产β-甘露聚糖酶菌株的筛选及产酶条件优化的研究

本实验用培养基透明圈法从7种芽孢杆菌中筛选到酶活最高的三株芽孢杆菌(枯草芽孢杆菌4.37、高龙枯草芽孢杆菌w-031 3.83、地衣芽孢杆菌3.83)。用测定发酵液酶活的方法进行菌株的复筛,酶活最高的菌株为枯草芽孢杆菌。对该菌产酶条件进行了单因素实验发酵条件的优化,最优产酶条件为:最佳碳源是魔芋粉,含量为4%,最佳有机氮源为酵母浸粉,最佳无机氮源为硝酸钠,最佳产酶时间为36 h。

枯草芽孢杆菌产β-甘露聚糖酶的纯化和性质

本文以魔芋粉为碳源培养枯草芽孢杆菌S-88获得一种β-甘露聚糖酶粗酶液，粗酶液通过硫酸铵梯度盐析、超滤、HiprepTM 26／10脱盐柱脱盐、HiprepTM 16／10 DEAEFF阴离子树脂和G-75凝胶柱的纯化，该枯草芽孢杆菌S-88产的甘露聚糖酶的酶活力达到61697．52IU／mL。用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定纯化后酶的分子量为30kda，比其它细菌产的β-甘露聚糖酶分子量（50kda）小。β-甘露聚糖酶在pH6．0和50℃的酶活性最大。它在pH4．4～6．8之间有很好的稳定性，37℃水浴2h酶活保持在80％以上。55℃以下水浴2h，酶活力保持在90％以上，该酶有较好的耐热性，煮沸80min该酶活力才能基本上消失。