF序列经测序证实，双酶切后获得约230bp和5．4kb条带；成人角质形成细胞体外培养可快速稳定增殖，转hEGF基因细胞经RT—PCR扩增出一条约230bp的特异性条带。Westem—blot检测到hEGF表达明显升高；放射免疫法和MTT实验证实转基因细胞有稳定的hEGF蛋白分泌。结论：质粒pcDNA3．1－hEGF在脂质体介导下成功转染成人皮肤角质形成细胞，转基因细胞能分泌有生物活性的EGF；体外培养的成人皮肤角质形成细胞可见少量EGF分泌．

叶酸偶联的Fe_3O_4纳米颗粒对活体肿瘤细胞的标记(英文)

采用酰胺化反应方法,通过Fe3O4纳米颗粒表面氨基基团和与肿瘤细胞具有高度亲和力的叶酸分子的羧基间反应进行偶联得到目标材料,利用X射线衍射、傅立叶红外光谱仪、透射电镜、振动样品磁强计、动态光散射仪等对所合成的材料进行表征,且以瘤鼠为动物模型,考察其活体肝癌细胞标记效果和MRI成像功能。结果表明,合成的材料为立方相的Fe3O4,粒径约8nm,水合直径约25.7nm,呈近似球形形貌,表面分布有羧基等功能基团,呈超顺磁特性,饱和磁化强度为51A·m2/kg,能靶向进入肝癌细胞内,提高肿瘤与周围正常组织的MRI成像信号对比。实验证实,叶酸偶联的超顺磁Fe3O4纳米颗粒,不仅细胞毒性小,而且因其表面的叶酸与叶酸受体之间的高强结合力,能通过配体-受体结合作用被高效介导进入肿瘤细胞内,实现对癌细胞的标记、示踪、MRI靶向检测及磁热疗。

烧伤脓毒症大鼠血清培养巨噬细胞中Nrf2的表达

目的研究内毒素和烧伤脓毒症大鼠血清培养的巨噬细胞中Nrf2的表达。方法在动物模型中,将大鼠分为正常对照组、LPS组、单纯烧伤组、烧伤合并铜绿假单胞菌脓毒症组、烧伤合并金黄色葡萄球菌脓毒症组。先将后4组制备成40%面积的Ⅲ度烧伤创面,分别将金黄色葡萄球菌,铜绿假单胞菌及LPS注入大鼠腹腔内,在验证脓毒症动物模型后,感染8 h心脏穿刺收集血液制备血清备用。然后取RAW 264.7细胞为靶细胞,以不同组血清干扰8 h后,分别运用RT-PCR和Western blotting技术检测Nrf2在靶细胞中的表达情况。结果所有组Nrf2明显高于正常对照组。RT-PCR示Nrf2 mRNA表达水平在单纯烧伤组中最高(P<0.01),其次分别是内毒素组(P<0.01)、假单胞菌组(P<0.01)和葡萄球菌组(P<0.01)。Western印记示Nrf2蛋白表达在内毒素组中最高(P<0.01),其后分别是单纯烧伤组(P<0.01)、绿脓杆菌和葡萄球菌组(P<0.05)。结论当受到细菌或内毒素及内源性抗氧化系统对抗氧化应激损害干扰后,内源性抗氧化系统出现于巨噬细胞RAW264.7中,并可能作为治疗目标应用于严重烧伤合并MODS、脓毒症休克等患者中。

^(99m)Tc-MIBI SPECT/CT在甲状旁腺病灶与结节性甲状腺肿鉴别诊断中的价值

目的:功能亢进的甲状旁腺病灶需手术切除,^(99m)锝-甲氧基异丁基异腈(^(99m)Tc-methoxyisobutylisonitrile,^(99m)Tc-MIBI)单光子发射计算机体层摄影/计算机体层摄影(single-photon emission computed tomography/computed tomography,SPECT/CT)在甲状旁腺病灶定位诊断中起重要作用,而部分结节性甲状腺肿摄取^(99m)Tc-MIBI较高,与功能亢进的甲状旁腺病灶难以鉴别。本研究旨在探讨^(99m)Tc-MIBI SPECT/CT在甲状旁腺病灶与结节性甲状腺肿鉴别诊断中的价值。方法:回顾性分析通过^(99m)Tc-MIBI SPECT/CT拟诊为甲状旁腺病灶的68例患者,共计81个病灶。根据手术切除后病理检查结果将病灶分为甲状旁腺病灶组(69个)和结节性甲状腺肿组(12个)。测量所有病灶的放射性计数最大值(target maximum radioactivity count,Tmax),以主动脉弓平均放射性计数作为本底放射性计数平均值(background mean radioactivity count,Bmean),并计算二者的比值(Tmax/Bmean),比较2组间Tmax/Bmean的差异;测量病灶CT密度最小值、平均值和最大值,比较2组间各CT密度值的差异;绘制甲状旁腺病灶患者与结节性甲状腺肿患者受试者操作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线,评估各CT密度值的诊断效能。结果:甲状旁腺病灶与结节性甲状腺肿病灶^(99m)Tc-MIBI放射性摄取明显浓聚;2种病灶的CT密度值均低于正常甲状腺组织,2种病灶与甲状腺的分界均可表现为清晰或模糊2种情况。2组Tmax/Bmean值比较差异无统计学意义(P=0.221)。2组CT密度最小值、平均值及最大值比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。CT密度最大值的诊断效能最优,曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.894(P<0.001),其阈值为91 HU,敏感度为83.3%,特异度为94.2%。结论:病灶^(99m)Tc-MIBI放射性摄取程度对甲状旁腺病灶与结节性甲状腺肿的鉴别价值有限,病灶CT密度最大值具有较高诊断效能。

^(99m)Tc-DTPA眼眶SPECT/CT显像非靶区及阈值的选择在甲状腺相关性眼病中的应用

目的:比较4种靶/非靶比值(target-to-nontarget ratio,T/NT)的诊断价值,选择更佳评估甲状腺相关性眼病(thyroid associated ophthalmopathy,TAO)活动性的T/NT以及判断TAO炎性活动性的阈值。方法:回顾性分析初诊为TAO的患者29例(58只眼),均行^(99m)Tc-DTPA眼眶单光子发射计算机断层显像/计算机断层扫描(single photon emission computed tomography/computed tomography,SPECT/CT),根据临床活动性评分(clinical activity score,CAS)分为活动期组18例(36只眼),非活动期组11例(22只眼);同时设置对照组9例(18只眼);分别计算每个眼眶的眼眶/枕叶脑组织放射性计数比值(T/NT1)、眼眶/枕骨放射性计数比值(T/NT2)、眼眶/丘脑放射性计数比值(T/NT3)和眼眶/小脑放射性计数比值(T/NT4),与CAS行Spearman秩相关分析和受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析。结果:T/NT1和T/NT2与CAS有相关性(r_1=0.873,r_2=0.527;P<0.001),T/NT1与CAS评分相关性更好;T/NT3和T/NT4与CAS之间无相关性(r_3=0.039,r_4=0.090;均P>0.05);T/NT1的ROC曲线下面积为0.860,T/NT2的ROC曲线下面积为0.581,故T/NT1对TAO活动性评估的准确性更高;T/NT1=9.74为判断TAO患者活动性的阈值。结论:T/NT1与CAS有更好的相关性,对于TAO活动性评估有更高的诊断价值,SPECT/CT同机融合显像解剖定位更为精确。

转内皮抑素基因抑制黑色素瘤细胞的高转移能力

目的验证转内皮抑素基因抑制高转移性黑色素瘤细胞的转移能力。方法将含胰岛素信号肽序列的pcDNA3．1-Endo真核表达载体转染小鼠黑色素瘤高转移细胞株B16，运用RT-PCR和Western-blot验证Endo的表达后，进行黑色素瘤细胞的粘附实验、体外侵袭和运动实验以及C57BL／6小鼠的肺转移试验。结果转内皮抑素基因能明显抑制黑色素瘤细胞的粘附、体外侵袭和运动以及肺转移能力，其中粘附抑制率36．4％，体外侵袭抑制率48．4％，细胞运动功能抑制率52．1％，肺转移抑制率67．3％。结论转内皮抑素基因能明显抑制黑色素瘤细胞的高转移能力。

先天性并指多指家系的特征分析及功能分型

并／多指（趾）是由于相邻指（趾）问骨性或软组织融合形成的手足畸形，是人类最常见的肢端畸形之一。根据受累指（趾）的差异，Tentamy等1978年按解剖方式将非综合征性并指（趾）畸形分为Ⅰ～Ⅴ型。其中Ⅱ型并指（趾）表现为常染色体显性遗传的并／多指（趾）畸形（SPD）。我们在中国湖南怀化发现一个大家系，依据临床特征和修复难易性进行了一种全新的功能分型，通过微卫星多态位点对家系进行了遗传连锁分析，对致病区域的侯选基因进行了突变分析。

热休克蛋白70抑制大鼠脓毒症血清诱导的心肌细胞凋亡及其信号转导通路的研究

目的初步探讨热休克蛋白70（heat shock protein 70，HSP70）抑制脓毒症血清所致心肌细胞凋亡及其机制。方法将原代培养心肌细胞分组：正常对照组、正常大鼠血清组、脓毒症血清组、转空载体对照组和转HSP70基因组，转HSP70基因组以重组质粒pcDNA3．1-HSP70转染后36h后验证基因和蛋白表达；各组以相应血清混合培养2h；分别行Hoechst33258染色后计数以及DNA“梯状”条带检测心肌细胞凋亡，再应用Western—blot分析HSP70过表达对Caspase-3，8，9活化和Bid裂解的影响情况。结果处理后12、24、36h凋亡率，转HSP70基因组心肌细胞为（12．48±2．39）％、（23．96±3．12）％、（25．40±3．96）％，明显低于脓毒症血清组[（28．66±2．24）％、（55．76±5．69）％、（46．89±8．74）％，t=5．851、5．932、6．027，P〈0．01]，亦明显低于转空载体组[（34．25±3．42）％、（50．71±6．38）％、（47．62±5．74）％，t=5．876、5．903、6．122，P〈0．01]，但明显高于正常对照组和正常血清组（3．13％-6．75％，t=6．324、6．578、6．137、5．987、6．032、6．871，P〈0．01）；在Caspase-3、8、9活化表达中，P11、P20和P10条带比值，转HSP70基因组分别为（12．5276±2．1247、9．3481±4．5423、16．1349±6．0641），低于脓毒症血清组（27．13244-2．1564、25．5643±4．3018、36．5647±6．7135，t=5．856、5．902、5．891，P〈0．01），低于转空载体组（28．0314±2．0367、25．6413±4．1356、34．5648±5．9473，t=3．861、3．933、4．281，P〈0．05），高于正常对照组（8．0324±1．5234、5．1246±1．3274、2．0314±0．6423，￡=3．286、3．867、4．031，P〈0．05）和正常血清组（8．5649±1．2136、6．0324±1．0214、3．2146±0．1325，t=5．898、5．969、6．879，P〈0．01）；tBid条带比值，转HSPT0基因组（12．0316±2．3641）低于脓毒症血清组（27．0536±5．3214，t=3．274，P〈0．05）和转空载体组（27．1034±3．6741，t=3．301，P〈0．05），但高于正常对照组（6．0347±2．1304，t=5．924，P〈0．01）和正常血清组（7．3121±1．3021，t=5．871，P〈0．01）。结论HSPT0通过干预死亡受体通路和线粒体通路而抑制脓毒症血清所致的细胞凋亡。