响应面法优化云南榧子多糖提取工艺研究

目的:云南榧树是我国珍稀濒危物种,其种子具有重要的食用和药用意义,研究云南榧子多糖提取工艺和最佳提取条件,可为有效开发利用云南榧子奠定基础。方法:在单因素实验基础上,利用Box-Benhnken中心组合实验和响应面分析法对多糖提取工艺进行优化。结果:优化出云南榧子多糖的最佳提取工艺条件:提取时间为34 min,提取温度为57℃,料液比为0.15 g/mL,浸提两次;云南榧子的实际多糖提取率为21.12%。结论:实验方法操作简单,可有效提高多糖提取效率,为云南榧子的大规模生产奠定基础。

石楠锈孢锈菌重寄生拟盘多毛孢的分离鉴定及抑菌活性

重寄生拟盘多毛孢因其特殊生境,可产生区别于内生或病原拟盘多毛孢的次生代谢产物,是有待开发的真菌资源。为了获得活性较好的石楠锈孢锈菌重寄生菌,采用组织分离法,从患有锈病的球花石楠叶片上分离纯化出3株疑似拟盘多毛孢真菌,它们形态特征差异明显,通过回接实验证实其均为石楠锈孢锈菌的重寄生菌。对3菌株在不同培养基上的培养性状和显微特征作了描述,并对ITS序列进行了扩增和序列分析。形态学和分子鉴定结果证实这3株真菌均为拟盘多毛孢属真菌。抑菌实验结果表明,3株重寄生菌除了对石楠锈孢锈菌的锈孢子有破坏作用外,对其他10种常见植物病原真菌也有一定的抑制作用。

茶麃生柱锈菌重寄生拟盘多毛孢产毒培养条件的筛选

从茶麃生柱锈菌的锈孢子堆上分离纯化了3株重寄生拟盘多毛孢,编号cr012、cr013和cr014。它们形态各异,但对茶麃生柱锈菌和石楠锈孢锈菌的锈孢子均有强寄生作用,且对10种常见植物病原真菌具有广谱抗性。通过台盼蓝染色法筛选出了3株重寄生菌破坏茶麃生柱锈菌锈孢子的最佳产毒培养条件,为毒素的分离及生物农药的开发提供依据。

云南榧种子内生真菌的分离鉴定及抑菌活性筛选

对采自云南省维西县的云南榧(Torreya yunnanensis)种子的内生真菌进行分离纯化和初步形态学鉴定,同时对内生真菌的抑菌活性进行筛选。通过真菌分离纯化技术对云南榧种子的内生真菌进行分离纯化,通过显微镜观察产孢结构进行初步形态学分析,并通过滤纸片法对内生真菌的抑菌活性进行筛选。从云南榧种子中共分离纯化得到50株内生真菌,其中拟茎点霉属13株,镰孢霉属7株,炭疽霉属5株,拟青霉属4株,链格孢属1株,木霉属1株,无孢菌群19株。抑菌活性显示云南榧种子内生真菌具有广泛的抑菌活性,其中菌株Z41与Z43对10种植物病原真菌具有广谱抗性。

西南地区榧树属植物3种不同总DNA提取方法的比较分析

以西南地区榧树属植物叶片为材料,利用改良CTAB法,改良SDS法和试剂盒法提取其总DNA,采用分光光度计和琼脂糖凝胶电泳方法检测所得总DNA的得率和纯度,用PCR扩增的方法检测所得总DNA的质量,并对3种不同提取方法的结果进行比较分析。结果表明,3种不同提取方法提取到的总DNA都能满足后期分子标记的要求,其中,改良CTAB法得率最高但纯度稍差,改良SDS法次之,试剂盒法得率最低但纯度高。为了更好的进行后期的分子试验,选择试剂盒法提取纯度较高的DNA。