猪流行性腹泻病毒N蛋白核仁定位信号对宿主细胞周期的影响

为研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)核衣壳蛋白(N)与宿主细胞相互作用,本研究根据前期已经鉴定的PEDV N蛋白核仁定位信号序列,利用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法扩增出核仁定位信号序列缺失的PEDV N基因(dN),并将其与真核表达载体pAc-GFP-C1连接,构建重组质粒pAc-GFP-dN。将pAc-GFP-dN转染于Vero E6细胞中,利用激光共聚焦显微镜分析重组质粒pAc-GFP-dN表达蛋白的定位情况,并利用流式细胞仪检测转染细胞的周期变化。实验结果表明:与完整的N蛋白相比,缺失核仁定位信号的N蛋白不能定位于细胞核仁,同时丧失了使宿主细胞周期在G2/M期停滞的能力,从而揭示了N蛋白核仁定位信号对宿主细胞具有重要的影响。

2011年～2012年G9型猪轮状病毒流行病学调查及VP7基因遗传进化分析

为分析G9型猪轮状病毒(RV)的遗传变异情况,本研究根据GenBank中VP7序列设计合成一对扩增VP7基因的引物,采用PCR方法对2011年～2012年分离的部分RV VP7基因进行扩增、克隆和序列测定,并进行比对和遗传进化分析。结果表明:531份病料中RV阳性份数为39,阳性率为7.34%;而在检测的121个猪场中,共有23个猪场显示阳性,猪场阳性率为19%。VP7基因全长1 062 bp,含有一个982 bp的开放阅读框,编码326个氨基酸。与参考病毒株VP7全长基因核苷酸比较,同源性为91.5%～99.3%。在31 nt、56 nt、75 nt、82 nt、191 nt、215 nt等位置均存在点突变,无插入和缺失。核苷酸系统发育进化树表明:黑龙江省哈尔滨市、桦南、绥化,辽宁省大连市、内蒙古自治区采集病料样品的基因间差异较小,与采集自中国广西、浙江、贵州、北京的病料样品基因相比差异性较大,这表明VP7基因存在地域差异。

2012年猪嵴病毒流行病学调查及3D基因的遗传变异分析

为了解猪嵴病毒(PKV)的流行及变异情况,本研究根据PKV的3D基因保守区域核苷酸序列设计一对特异性引物,并利用RT-PCR方法对2012年来自24个省市84个猪场的病料样品共计236份进行3D基因的检测。结果显示:在236份病料中,共有63份为PKV阳性,阳性率为36.69%;而在检测的84个猪场中,共有36个猪场显示PKV阳性,猪场阳性率为42.85%。此外,对2012年分离的9个PKV部分3D基因进行测序分析,并与GenBank中登录的人、牛、猪以及鼠等嵴病毒株相关序列进行遗传变异分析。结果表明9个PKV 3D基因与国内外其他PKV株无论是在核苷酸水平上还是在氨基端水平上均具有较高的同源性,表明PKV的3D基因具有较高的保守性,可以作为病原检测的靶基因。

SOLAS 2009修正案对新造船舶的影响及其应对措施

国际海事组织(IMO)第80,82届海上安全委员会通过的 SOLASⅡ—1章修正案将与2009年1月1日起实施,多项新的规定对新建造的货船和客船均有些不同的要求.为此,船厂和船级社均提出了若干应对措施.

筑就“标准化时代”的环保防火墙

"标准造福人类与社会",新出炉的第38届世界标准日主题明确指出,"地球村的居民们享受着广泛权利的同时也承担着相应的义务。这些权利包括人身安全、公共安全、健康以及自由地获取信息。义务则包括保护环境以及尊重他人的人身安全、财产权利和隐私权。"而标准的实施和推广,则有助于这一切更好的实现,"通过对环境方面以及社会公正、健康、安全、信息、交流和公平贸易等与公众息息相关的各个方面规定要求或提供指南,来帮助公众享受权利和履行义务。"作为今年世界标准日主题涉及的重要内容之一,环保问题在全球范围内得到了越来越多的关注,如何在标准框架内,不断减少环境污染对人身安全和健康的风险,已提上议程。

要正确理解和运用形位公差国家标准

"形位公差"标准是一项重要的基础标准,经机械加工的零、部件几乎都要用到,因此涉及到机械工程(产品)设计人员、检验人员、管理人员都要认真的贯彻实施.文章就如何正确理理和运用形位公差国家标准进行了分析和探讨,以供相关人员在绘制图样时参考使用.

教师网络学习空间环境下的高考备考实践与反思——以高中地理二轮复习为例

教师网络学习空间的普及与推广,能够变革教学模式,重塑评价方式,营造学习氛围,提高教育教学质量,提升师生信息素养。文章以教师网络学习空间环境下的高中地理二轮复习为例,梳理了高中地理二轮复习存在的问题,探讨了将教师网络学习空间应用于高中地理二轮复习的具体方法,以期为网络学习空间在教学中的进一步应用提供参考。

船舶制造要认真贯彻现行有效的螺纹标准

螺纹标准是机械制造业的重要的基础标准,能否正确理解采用现行有效的螺纹标准,将直接影响我国制造业在国际贸易中的信誉和竞争力。因此,本文介绍了船舶行业机械制造常用的普通螺纹、管螺纹的特点、用途以及我国标准制修订情况,并重点介绍这几种螺纹在图样和技术文件中规定的最新标记方法,以供读者在使用时参考。

危险区域中的电气装置

本文从IEC60092-502《船舶电气装置第502篇：液货船-专辑》对船上电气设备常用防爆结构的定义出发，阐述了IEC60092-502国际标准、日本海事协会（NK）2008年版《钢质船舶入级与建造规范》及其对液货船和运输特种货物船舶的特殊要求等。其中涉及防爆结构的选择、危险区域中的配电系统、电气装置、电缆、照明和通风，以及对运煤船货舱内电气装置的要求。

船舶海水冷却水系统防腐防漏、防振设计技术要点分析

海水冷却水系统的作用是用来保障船上相关设备的正常运行,并且提供给船员一个适宜、安全的工作与生活环境。通过相关技术研究,结合实船生产设计、综合布置及安全使用经验,本文系统地总结分析了船舶海水冷却水系统防腐防漏、减振降噪等设计技术要求,可用于更好地指导海水冷却水系统的防护设计与实船应用。

船舶供暖系统设计、调试和使用维护技术要点分析

船舶供暖就是利用设计安装的供暖系统向舱室内供给热量,保持一定的舱内温度,以提供一个适宜船员生活或工作的室内环境。通过相关技术研究,结合实船生产设计、调试试验和使用维护经验,本文系统地总结分析了船舶供暖系统的设计、试验与使用维护技术要求,可以为实船更好地实施供暖提供良好的技术保障。