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基于网络药理学探索环黄芪醇治疗酒精性肝损伤的作用机制研究
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作者 徐启祥 任明欣 +4 位作者 刘雁兰 程敏 过怿赟 张翠锋 郭文俊 《齐齐哈尔医学院学报》 2022年第23期2201-2208,共8页
目的基于网络药理学及细胞实验验证的方法探讨环黄芪醇治疗酒精性肝损伤的作用靶点及机制。方法运用SwissTargetPrediction数据库预测环黄芪醇的潜在作用靶点。于各疾病数据库中检索酒精性肝损伤疾病的相关靶点,提取共同靶点,利用蛋白... 目的基于网络药理学及细胞实验验证的方法探讨环黄芪醇治疗酒精性肝损伤的作用靶点及机制。方法运用SwissTargetPrediction数据库预测环黄芪醇的潜在作用靶点。于各疾病数据库中检索酒精性肝损伤疾病的相关靶点,提取共同靶点,利用蛋白相互作用数据库(String)以及Cytoscape 3.9.1软件建立“环黄芪醇-核心靶基因”网络,对其进行GO及KEGG富集分析以探究环黄芪醇治疗酒精性肝损伤可能的分子机制。两步灌流法分离C57BL/6小鼠原代肝细胞并采用“三明治”方法体外培养。通过CCK8、MTT和ROS法确定诱导小鼠肝原代细胞氧化应激的最佳乙醇浓度并探索环黄芪醇的最佳治疗浓度,并用试剂盒检测原代肝细胞中ALT、AST的含量。real-time PCR、Western Blot检测NF-κB p65、p-NF-κB p65、AMPK、Nrf2和HO-1等基因和蛋白的表达。结果网络药理学方法筛选除出环黄芪醇治疗酒精性肝损伤关键基因10个,包括热休克蛋白90AA1(HSP90AA1)、糖原合成酶激酶3(GSK3A、GSK3B)、丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)等。KEGG富集分析预测环黄芪醇主要是通过IL-17信号通路(IL-17 signaling pathway)、趋化因子信号通路(Chemokine signaling pathway)、Rap1信号通路(Rap1 signaling pathway)、癌症信号通路(Prostate cancer、Bladder cancer)等发挥干预作用。体外实验结果显示,环黄芪醇可明显改善小鼠原代肝细胞状态,降低细胞中ALT、AST水平,下调p-NF-κB p65蛋白表达水平,上调AMPK、Nrf2、HO-1基因和蛋白表达水平,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论环黄芪醇具有一定的保肝作用,其可能通过NF-κB和AMPK/Nrf2/HO-1信号通路改善酒精性肝损伤。 展开更多
关键词 环黄芪醇 网络药理学 酒精性肝损伤 作用机制
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