耐伊维菌素捻转血矛线虫谷氨酸门控氯离子通道gbr-2基因分析

为了解谷氨酸门控氯离子通道（Glucl）gbr-2基因在捻转血矛线虫抗伊维菌素虫株是否存在突变,以及变异情况如何,本试验以捻转血矛线虫耐伊维菌素虫株作研究对象,提取基因组DNA后以特异性引物扩增gbr-2基因,并对扩增产物进行测序和分析.同时以敏感株虫体作对照.试验结果表明,与对照组相比,耐药株的基因序列发生了突变,在80～170 bp处出现多处突变;在192～207 bp处的碱基发生丢失.两者同源性为88.9％.试验结果说明,捻转血矛线虫抗伊维菌素虫株的谷氨酸门控氯离子通道gbr-2基因确实存在突变,为进一步了解捻转血矛线虫抗伊维菌素虫株的耐药性分子机制,以及筛选耐药性检测的分子标记,建立耐药性的早期检测手段提供重要数据.

Pokemon及其在肿瘤中的研究进展

Pokemon基因即POK红系髓性致癌因子,也被称为FBI-1,LRF,OCZF,TIP,它是POK转录抑制物家族成员之一,其编码的产物具有BTB/POZ域和锌指结构,它是第一个被发现的可变阅读框基因ARF(Alternative reading frame,ARF)的特异性转录抑制物,Pokemon通过特异抑制ARF转录来调控细胞周期、诱导肿瘤发生、促进肿瘤的发生发展,在一些人类肿瘤如食管鳞癌、肺癌、结肠癌、人贲门癌、膀胱癌,前列腺癌和乳腺癌等肿瘤组织中具有较高的表达水平。Pokemon的特殊性在于还能与其它癌基因如Bcl-2,MDM2等结合之后发挥作用来促进其他癌基因的活性。因此可以认为Pokemon是肿瘤的总开关,对Pokemon基因的进一步研究有助于为肿瘤的诊断和治疗提供新的途径和方法。

应用电视胸腔镜诊治病因不明胸腔积液的疗效观察

目的:探讨电视胸腔镜(video-assisted thoracoscopic surgery VATS)在诊治病因不明胸腔积液中的应用价值。方法:回顾分析2005年4月～2011年4月196例病因不明胸腔积液经电视胸腔镜手术的临床资料。均应用电视胸腔镜进行探查,根据病变情况选择切口部位。排净胸腔积液后,分离粘连,进行胸膜活检后恶性患者行胸膜固定术。结果:196例均明确诊断:140例恶性胸腔积液,36例结核胸腔积液,20例炎性胸腔积液。胸腔镜手术178例,胸腔镜辅助胸壁小切口手术18例。手术时间30～75 min,平均54 min。出血量10～120 mL,平均53 mL。10例出现术后肺漏气,胸腔引流量<50 mL/24 h拔除胸腔引流管,胸管留置时间4～19天,平均9.4天。191例成功控制胸腔积液,全组无院内死亡。22例接受化疗的恶性胸腔积液患者,随访14～34个月,平均23个月,复查胸片显示无胸腔积液、积气。结论:电视胸腔镜安全、有效、微创,便于操作,可作为诊治病因不明胸腔积液的主要方法。

捻转血矛线虫伊维菌素耐药株P-糖蛋白基因多态性的PCR-RFLP分析

为了解P-糖蛋白基因在捻转血矛线虫伊维菌素耐药株和敏感株间的差异,进一步弄清该基因与伊维菌素耐药性产生的关系,用PCR-RFLP方法分析了捻转血矛线虫伊维菌素耐药株P-糖蛋白基因hcpgp-1的多态性,并对所得序列进行测序。结果表明:捻转血矛线虫伊维菌素敏感株虫体的PCR产物不能被内切酶KpnⅠ切开,而伊维菌素耐药株虫体的PCR产物可被内切酶切开;酶切后统计数据显示,10条敏感虫株全部为敏感纯合子(BB);在所检测的20条伊维菌素耐药性虫株中,抗性纯合子(AA)6个(30%),杂合子(AB)13个(65%),敏感性纯合子(BB)1个(5%)。其中,AB基因型频率最大,为优势基因型,其次为AA型,BB型比例最低。抗性等位基因A为优势基因,其频率为62.5%,敏感等位基因B的频率为37.5%。同源性分析发现,具有抗性的糖蛋白基因hcpgp-1与敏感株的同源性较低,在80.2%～89.3%之间。且发现伊维菌素耐药株hcpgp-1基因序列中,有多处碱基发生了突变。本研究结果为进一步了解P-糖蛋白在捻转血矛线虫伊维菌素耐药性产生中的作用,提供了参考数据。

Pokemon、P14ARF蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨食管鳞癌(esophageal squamous cell cacinoma,ESCC)组织中Pokemon和P14ARF表达的关系及其对ESCC临床病理特征和预后的判定价值。方法:应用SP免疫组织化学方法检测Pokemon和P14ARF二种蛋白在96例ESCC组织及20例癌旁正常组织中的表达,分析它们与ESCC病理学特征的关系,以及Pokemon和P14ARF的相关性,并结合随访资料观察上述蛋白表达对ESCC长期预后的影响。结果:癌旁正常组织中未见Pokemon蛋白表达,P14ARF蛋白阳性表达率为90.0%;在ESCC组织中Pokemon和P14ARF阳性表达率分别为75.0%和30.2%。Pokemon表达与P14ARF表达呈负相关(r=-0.458,P=0.000)。Pokemon和P14ARF的表达与TNM分期和淋巴结转移相关(P<0.05)。Pokemon表达阳性组的5年生存率分别为20.8%,显著低于阴性组(P=0.004);P14ARF表达阳性组的5年生存率为41.4%,显著高于阴性组(P=0.011)。结论:Pokemon蛋白的高表达和P14ARF蛋白低表达可能与ESCC的发生、发展关系密切,它们对于ESCC预后评估有一定的临床意义。

电视胸腔镜在闭合性胸外伤诊治中的应用

目的:探讨电视胸腔镜手术(video-assisted thoracoscopic surgery,VATS)在闭合性胸外伤中诊断、治疗中的价值。方法:2004年6月～2011年6月选择68例闭合性胸外伤患者,应用VATS进行探查、诊断,同时进行肺修补、肺楔形切除、肋间血管止血、肋骨骨折固定等操作以及小切口辅助手术。结果:68例经VATS探查损伤情况:肺裂伤30例,凝固性血胸15例,肋间血管损伤10例,肋骨骨折需手术复位、固定12例,肺内血肿形成5例,膈疝3例,胸廓内血管损伤2例。VATS行肺修补术25例,肺楔形切除术7例,血管止血术12例,肋骨骨折复位、固定术12例,VATS辅助胸壁小切口肺叶切除术3例,膈疝修补术3例。VATS手术时间25～125 min,平均71.7 min。术后1～7 d胸腔少量积液、积气9例,少量咯血8例。68例随访2～17个月,平均9.2个月,复查胸片显示患肺复张良好,胸腔无积液、积气。结论:闭合性胸外伤患者应用VTAS诊治,可使诊断及时、准确,患者创伤小、恢复快,疗效满意。

福斯盘尾丝虫病的流行病学调查及福斯盘尾丝虫线粒体COⅠ基因的序列分析

以内蒙古地区骆驼盘尾丝虫病流行病学调查为基础，基于细胞色素氧化酶工（COⅠ）基因的分子标记特点，进而为骆驼福斯盘尾丝虫传播媒介的研究奠定基础。在骆驼屠宰季节，进行骆驼福斯盘尾丝虫感染情况的检查，并分离虫体，提取DNA，用PCR方法扩增CO工基因，然后克隆和测序，并运用MEGA5．05和DNAStar7．1软件进行序列分析。结果显示，骆驼福斯盘尾丝虫主要寄生于骆驼的项韧带间隙，骆驼的平均感染率为92．2％，其中阿拉善左旗骆驼感染率高达100％，最大感染强度为每峰骆驼23个结节。对福斯盘尾丝虫COⅠ基因的序列分析结果表明，该基因长689bp，与GenBank中公布的同属线虫其他种的COⅠ基因的同源性介于89．8％～93．8％之间。对内蒙古地区骆驼感染福斯盘尾丝虫的状况进行了调查，并在国内外首次对福斯盘尾丝虫COⅠ基因序列进行了测序分析，为该虫种的分子标记及传播媒介的进一步研究奠定了重要基础。