寄生于中国水牛Bubalus Vbubalis的巴贝斯虫一新种(梨形虫目:巴贝斯科)

经作者等深入研究，发现湖北省水牛巴贝斯虫病病原不是牛巴贝斯虫Ｂａｂｅｓｉａｂｏｖｉｓ与双芽巴贝斯虫Ｂ．ｂｉｇｅｍｉｎａ，而是一新种——东方巴贝斯虫Ｂａｂｅｓｉａｏｒｉｅｎｔａｌｉｓｓｐ．ｎｏｖ．。病牛红细胞中的虫体呈梨形（单梨形多于双梨形）、椭圆形、指环形、边虫形及杆状。以梨形虫体居多，病的初期其长度均小于红细胞半径，其平均大小为２．２×１．３μｍ，双梨形虫体尖端相连多排列成钝角或一字形，位于红细胞偏中央处。病的后期（出现虫血症后５～６ｄ）及体外培养７２ｈ，有少部份（１～２％）虫体直径大于红细胞半径。新种的传播者为镰形扇头蜱Ｒｈｉｐｉｃｅｐｈａｌｕｓｈａｅｍａｐｈｙｓａｌｏｉｄｅｓｈａｅｍａｐｈｙｓａｌｏｉｄｅｓ经卵传递（由第二代成蜱传给健康牛）。在成蜱的血淋巴中的虫样体（裂殖子）呈圆锥状、一端钝圆、尾部直而尖，不形成钩。新种对黄牛不能感染致病，只能使水牛致病。

应用镰形扇头蜱及巴贝斯虫病水牛的染虫血感染黄牛试验

从非流行区购进无蜱寄生的健康黄牛５头与水牛犊１头，其中３头成年黄牛（２～８岁）在畜舍内用从流行区水牛身上采得的镰形扇头蜱Ｒｈｉｐｉｃｅｐｈａｌｕｓｈａｅｍａｐｈｙｓａｌｏｉｄｅｓｈａｅｍａｐｈｙｓａｌｏｉｄｅｓ成虫，置于牛耳壳内叮咬；１头运至流行区放牧，让蜱上身叮咬；１头黄牛犊（１０年龄）去蜱后２周，用液氮保存的患病水牛染虫血４ｍｌ（４×１０ ８个虫体）皮下注射；另一头去蜱水牛犊亦同时注射相同剂量的染虫血，作为对照。５头黄牛在试验期间其体温、精神、食欲正常，未出现任何临床症状，感染后１０～１２ｄ外周血液中出现少量不典型的牛巴贝斯虫，红细胞染虫率在０．１％以下，持续３～５６消失；对照牛则体温升高（３９．８～４１．１℃），出现贫血、黄疸等症状，红细胞压积（ＰＣＶ）降至２６％，外周血液中出现典型的牛巴贝斯虫，红细胞染虫率（ＰＰＥ）高达１２％。对采用蜱叮咬及注射来自病水牛的染虫血为何不能使黄牛感染发病，文中进行了讨论。

东方巴贝斯虫分泌性抗原的免疫保护作用研究

体外培养获得的东方巴贝斯虫 (BabesiaorientalisLiuZhonglingetal.1997)分泌性抗原经离心浓缩等处理后用于免疫预防作用的研究。 10头从东方巴贝斯虫病非疫区购回的 1岁左右的健康水牛犊分为 3组 ,免疫组 4头牛 ,用分泌性抗原和弗氏完全佐剂混合后间隔二周免疫二次 ,佐剂对照组 2头牛 ,用弗氏完全佐剂间隔二周注射二次。空白对照组 4头牛不作处理。二免后一个月取液氮保存的东方巴贝斯虫含虫血进行攻击 ,结果发现 :免疫组牛获得了良好的免疫保护 ,除出现红细胞数及血红蛋白含量的下降外 ,无其它明显可见的病理反应 ,佐剂对照组二头牛均出现了虫血症并死亡一头。空白对照组 4头牛全部出现了明显的虫血症 ,且均以死亡告终。试验过程中对Ab和T淋巴细胞的检查表明该免疫原诱导产生了体液和细胞免疫反应。本试验的结果说明了东方巴贝斯虫体外培养分泌性抗原具有良好的免疫保护作用。

水牛巴贝斯虫病病原—牛巴贝斯虫体外培养的研究

本研究采用微气静相培养技术,对一株采自人工感染的去脾脏水牛犊的牛巴贝斯虫(Babesia bovis)进行了80天的连续体外培养·继代26次,累积增殖6.51×10^((?))倍;累积稀释2.19×10^(35)倍。培养24小时红细胞的染虫率为2.63±0.50％;48小时为7.18±1.39％;72小时为20.78±4 52％。最高红细胞染虫率达33.50％。体外培养的牛巴贝斯虫与采自病牛血液内的牛巴贝斯虫形态一致,说明已建立了水牛巴贝斯虫病病原——牛巴贝斯虫的体外培养。 对影响牛巴贝斯虫体外培养的几种因素进行的实验结果表明:培养液pH值显著地影响虫体的繁殖,最适的体外连续培养的pH为7.2;合适的血清浓度为40％;血清灭活后,支持牛巴贝斯虫生长繁殖的能力明显降低;脱纤血分离的血清和自然凝固血析出的血清用于培养的效果相同;RPMI-1640和TCM-199培养液支持牛巴贝斯虫生长繁殖的能力没有差异。

湖北省水牛巴贝斯虫病调查研究 Ⅴ.镰形扇头蜱经卵传递牛巴贝斯虫的证实

1986年从病牛身上摘下饱血雌蜱,经实验室饲养,孵化为第二代成蜱,人工越冬。于1987年将上述蜱100只接种于已去脾23天的一岁龄健康水牛,以后每天从该牛身上取蜱查其唾液腺。结果在吸血期间,始终查到梨形虫体,其平均大小为1.3×0.68微米。接种后第4天,牛血中开始出现巴贝斯虫,至第19天,红细胞感染率高达9.6％,单梨形虫体大小为0.84～2.64×0.42～1.22微米,双梨形虫体大小为0.64～1.64×0.37～0.97微米,以后逐渐下阵。该牛出现体温升高)41.6℃)、严重贫血(血红蛋白量2克,红细胞压积14％,红细胞总数177万/毫米~3)、黄疸及精神萎顿等症状。上述结果表明,该牛感染了巴贝斯虫病,由此证实镰形扇头蜱是经卵传递巴贝斯虫,其感染阶段是成蜱。

胶乳凝集试验诊断水牛巴贝斯虫病的研究

应用体外培养所得的可溶性牛巴贝斯虫(Brabesia bovis)抗原进行胶乳凝集试验的结果表明,本抗原与其它血液原虫,如伊氏锥虫(Trypanosoma evansi)、边缘无浆体(Anaplasma marginale)、双芽巴贝斯虫(B.bigemina)、环形泰勒虫(Theileria annulata)及瑟氏泰勒虫(T.sergenti)之间无交叉反应。非特异性凝集因子试验、胶乳凝集抑制试验也表明本抗原有较强的特异性。去脾水牛犊人工感染牛巴贝斯虫后第3天,应用胶乳凝集试验即可在血清中查到相应抗体,感染后12～15天抗体滴度达到高峰(1:2560);对成年水牛,感染后第8天应用本法即可查到抗体,并维持较高的抗体滴度达5个月。致敏抗原在4℃和20～30℃可分别保存6个月和3个月。此类抗原作为本病的诊断抗原是可行的。

水牛牛巴贝斯虫体外培养的研究Ⅱ．冷冻血清的应用和筛选

应用冷冻血清对１株采自自然感染的水牛牛巴贝斯虫进行了长达７２ｄ的体外连续培养，共继代２０次，培养７２ｈ红细胞染虫率最高达１４．１％，平均为８％～１０％。培养２０ｄ和３０ｄ的牛巴贝斯虫经液氮保存复苏后，接种于去脾水牛犊均引发了严重的牛巴贝斯虫病，从而说明已建立了水牛牛巴贝斯虫的体外连续培养，且经培养后的牛巴贝斯虫致病力没有改变。本试验利用６头份的冷冻健康水牛血清同时进行培养，结果发现，并非所有的健康水牛血清均适合于体外培养牛巴贝斯虫。

水牛巴贝斯虫病可溶性抗原疫苗的疫区应用试验

体外培养获得的东方巴贝斯虫可溶性抗原与等量弗氏完全佐剂混合后用作疫苗进行疫区免疫保护试验。试验动物共分 2组 ,免疫组 82头牛在发病季节前 1个月用疫苗间隔 2周免疫 2次 ,对照组不作处理。所有试验动物在试验前和发病季节后分别采血检测血清抗体水平 ,同时 ,在发病季节观察试验动物的发病情况。结果表明 :在发病季节内 ,免疫组牛无一发病 ,血清抗体水平与试验前相比升高明显 ,而对照组 86头牛有 5头出现临床症状 ,虽经治疗仍有 2头死亡 ,血清抗体水平与试验前相比变化不明显。

黄牛血液体外培养水牛牛巴贝斯虫的研究

从非巴贝斯虫病流行地区以临床检查健康，免疫学检查无巴贝斯虫感染的黄牛，分离血清和红细胞，分别与健康水牛红细胞和血清以不同的组合方式混合，采用改进的微气静相培养技术体外培养水牛牛巴贝斯虫，结果表明：黄牛红细胞不能作为寄生于水牛体内的牛巴贝斯虫体外培养的支持细胞，黄牛血清支持牛巴贝斯虫生长的能力明显低于水牛血清。这一发现对研究寄生于水牛体内的牛巴贝斯虫的生物学特性及牛巴贝斯虫病的免疫均具有重要意义。

湖北省水牛巴贝斯虫病的综合防治研究 Ⅰ-血清流行病学调查

利用胶乳凝集试验对湖北省不同地区的水牛血清进行了东方巴贝斯虫的血清流行病学调查。结果表明, 在流行区血清学检查阳性率为71-74 % , 在非流行区仅为1-19 % 。统计学检查结果表明, 流行区内不同地区间东方巴贝斯虫感染率无差异, 随着年龄的增加, 阳性率逐渐升高。利用一数学公式对这次调查结果进行分析后认为, 该流行区为稳定的流行区。对流行区应采取的防治措施进行了讨论。

巴贝斯虫病水牛血清钙镁浓度变化与染虫率的关系

自水牛巴贝斯虫病非疫区购买的无任何血液原虫寄生的健康水牛犊２头，人工摘除脾脏后，用从疫区采集的饥饿镰形扇头蜱叮咬感染，观察巴贝斯虫的消长与血清钙、镁浓度的变化，结果发现二者关系密切，其中钙离子浓度与红细胞染虫率呈负相关，镁离子浓度与红细胞染虫率呈正相关，这一发现为进一步研究水牛巴贝斯虫病及在体内外研究巴贝斯虫的生长繁殖均具有重要意义。

湖北省水牛巴贝斯虫病调查研究(Ⅵ)——镰形扇头蜱体内牛巴贝斯虫虫样体的观察

人工感染牛巴贝斯虫的去脾脏水牛犊2头,当血液中出现巴贝斯虫体,染虫率达0.2%时,于一耳内放入饥饿成蜱,使之吸血。雌蜱吸饱血离休后,收集并分别放在28℃相27℃的恒温箱中,每隔24小时取蜱剪肢,涂片检查。发现置28℃的蜱在72小时,其血淋巴中出现虫样体,96—120小时,虫样体出现最多,144小时仍可见到。成熟的虫样体大小为12.0—15.0×1.8—3.5μm;置37℃的蜱其血淋巴中始终未能查到虫样体。

城市滨水空间景观的整治恢复与生态规划

随着改革开放、科学发展观及相关政策实施,城市的发展中心慢慢转化到生态文明建设上来,城市滨水空间引起了人们的关注。良好的滨水空间景观有助于强化整个城市的地域性特色,能改良城市水体和水体周边的环境。

4℃保存的红细胞对东方巴贝斯虫体外培养的影响

在采用微气静相培养技术对东方巴贝斯虫进行体外培养的基础上,观察了在4℃保存不同时间的悬浮于199培养液中的染虫红细胞和健康牛红细胞用于东方巴贝斯虫体外培养时的虫体生长情况,结果表明:染虫红细胞在4℃保存20 d 仍可用于建立起始培养;健康牛红细胞保存6d,对培养影响不明显,而保存9d 即严重影响东方巴贝斯虫的生长繁殖.这一结果对东方巴贝斯虫的虫体保存和培养条件的选择均具有重要意义.

东方巴贝斯虫体外培养的研究4℃保存的红细胞对东方巴贝斯虫体外培养的影响

在采用微气静相培养技术对东方巴贝斯虫体外培养的基础上 ,观察了 4℃保存不同时间的悬浮于 199培养液中的染虫红细胞和健康牛红细胞用于东方巴贝斯虫体外培养时的虫体生长情况 ,结果表明 ,染虫红细胞在 4℃保存 2 0d仍可用于建立起始培养 ;健康牛红细胞保存 6d ,对培养影响不明显 ,而保存 9d即严重影响东方巴贝斯虫的生长繁殖。这对东方巴贝斯虫的虫体保存和培养条件的选择均具有重要意义。

培养液容积、深度和更替时间对水牛牛巴贝斯虫体外培养的影响

采用改进的微气静相培养技术，研究了培养液容积、深度、更替时间对体外培养牛巴贝斯虫的影响。结果表明：培养液层深度对牛巴贝斯虫的生长繁殖影响明显，理想的液层深度是６．２ｍｍ；在保持单位面积上培养液容量不变的情况下，培养容积大小对培养无影响；隔２４ｈ更换上清液，能使牛巴贝斯虫稳定地生长，延长更换培养液的时间能显著地抑制牛巴贝斯虫的生长繁殖。试验还在此基础上，利用较大容积（１６．０ｍｌ）对１株牛巴贝斯虫进行了长达２７ｄ的体外培养，继代８次，牛巴贝斯虫生长良好。本试验的成功为进一步研究水牛巴贝斯虫病及其免疫提供了有利条件。

体外培养牛巴贝斯虫致病力的观察

体外培养的牛巴贝斯虫，经液氮保存５个月后取出，迅速解冻，皮下接种于二头去脾水牛犊（含虫均为２×１０￣８个）。接种后二头牛分别从第１１天和第１７天体温升高，最高达４０℃和３９．８℃，红细胞压积分别降为２９％和２６％，血红蛋白含量最低分别降为５０ｇ／Ｌ和４０ｇ／Ｌ。接种后第１５天和第１９天，外周血液中虫体含量最高，红细胞染虫率分别达５％和６％，试验牛出现明显的临床症状，如贫血、结膜黄染、粪便稀薄、食欲减退、精神不振，其中１头死亡。说明体外连续培养２０、３０天的牛巴贝斯虫，其毒力没有下降，对牛具有感染性并能使其发病，与自然发病的强毒株人工感染牛没有差异。

基于消息传递的企业资源计划与制造执行系统集成接口设计

针对ERP与MES系统间集成存在数据库异构的问题,从提高集成效率、降低集成成本的角度出发,考虑ERP与MES的集成现状,应用XML的数据转换技术,提出一种基于消息传递的集成方法,并应用此方法实现ERP与MES数据集成的示例说明该方法可行有效。该方法将两系统需要交换的数据转化为消息,并按照预先定义好的架构对消息进行映射,以此来完成数据在两系统间的传递,能够很好地屏蔽ERP与MES数据库中数据的异构性,减少ERP与MES两系统间的相互干扰。

水牛犊人工感染牛巴贝斯虫试验

利用从牛巴贝斯虫病疫区采集的镰形扇头蜱叮咬和皮下接种液氮保存的含虫血两种方法,感染去脾和未去脾犊牛,证实了牛巴贝斯虫可以感染水牛犊并使去脾水牛犊发病,但不能使未去脾水牛犊发病。连续注射氢化泼尼松可以提高去脾水牛犊的红细胞染虫率。本试验还详细观察和探讨了水牛巴贝斯虫病的临床症状、虫体在病牛血液中的消长规律、血液学变化及病理解剖学变化。