两株高致病性PRRSV河南分离株ORF5基因克隆及遗传变异分析

从河南信阳和新乡两地区猪场疑似猪繁殖与呼吸综合征病料中分离出能引起Marc145细胞病变的病毒,命名为HN1和HN2。采用RT-PCR方法从分离的2株PRRSV中均分别扩增出ORF5基因,并将其克隆、测序。用DNAStar软件分析所测序列,并与北美洲型VR-2332株及国内分离株进行核苷酸和推导的氨基酸同源性比较,绘制系统进化树,结果表明,ORF 5核苷酸与北美洲型的同源性为81.2%～99.1%,与欧洲型Lv株的同源性分别为35.9%和35.3%,推导氨基酸与北美洲型的同源性为84.5%～99.5%,与欧洲型Lv株的同源性分别为46.0%和45.5%。证明新分离到的PRRSV毒株仍属北美洲型。与国内分离的高致病性PRRSV毒株JXA1、HUB1、JX0612、GDZC1、ZQ、SX-1、HB1、HEB1、Hnyz核苷酸同源性达96.5%～99.1%,氨基酸同源性为96.0%～99.5%。分析结果表明,所获得的2个毒株GP5蛋白氨基酸序列中的抗原表位已经发生变异。

靶向PRRSV核衣壳蛋白N基因的siRNA表达载体的构建及鉴定

[目的]研究靶向PRRSV核衣壳蛋白N基因的siRNA表达载体的构建及鉴定。[方法]设计并人工合成靶向PRRSV核蛋白N基因的3个siRNA靶序列,将其插入CMV启动子下游,克隆到真核表达载体pSilencer4.1-CMV中,对该重组表达载体进行酶切鉴定及DNA测序。[结果]成功构建了靶向核蛋白基因表达的siRNA干扰重组质粒载体pSilencer-N。[结论]该研究为进一步运用RNA干扰技术进行PRRSV防治研究奠定了基础。

三元杂交猪IL-18全基因的序列测定及分析(英文)

白细胞介素-18（IL-18）又称γ干扰素诱导因子（IGIF），研究表明IL-18是一种重要的新型免疫佐剂分子。为探讨猪IL-18的免疫佐剂作用，该研究根据已发表的猪IL-18基因序列，设计并合成1对特异性引物，从猪脾脏中直接扩增得到猪IL-18全基因，并进行克隆和序列测定、分析。

靶向PRRSV核衣壳蛋白N基因的siRNA表达载体的构建及鉴定

1材料与方法 1．1材料限制性核酸内切酶HindIII、BamHI、PvuII、SspI、质粒抽提试剂盒、EcoT14 DNAMarker购自TakaRa公司。T4DNA连接酶购于promega公司。大肠杆菌DH5α菌株由该实验室保存。siRNA表达载体pSilencer 4．1-CMV Nero质粒购自Ambion公司。

三元杂交猪IL-18全基因的序列测定及分析

[目的]为进一步研发新型抗病毒制剂和疫苗佐剂、有效控制猪重大传染病奠定基础。[方法]根据GenBank中猪白细胞介素-18基因(IL-18)序列,设计1对特异性引物,应用RT-PCR方法从河南三元杂交猪脾脏淋巴细胞中扩增猪IL-18基因,并进行克隆、序列测定和分析。[结果]猪IL-18基因全长为579 bp,编码192个氨基酸的无活性前体蛋白,但前体蛋白并不含典型的疏水信号肽,在第35位氨基酸残基处有1个潜在的白细胞介素1β转换酶(ICE)剪切位点,剪切后变为具有生物活性的猪IL-18成熟蛋白。序列分析结果表明,该试验获得的猪IL-18基因与已知猪IL-18基因序列同源性很高,均为96%以上,其推导的氨基酸同源性在98%以上。[结论]该研究成功构建了猪IL-18基因的重组真核表达载体并得到了具有生物活性的瞬时表达产物。

树立大救援思想 增强灾害紧急救助能力

灾害紧急救助,是社会救助体系的重要组成部分,是指为挽救生命、保护财产安全而对发生突发性灾害地区快速提供人力、物力、财力的援助过程.实施灾害紧急救助的目的就是要减少生命财产损失,减少继续发生的灾害和次生灾害的危害的损失.随着"以人为本"的救灾理念的树立和最低生活保障制度的建立,我国救灾工作的重点将由灾后救济为主转向以灾害紧急救助为主,要求我们必须尽快建立一整套应对灾害的紧急救援工作机制.

老有所依:且看民办养老机构崛起——湖北省民办养老机构调查与思考

随着我省人口老龄化程度进一步加快,家庭规模逐步缩小,空巢老人逐年增多,使传统家庭养老方式受到冲击。完善社会养老服务体系,发展养老服务产业,发挥机构养老的支撑作用,成为当前的迫切之需。为此,湖北省老龄办牵头组成调研组对全省民办养老机构进行了深入调研,客观分析其发展现状、存在的困难和问题,提出发展应对之策。一、湖北民办养老机构的发展现状自2000年以来,我省着力推进养老服务社会化,制定出台了规划、土地、城建、税收等方面的优惠政策,民办养老机构呈快速发展趋势。

关于建立城乡社会养老服务体系的思考

加快建立城乡社会养老服务体系,是人口老龄化环境下加强和创新社会管理,促进经济社会统筹协调、跨越式发展的一项重要工作。近年来,我省各级、各相关部门采取一系列措施,积极推进养老服务体系建设,在改善民生、服务老年群体等方面发挥了积极作用。

全力以赴攻坚 实现应保尽保

近几年来，我省城市低保工作发展很快，低保覆盖面不断扩大，管理水平不断提高。2000年底，我省城市低保对象为28万人；2001年底达到85万人。今年年初，省委、省政府根据党中央、国务院的统一部署，提出应保尽保的目标：在各级党委、政府的高度重视下，全省民政系统把应保尽保作为压倒一切的中心工作来抓，从4月份开始，

“三个着力点”克服老龄事业“短板”

2011年7月，湖北省委、省政府印发了《关于进一步加强老龄工作的意见》（以下简称《意见》），给予湖北老龄工作要“走在中西部地区的前列”的定位。但创新力度不够成为影响湖北省老龄事业的短板，湖北狠抓敬老模范城（县、区）创建、文明单位考核评分权重以及努力争取到老龄项目等三个着力点，实现湖北省老龄工作走在中西部地区的前列的目标。

湖北省贫困山区老年人生存状况调查报告

在老龄化高峰期即将到来之际，如何妥善解决好农村尤其是贫困山区老年人养老问题，事关整个社会的安全稳定与和谐发展。为此，湖北省老龄办成立专题调研组，由办领导带队，分成三个小组，选取了集“老、库、山、边”于一体的国家或省级扶贫重点县——阳新、通山、英山、大悟、郧西、宣恩，每个县选取3个乡镇，每个乡镇选取3个村，每个村随机抽取10名老年人，研究贫困山区老年人的收入、生活、医疗、养老等方面情况，并就改善他们的生存状况提出了相应的对策建议。

“敬老文明号”创建活动横到边纵到底

2011年，湖北省联合省民政厅、省总工会、省委老干部局等部门，进行了周密的安排部署，在全省掀起了“敬老模范岗”创建活动的热潮，取得了显著的社会效果。