CTV强弱毒分离株中p20的表达特征及其对SA通路相关基因的影响

为明确柑橘衰退病毒(CTV)强弱毒分离株中沉默抑制子p20的表达特性及其对SA通路关键基因的转录水平,采用RT-PCR、 cDNA克隆及基因组测序等技术获得p20基因序列,运用MEGA7和DNAMAN软件对CTV强弱毒分离株的p20氨基酸序列进行系统进化树构建和比对分析.结果表明,中国弱毒分离株CTLJ与T30,T358之间的亲缘关系最近,同源性为98.35%.进一步通过Western blot分析表明,CTV强分离株CT14A在甜橙嫩皮中p20的表达水平显著高于弱毒分离株CTLJ,然后探究了这两种强弱毒株间p20的沉默抑制能力是否有差异,结果表明强毒分离株CT14A和弱毒分离株CTLJ的p20蛋白均具有沉默抑制子活性,但是二者沉默抑制活性无显著差异.最后,RT-qPCR技术定量分析结果表明,烟草中瞬时表达p20会诱导SA信号通路关键基因PR1,PR1a和NPR1的转录水平发生变化.

感染CTV甜橙中挥发性成分的分析及萜类合成相关基因的表达变化

为明确柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)对柑橘挥发性物质的影响,本研究采用顶空固相微萃取法(Headspace Solid-phase Micro-Extractions,HS-SPEM)结合气相色谱-质谱联用(Gas Chromatography-Mass Spectrometry,GC-MS)技术分析了感染CTV的甜橙和健康甜橙挥发性成分.结果表明,CTV侵染使甜橙挥发性成分总量显著降低,仅为健康甜橙的71.00%,与健康甜橙中检测出的59种挥发性成分相比,感病甜橙中检测出55种,两者共有物质51种,其中33种的质量分数显著降低;此外,还有8种仅在健康甜橙中被检出,4种仅在CTV侵染甜橙中被特异检出,分别为百里香酚、香叶酸甲酯、石竹素和2-亚甲基-莰烷;检出的挥发性物质以萜类居多,为44种.采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术进一步分析了4个萜类合成关键基因(香叶基香叶基二磷酸合酶、法呢基焦磷酸合酶、γ-萜品烯合酶和柠檬烯合酶)表达量,结果表明,感染CTV甜橙中4个基因表达显著下降,与感染CTV甜橙中γ-萜品烯和柠檬烯质量分数显著减少趋势一致,暗示了CTV侵染甜橙影响了寄主萜类合成途径进而影响了挥发性物质的释放.

城市居住环境下高空坠物管理研究的分析与对策

随着我国城市化建设进程的不断推进提速,我国许多大中型城市的大中高层建筑越来越多,高空物体抛物的安全现象也屡禁不止。本研究项目从当前国内人类居住生活环境高空抛和坠物的发展现状及其研究成果入手,揭示高空抛、坠物坠落行为形成机制,研究国际防空抛坠坠落设计技术策略,并据此提出具有针对性的相关防空抛坠坠落设计技术建议,旨在为不断改善人居居住环境的提高防空抛坠安全以及性能设计提供综合行为心理学和环境建筑学的理论依据,也为进一步研究制定国际相关防坠设计导则方案奠定理论基础。