长期不同施肥制度下湖南红壤晚稻田CH4的排放

选取湖南双季稻田长期不同施肥制度为研究对象,采用静态箱-气相色谱法对晚稻稻田甲烷排放进行观测。研究结果表明,不同施肥制度下的晚稻稻田甲烷排放的季节变化具有一定的规律,晚稻生育期内CH4的排放速率呈先升高后降低的变化趋势。施入秸秆的处理CH4平均排放通量和累积排放通量大于单施化肥的处理;单施化肥的各处理中由于养分缺失情况的不同,CH4平均排放通量和累积排放量具有一定的差异。秸秆区CH4平均排放通量和累积排放量都较大,全量化肥养分施肥区次之,偏施养分和无肥区较小。同时还研究了长期不同施肥制度条件下各环境因素包括土壤温度、灌溉水层深度和土壤Eh,对CH4排放的影响。结果表明,不同的施肥处理,晚稻田CH4排放的季节变化和土壤Eh呈显著负相关,与土壤温度呈显著正相关,与水层深度相关不明显。

不同施肥制度对红壤地区双季稻田氨挥发的影响

为系统地了解不同施肥制度下各生育期氨挥发损失的程度及规律,采用密闭室法对南方红壤地区双季稻田的氨挥发进行了监测。不同施肥制度下氨挥发的变化规律基本相同,施肥后1～3d内达到峰值,随后逐渐下降,1周后无明显排放。氨挥发速率随施N量增加而增加。早季各处理氨挥发累积量基肥时为1.6～3.6kg/hm2,分蘖肥时为5.8～18.2kg/hm2;而晚季基肥、分蘖肥和穗肥时的氨挥发累积量分别为4.5～7.9、12.3～26.8和1.4～2.4kg/hm2,早、晚季氨挥发总累积量分别占其施N量的4.5%～15.3%和16.9%～32.8%。相对于不施肥处理,尿素的施用促进氨挥发,而在等氮施用量下,缺P处理通过氨挥发损失的N量较多,较高水平的秸秆和绿肥施用也会增加氨挥发量。此外,氨挥发与田面水NH4+-N浓度及水层pH之间存在正相关关系,气候条件也显著影响氨挥发量。

长期不同施肥制度对红壤稻田肥料利用率的影响

通过对红壤水稻土17年长期定位施肥试验的研究,比较了不同施肥制度下水稻产量及肥料表观利用率、农学利用率、生理利用率之间的差异。结果表明,无论早稻还是晚稻,有机无机肥配施施肥制度(OM)下的水稻产量都最高,相对于CK增产率分别为108.9%、53.8%;其次为节约型有机无机肥配施施肥制度(JF),增产率分别为83.3%、47.8%。对肥料表观利用率、农学利用率、生理利用率的研究可看出,节约型有机无机肥配施施肥制度(JF)和纯化肥施肥制度(NPK)的肥料利用率处于较高水平。综合产量和肥料利用率两因素来看,JF施肥制度更符合现代农业发展需要。

雾化吸入干扰素α1b在兔体内的分布及代谢途径

目的研究雾化吸入与肌内注射干扰素α1b(IFNα1b)在兔体内分布及代谢的差异,考察雾化吸入干扰素治疗肺部疾病的优越性。方法将干扰素α1b进行125I标记,选用新西兰大耳白兔,以肌内注射为对照,采用雾化吸入的方式给药,不同时间点取血,γ计数仪测定血药浓度,通过小动物活体成像系统和γ计数仪检测肺组织不同部位的药物分布情况和主要代谢脏器肝和肾中的药物含量。结果与肌内注射比较,雾化吸入给药后肺组织中的干扰素含量更高,肺组织内滞留时间长,血药浓度达峰时间为8 h,明显延迟,而肾组织中的药物含量始终维持较低浓度。结论与常规肌内注射给药相比,雾化吸入干扰素α1b肺组织药物含量高,药物体内循环时间长,是干扰素治疗肺部疾病更为有效的给药途径。

肿瘤靶向药物载体的肿瘤细胞靶向性研究

目的研究多肽介导的肿瘤靶向药物载体的制备及其细胞摄取性能。方法以丁二酸酐为手臂将SP5-52多肽共价结合到第4代聚酰胺-胺(PAMAM)型树枝状高分子材料(G4)上,荧光分子异硫氰酸荧光素(FITC)为检测探针,以SP5-52多肽连接G4制备靶向药物载体G4-FITC-SP5-52,以阿霉素(DOX)为模型药物,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色试验检测载体的细胞毒性,流式细胞术比较连接SP5-52前后细胞对载体的吸收情况,倒置荧光显微镜观察肿瘤细胞对载体及药物的吸收情况。结果经乙酰化修饰的靶向载体具有良好的生物相容性,在4μmol/L浓度下24h的细胞存活率高于80%;流式细胞仪检测结果表明靶向载体对非小细胞肺癌H460细胞具有良好的靶向性,游离SP5-52多肽可以抑制载体的靶向性;靶向载体可以通过物理包埋的方式载阿霉素,并对阿霉素的释放具有缓释作用;倒置荧光显微镜观察结果显示靶向载体可以使阿霉素更大量的进入肿瘤细胞。结论 G4-FITC-SP5-52体外展示出了良好的肿瘤靶向性,有可能成为临床肿瘤治疗的靶向药物载体。

99mTc标记T7肽及其在裸鼠非小细胞肺癌模型体内的生物分布研究

背景与目的肺癌是一种死亡率极高的恶性肿瘤,针对肺癌的早期诊断和治疗有着重要的意义和价值,本研究旨在探讨羰基锝法标记的肿瘤抑素T7肽用作裸鼠肺癌早期显像剂的初步研究。方法采用羰基锝法标记T7肽,薄层色谱法检测99mTc-T7的放化纯度与稳定性,丙酮作展开系统。测定99mTc-T7与NCI-H157细胞的亲和力。研究99mTc-T7于0.5 h、1 h、2 h、4 h、8 h在荷人非小细胞肺腺癌裸鼠体内的生物分布特性,并计算肿瘤(T)与非肿瘤组织(NT)放射性比值。结果 99mTc对T7肽标记率高,放化纯度达90%以上,不需进一步纯化,体外稳定性好。99mTc-T7与NCI-H157细胞的平衡解离常数为196.1 nM。99mTc-T7在裸鼠体内主要通过内脏器官代谢,血液清除较快,在肿瘤部位有一定程度聚集,肿瘤/肌肉比值随时间延长而增加,可达到5以上,在4 h-8 h之间取值较为理想。99mTc-T7在肺内存在一过性聚集。结论 99mTc-T7制备方法简便,标记率高,稳定性好,并能在肺癌肿瘤部位聚集,有望用作肺癌SPECT/CT显像剂。

阿霉素前药纳米粒/姜黄素联合递送系统的构建及其抗肿瘤研究

目的以酸敏感阿霉素前药纳米粒为基础,通过负载姜黄素构建联合递送系统,从而在提高抗肿瘤细胞增殖效果的同时降低由阿霉素引起的心肌细胞毒性。方法利用阿霉素(doxorubicin,DOX)的氨基与醛基化聚乙二醇(PEG-CHO)的醛基进行席夫碱反应得到PEG-DOX前药聚合物,通过疏水作用将疏水性抗肿瘤药物姜黄素(curcumin,Cur)负载到PEG-DOX的疏水内核中,最后通过纳米沉淀技术得到同时负载两种药物的前药纳米粒PEG-DOX/Cur NPs。通过核磁(1H-NMR)对PEG-DOX前药进行结构表征,利用动态光散射(DLS)和透射电镜(TEM)对PEG-DOX/Cur NPs的粒径和形貌进行表征;利用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)研究PEG-DOX/Cur NPs在酸性条件下的药物释放行为;利用MTT法研究PEG-DOX/Cur NPs的肿瘤细胞(H1975)增殖抑制效果以及评价PEG-DOX/Cur NPs对心肌细胞(H2C9)的毒性;通过H2C9细胞内的氧化自由基(ROS)水平检测(2',7'-二氯荧光素二乙酸盐法,DCFH-DA法)揭示PEG-DOX/Cur NPs对DOX心肌细胞毒性改善的机理。结果 PEG-DOX/Cur NPs为直径约90 nm的均一的球形结构,在酸性条件下能够同步释放DOX和Cur;MTT结果表明PEG-DOX/Cur NPs的H1975细胞增殖抑制效果优于DOX和PEG-DOX NPs(P<0.05),且PEG-DOX/Cur NPs对H2C9细胞的毒性明显低于DOX和PEG-DOX NPs(P<0.05);H2C9细胞ROS含量检测结果表明PEG-DOX/Cur NPs处理的心肌细胞具有最低的ROS水平(P<0.05),由此说明PEG-DOX/Cur NPs较低的心肌细胞毒性可能源于Cur引起的胞内ROS的降低所致。结论基于DOX前药纳米粒负载Cur构建联合递送系统在实现了理想的肿瘤细胞增殖抑制效果的同时,明显的降低了由DOX引起的心肌细胞毒性,实现了联合治疗的效益最大化。

酸敏感阿霉素前药纳米粒的合成及其在治疗脑胶质瘤中的作用

目的合成一类新的具有酸敏感性能的阿霉素前药纳米粒(PEG-DOX NPs),对其结构进行表征,并研究其在体外抗脑胶质瘤中的作用和透过血脑屏障的效率。方法通过席夫碱反应合成具有酸敏感的聚乙二醇-阿霉素(PEG-DOX)单体,通过自组装制备PEG-DOX NPs。利用动态光散射(DLS)和核磁对单体进行结构表征,通过透射电镜(TEM)对纳米粒的微观形貌进行观察,紫外检测法测定PEG-DOX NPs在酸性条件下的释放行为,荧光显微镜观察脑胶质瘤细胞对PEG-DOX NPs的摄取行为。利用MTT法测定PEG-DOX NPs与阿霉素(DOX)对脑胶质瘤细胞的杀伤作用。PEG-DOX NPs修饰吐温80(PS-80)获得PS80-PEG-DOX NPs。将9只BALB/c小鼠随机均分为Free DOX组、PEG-DOX NPs组和PS80-PEG-DOX NPs组,利用小动物活体成像系统比较其修饰前后脑及主要脏器内DOX的荧光强度。结果 PEG-DOX能够自组装成直径100 nm左右的纳米粒;在酸性条件下PEG-DOX NPs能够快速释放DOX,肿瘤细胞对PEG-DOX NPs的摄取虽然比DOX慢,但蓄积时间更长;PEG-DOX NPs和Free DOX对C6细胞的增殖抑制均呈现浓度依赖性,PEG-DOX NPs组细胞增殖抑制率在各个浓度下均低于Free DOX组。PS-80修饰后,PS80-PEG-DOX NPs透过血脑屏障的效率显著高于DOX和PEG-DOX NPs组。结论 PEG-DOXNPs具有良好的体外抗肿瘤作用,修饰后可高效透过血脑屏障,使其体内治疗脑胶质瘤成为可能。

RGD功能化多肽纳米纤维的制备及其体内肿瘤靶向性研究

目的制备肿瘤靶向RGD多肽纳米纤维,研究其体内分布和肿瘤靶向性。方法通过多肽固相合成法制备靶向多肽Nap-GFFYGRGD(RGD-肽)和对照多肽Nap-GFFYGRGE(RGE-肽),利用核磁和质谱对多肽的分子结构进行表征。多肽溶液经煮沸后冷却可自组装形成纳米纤维(RGD-纤维和RGE-纤维),通过透射电镜(TEM)对纳米纤维的微观形貌进行观察。采用氯胺-T法对多肽进行125I标记,利用放射性HPLC对标记多肽进行分离纯化。建立BALB/c小鼠皮下乳腺癌肿瘤模型,125I标记的多肽自组装形成纳米纤维后经尾静脉注射,分别于注射后1、3、6、12 h进行眼球取血并处死小鼠,取肿瘤、心、肝、脾、肺、肾、胃、大肠、小肠、肌肉和脑等,用γ计数仪测量各组织放射性信号强度。结果 RGD-肽和RGE-肽均可自组装形成直径约为10~20 nm的纳米纤维。RGD-纤维和RGE-纤维在注射后各个时间点在体内主要脏器的分布规律相似,主要分布于胃中,其次是肠。但2者在肿瘤组织的分布规律存在显著性差异,RGD-纤维注射后6 h内在肿瘤组织中呈现出一个逐渐积累的过程,而RGE-纤维在3 h时达最高浓度,在6 h 2者差异达到最大,分别为6.25%ID/g和2.79%ID/g(P<0.01)。结论肿瘤靶向肽RGD能明显提高多肽纳米纤维在体内的肿瘤靶向分布,为该载体作为抗肿瘤药物载体用于肿瘤靶向治疗提供了强有力的数据支持。

乙酰化可降低聚酰胺-胺的细胞毒性

背景:聚酰胺-胺型树枝状高分子纳米材料已被广泛应用于药物载体的研究,但由于整代聚酰胺-胺表面有大量带正电荷的氨基,具有一定的细胞毒性。目的:观察乙酰化对聚酰胺-胺细胞毒性的影响。方法:①细胞增殖检测:采用MTT法检测在含0,0.125,0.25,0.5,1,2,4μmol/L乙酰化聚酰胺-胺的培养液中人胚肾293T细胞的增殖。②细胞形态:倒置荧光显微镜观察在含4μmol/L乙酰化聚酰胺-胺的培养液中人胚肾293T细胞的形态。③细胞周期:流式细胞术检测在含0,5,10,15,20mg/L乙酰化聚酰胺-胺的培养液中人胚肾293T细胞的细胞周期。结果与结论:聚酰胺-胺对293T细胞具有一定的细胞毒性,在4μmol/L浓度下48h的细胞存活率仅为52%,而乙酰化可显著降低聚酰胺-胺的细胞毒性(P<0.01);聚酰胺-胺孵育的细胞发生团缩,伸展性变差,而乙酰化聚酰胺-胺孵育的293T细胞与正常培养细胞基本一致,具有良好的伸展性;乙酰化聚酰胺-胺对细胞周期无影响,而聚酰胺-胺在20mg/L较高质量浓度时可使细胞S期产生阻滞。表明乙酰化可以降低聚酰胺-胺的细胞毒性。

聚天冬酰胺衍生物的合成及细胞毒性研究

目的合成一种聚天冬酰胺衍生物并对其细胞水平的安全性进行评价,为其作为药物载体应用提供研究基础。方法通过L-天冬氨酸热缩聚合成聚琥珀酰亚胺,利用苯丙氨酸甲酯盐酸盐和乙醇胺对聚琥珀酰亚胺进行开环反应得到载体PSI-Phe-EA;利用1H NMR进行聚合物结构表征;采用内标法磁氢谱计算其开环率;通过水溶性的比较验证其亲水性变化;采用MTT法对聚合物的细胞增殖抑制进行研究,利用倒置显微镜观察聚合物对细胞微观形态的影响;利用碘化丙啶(PI)染色法通过流式细胞仪研究聚合物对细胞周期的影响。结果1H NMR确证了开环衍生物PSI-Phe-EA的结构,PSI的开环率为40%;乙醇胺开环后聚合物的亲水性得到了明显改善;MTT实验表明,PSI-Phe-EA在所检测浓度范围内(<100 mg/L),对NIH3T3和Hep G2两种细胞的24 h细胞存活率均在80%以上;倒置显微镜观察表明,50 mg/L的PSI-Phe-EA孵育24 h后以上两种细胞的形态与对照组无明显差异;细胞周期分析表明PSI-Phe-EA处理与否对细胞周期分布的影响无明显差异。结论合成的聚天冬酰胺衍生物PSI-Phe-EA亲水性明显提高,且对细胞的存活、微观形态以及周期分布均无明显影响,是一种安全的高分子材料。

RGD修饰树枝状高分子PAMAM药物靶向传输实验研究

制备了RGD靶向修饰的聚酰胺-胺(PAMAM)树枝状聚合物,以阿霉素为药物模型研究了载体的载药性能、体外释放行为及对Hela细胞的毒性.利用激光共聚焦显微镜观察了Hela细胞对药物和材料的摄取行为.结果显示,载体具有良好的生物相容性,Hela细胞对PAMAM-Ac-FITC-RGD的摄取效率≥95%,而对PA-MAM-Ac-FITC的摄取效率<40%,293T细胞对两种材料的摄取效率均低于30%.阿霉素可以通过物理包埋的方法固定,其释放受pH、离子强度等因素的影响较大.共聚焦结果显示,载体可以在较短的时间内携带药物进入Hela细胞.RGD修饰PAMAM使载体获得了靶向性,提高了药物传输效率.

抗人纤维蛋白噬菌体单链抗体库的构建和鉴定

目的应用噬菌体展示技术构建抗人纤维蛋白单链抗体(scFv)文库,筛选高亲和力抗人纤维蛋白scFv并进行鉴定。方法利用人纤维蛋白免疫小鼠,分别扩增小鼠VH和VL基因,经重叠延伸聚合酶链反应(PCR)将VH和VL基因拼接成scFv基因,SfiⅠ/NotⅠ双酶切克隆入pCANTAB 5E噬菌粒载体,转化E.coli TG1构建成库,采用人纤维蛋白原对抗体库进行负筛选,人纤维蛋白进行正筛选,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测阳性克隆的抗原特异性并进行测序分析。结果构建了库容为8.7×106的抗人纤维蛋白scFv库,ELISA测定显示scFv具有较高的抗原特异性;抗人纤维蛋白scFv基因序列长732 bp,编码244个氨基酸,VH和VL基因均有明确的3个互补决定区和4个骨架区。结论成功构建了抗人纤维蛋白scFv文库,并筛选到高亲和力的抗人纤维蛋白scFv,为新型血栓显像剂的开发奠定了实验基础。

多变量模型参数的贝叶斯估计及其在农业研究中的应用

对于农业研究中多变量线性模型参数的估计,以往常采用经典统计方法。随着计算机技术的进步,贝叶斯统计方法在科学研究的各个领域迅速发展。文章利用贝叶斯统计方法对农业研究中的多变量模型进行参数估计,并与经典统计方法进行比较,验证了贝叶斯方法的有效性。该方法可为农业研究中多变量模型参数的估计提供新的途径和手段。

氨基酸构型对多肽纳米纤维体内分布的影响

目的比较由L构型和D构型氨基酸自组装形成的纳米纤维在体内分布的差异,为不同构型氨基酸自组装纳米多肽的体内应用提供指导。方法固相合成法合成多肽Nap-GFFYGRGD(L-肽)和Nap-GDFDFDYGRGD(D-肽),利用核磁和质谱对多肽分子进行结构表征。多肽溶液通过煮沸、冷却、自组装形成纳米纤维(L-纤维和D-纤维),透射电镜观察纳米纤维的微观形貌。125I标记多肽分子后,由其自组装形成的纳米纤维通过尾静脉注射入小鼠体内,分别在1、3、6和12 h采血并处死小鼠,取心、肝、脾、肺、肾、胃、大肠、小肠、肌肉、脑等主要器官,用γ计数仪测量其放射性强度。结果 L-肽和D-肽均可自组装形成纳米纤维,纤维直径约为10～20 nm,且两者微观形貌无明显差异。两种纳米纤维在体内的分布差异有统计学意义。D-纤维在注射后1 h的血液浓度为(8.17±0.32)%ID/g,但较迅速地从血液中清除;L-纤维浓度为(5.96±0.30)%ID/g,在注射后6 h基本保持不变。D-纤维主要分布于肝中而L纤维主要分布在胃中。结论氨基酸构型(D/L)对多肽纳米纤维在体内的分布影响显著,在未来的医学应用中考虑氨基酸构型对体内分布的影响有可能更好地指导多肽纳米纤维的应用。

群智设计平台运营模式研究

目的研究开放创新平台的群智设计模式分类,剖析不同群智设计模式的运行特征,既为其他群智创新平台的设计提供指导,也为用户、企业选择合适的平台开展创新活动,为实现知识分享、知识变现等提供参考。方法对国内典型群智设计平台进行调研,基于现有研究及调研内容,建立群智设计模式分类指标。通过内容分析法从服务性、商业性、社交性、组织性4个维度对研究平台进行全面分析并评估赋值。通过对研究数据进行系统聚类,将研究平台进行分类并分析不同模式平台的运行特征差异。结果将群智设计平台分为4类模式,即技能型知识变现模式、专业型知识创新模式、项目型知识交易模式、兴趣型知识分享模式。结论不同模式群智设计平台在设计服务性、商业性、社交性、组织性方面存在差异。技能型知识变现模式通过用户专业技能的商业化转化促进知识交流;专业型知识创新模式则侧重于高质量设计服务的资源整合与合作以推动创新;项目型知识交易模式强调交易驱动和资源的高效配置;兴趣型知识分享模式则着重于用户间的社交互动与知识共创。

农业研究中非线性模型参数估计的贝叶斯方法

在农业研究中,非线性模型有着广泛的应用,其参数估计往往采用变量替换等经典方法。该研究以非线性模型为例,提出了基于Gibbs抽样的贝叶斯估计方法,并以农业研究中的一个实例,演示了贝叶斯估计方法的可行性。结果表明:非线性模型参数估计的贝叶斯方法稳健可靠,适用于农业研究中的复杂非线性模型。

新型多肽聚酰胺-胺型靶向药物载体的载药性能及细胞吸收和毒性

背景:前期研究通过噬菌体展示体内筛选方法获得了一条NCI-H460非小细胞肺癌特异结合的多肽(Lung cancer targetingpe ptide,LCTP),将该多肽与修饰的聚酰胺-胺型(Polyamidoamine,PAMAM)树枝状高分子材料连接制备了纳米靶向药物载体PAMAM-Ac-FITC-LCTP,该载体在体内外对非小细胞肺癌NCI-H460具有很好的靶向性。目的:在前期研究基础上,进一步研究PAMAM-Ac-FITC-LCTP靶向载体对阿霉素的包埋、释放及其细胞吸收和毒性性能。方法:以筛选到的多肽LCTP为靶向剂,构建了PAMAM-Ac-FITC-LCTP靶向载体。采用物理包埋法将PAMAM-Ac-FITC-LCTP与阿霉素连接,通过体外透析实验观察载体对药物的缓释功能,共聚焦显微镜观察细胞对药物的吸收。以游离阿霉素作为对照,MTT法观察载体载药后对NCI-H460细胞的作用。结果与结论:PAMAM-Ac-FITC-LCTP对阿霉素的最大包埋率为7.46%。载体对药物具有明显的缓释作用,离子浓度、pH和温度对药物的释放具有影响,说明PAMAM-Ac-FITC-LCTP主要是通过静电相互作用与阿霉素结合。PAMAM-Ac-FITC-LCTP/阿霉素短时间内较单独药物更高效进入NCI-H460细胞,而复合物24h的细胞毒性与阿霉素对细胞的毒性基本一致。以上结果说明PAMAM-Ac-FITC-LCTP可能是一个肿瘤治疗和诊断中很有用的药物靶向传输载体。

肿瘤靶向多肽的筛选及其联合纳米材料用于肿瘤靶向治疗的研究

肿瘤已成为威胁人类健康的重要杀手，而目前主要的治疗手段——化疗由于药物的全身分布而产生巨大的毒副作用，使得化疗药物在治疗肿瘤的同时也给病人带来了巨大的痛苦和生命的威胁，因此研制化疗药物靶向性载体，使药物具有肿瘤特异靶向性，

山西柳林煤层气开发经济评价

山西柳林煤层气试验区是我国第一个煤层气勘探取得成功的试验区。其能否由小井网试采进入商业规模开发 ,对全国的煤层气勘探开发示范作用举足轻重。本文从试验区的煤层气市场条件分析入手 ,以计算的煤层气地质储量为基础 ,以设计的开发方案为依据 ,深入调研获取相关的经济评价参数 ,对柳林煤层气试验区的开发前景进行了经济评价 。