三磷酸肌醇信号途径参与血小板激活因子诱导豚鼠心室肌细胞钙浓度增高

目的观察血小板激活因子(PAF)是否影响心室肌细胞钙离子浓度([Ca^(2+)]i)以及通过哪条信号转导通路起作用。方法采用酶法分离豚鼠心室肌细胞,用PAF刺激细胞;用Fluo-3/AM和共聚焦显微镜观察细胞[Ca^(2+)]i;用2-氨乙基硼酸二苯酯(2-APB)和雷诺定(ryanodine)分别阻断IP3和雷诺定信号通路。全细胞膜片钳技术观察心室肌细胞L型钙电流(ICa-L)。结果无论在有钙还是无钙台氏液,PAF(1pmol·L-1~10nmol·L-1)都能增加心肌细胞[Ca^(2+)]i,其作用能够被2-APB2μmo·lL-1阻断,而不能被雷诺定200μmol·L-1阻断。PAF1nmol·L-1对ICa-L没有明显影响,对照组和实验组电流密度分别为-(11.0±1.9)和-(10.5±1.3)pA·pF-1。结论PAF能增加豚鼠心室肌细胞[Ca^(2+)]i,IP3信号通路可能参与了这一过程。

鲑鱼鱼白DNA对老龄小鼠胸腺淋巴细胞构成的影响

目的 探讨外源性核酸对自然衰老小鼠CD3+ 、CD3+ CD4 +和CD3+ CD8+ 胸腺淋巴细胞构成的影响。方法 10月龄雌性Balb/c小鼠按体质量随机分为高剂量组、低剂量组和对照组。 5周后 ,测定胸腺脏器指数 ;胸腺组织切片后以Image proPlus专业图像分析系统 (4 .0版 )计数胸腺细胞 ;采用直接免疫荧光流式细胞术检测老龄小鼠胸腺细胞CD3+ 、CD3+CD4 + 和CD3+ CD8+ 的表达情况。结果 鲑鱼鱼白DNA提取物对小鼠的体质量、胸腺质量和胸腺指数均没有影响 ,但可增加小鼠的胸腺皮质和髓质细胞数量 ,并提高CD3+ 、CD3+ CD4 + 和CD3+ CD8+ 淋巴细胞的比例 ,而对CD3+ CD4 + 和CD3+ CD8+ 淋巴细胞的比值没有影响。结论 补充鲑鱼鱼白DNA可能改变自然衰老Balb/c小鼠胸腺细胞的构成 ,使胸腺有效细胞数量增加 。

鲑鱼鱼白DNA对老龄小鼠胸腺细胞IL-7 mRNA和CD127表达的影响

目的 探讨外源性核酸对自然衰老小鼠胸腺细胞IL 7mRNA和CD12 7(IL 7受体 )表达的影响。方法 10月龄雌性Balb c小鼠按体质量随机分为高剂量组 (每日灌胃 333.33mg·kg- 1 ·d- 1 鲑鱼鱼白DNA)、低剂量组 (每日灌胃 16 6 .6 7mg·kg- 1 ·d- 1 鲑鱼鱼白DNA)和对照组 ( 0 .1mol L的柠檬酸钠 )。 5周后测定胸腺脏器指数 ;原位杂交法检测胸腺内IL 7mRNA的表达 ,并用Image proPlus专业图像分析系统 ( 4 .0版 )对其表达面积百分比进行分析 ;间接免疫荧光流式细胞术检测老龄小鼠胸腺细胞CD12 7的表达。结果 鲑鱼鱼白DNA提取物对小鼠的体质量、胸腺质量和胸腺指数均没有影响 ,但高剂量SMD补充组可显著增加胸腺细胞IL 7mRNA表达和CD12 7淋巴细胞的数量 (分别P <0 .0 5 )。结论 补充鲑鱼鱼白DNA可能促进IL 7的产生及其受体的表达 ,从而延缓Balb

氧化苦参碱心肌保护作用及其作用靶点的研究

目的研究氧化苦参碱对心肌缺血的保护作用,并进一步探讨其可能的作用靶点。方法采用结扎大鼠左冠状动脉前降支制备急性心肌缺血模型,观察氧化苦参碱对心肌缺血的保护作用;应用TUNEL法检测氧化苦参碱对心肌缺血大鼠心肌细胞凋亡指数的影响;应用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)研究氧化苦参碱对急性心肌缺血大鼠心肌L型Ca2+通道蛋白mRNA表达的作用。结果氧化苦参碱大、中、小剂量(20、10、5mg/kg)组均可缩小心肌梗死面积;氧化苦参碱大、中剂量能明显提高血清SOD活力、降低MDA水平;TUNEL法证实氧化苦参碱可降低心肌细胞凋亡指数;RT-PCR检测结果表明,急性心肌缺血大鼠心肌L型Ca2+通道蛋白α1CmR-NA表达水平明显高于假手术组(P<0.01),经氧化苦参碱治疗后,心肌L型Ca2+通道蛋白α1CmRNA表达降低(P<0.05)。结论氧化苦参碱对大鼠急性心肌缺血具有保护作用,其机制可能与抑制脂质过氧化,降低大鼠心肌L型Ca2+通道蛋白α1CmRNA表达,从而抑制心肌细胞凋亡有关。

氧化苦参碱对大鼠急性心肌缺血时心肌细胞凋亡的影响

目的研究氧化苦参碱对大鼠急性缺血性心肌细胞凋亡的影响及其机制。方法以结扎左冠状动脉前降支方法建立大鼠急性心肌缺血模型,缺血6h后分别测定心肌梗死范围,血清超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量;采用HE染色检测心肌组织病理学改变;分别采用原位末端脱氧核糖核酸转移酶介导的d-UTP缺口末端标记(TUNEL)法及SP免疫组织化学法检测心肌细胞凋亡指数,凋亡相关蛋白Fas/FasL和Bcl-2的表达情况。结果氧化苦参碱能缩小大鼠缺血心肌梗死范围,提高血清SOD活力,降低MDA含量,减轻心肌组织病理性损伤,降低心肌细胞凋亡指数,抑制Fas蛋白表达,增强Bcl-2蛋白表达,但对FasL蛋白表达无明显影响。结论氧化苦参碱对大鼠急性心肌缺血损伤保护作用的机制可能与其抗脂质过氧化作用,抑制Fas蛋白和增强Bcl-2蛋白表达从而抑制心肌细胞凋亡有关。

气相色谱法测定水中氯乙酸的研究

[目的 ]建立一种简便、准确、适于基层使用的测定水中氯乙酸方法。 [方法 ]用酸、甲醇酯化氯乙酸 ,15 %DEGS填充色谱柱分离 ,电子捕获检测器检测。 [结果 ]氯乙酸最佳酯化条件 :温度 60℃ ,时间 60min ,浓硫酸 0 4ml,甲醇0 8ml。色谱最佳测试条件 :15 %DEGS色谱柱分离 ,柱温 10 5℃ ,气化室温度 190℃ ,检测室温度 190℃。该法线性范围较宽 ,一氯乙酸线性范围在 2 5～ 40 0 μg/ml(r=0 993 9) ,三氯乙酸线性范围在 0 2 5～ 1 0 μg/ml(r =0 9940 ) ,回收率在 95 %～ 10 5 %之间 ,CV均小于 5 % ,显示出良好的精密度和准确度。 [结论 ]本法具有快速、灵敏、准确等优点 。

大明胶囊对大鼠心肌梗死预防性保护作用的研究

目的观察大明胶囊对大鼠心肌梗死的预防性保护作用。方法对大鼠预防性给予大明胶囊1wk后,结扎其左冠脉前降支造成心肌梗死。通过测量心肌梗死面积,观察心肌酶学指标、病理形态学和组织超微结构的改变,评价大明胶囊对心肌梗死的预防性保护作用。结果心梗染色面积和心肌酶学指标显示(与模型组相比),大明胶囊灌胃后心肌梗死面积减少(P<0.05),乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)的含量降低(P<0.05)。心肌形态学和超微结构显示,大明胶囊减轻了左冠脉前降支结扎所造成的心肌损伤。结论通过心梗面积、心肌酶学指标、形态学和超微结构的观察,大明胶囊能预防性保护心肌梗死所造成的损伤。这提示大明胶囊可能应用于心肌梗死治疗。

槲寄生黄酮苷对大鼠心室肌细胞钾离子通道的作用

目的观察槲寄生黄酮苷对大鼠心室肌细胞钾离子通道的作用,探讨槲寄生黄酮苷抗心律失常作用机制。方法应用全细胞膜片钳技术记录槲寄生黄酮苷对大鼠单个心室肌细胞内向整流钾电流(IK1)、瞬时外向钾电流(Ito)的影响。结果应用50μg/ml和250μg/ml两种浓度的槲寄生黄酮苷分别使大鼠单个心室肌细胞内向整流钾电流(IK1)在实验电压-120mV时从给药前(-26.23±9.52)pA/pF减少到(-20.82±7.88)pA/pF,(-18.11±7.89)pA/pF(n=7,P<0.05);使大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)在实验电压+50mV时,从给药前(26.14±6.67)pA/pF减少到(16.41±6.23)pA/pF,(13.25±3.78)pA/pF(n=4,P<0.05)。结论槲寄生黄酮苷抑制大鼠心室肌细胞IK1,Ito可能是其抗心律失常作用的一个机制。

三氧化二砷对豚鼠心室肌细胞钾电流的影响

目的研究三氧化二砷(arsen ic trioxide,As2O3)对豚鼠心室肌细胞钾电流的影响,旨在探讨As2O3诱导QT间期延长的离子靶点。方法酶解法分离豚鼠单个心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术深入研究As2O3对豚鼠单个心室肌细胞动作电位时程(APD)、延迟整流钾电流(IK)和内向整流钾电流(IK1)的影响。结果As2O350和100μmol.L-1分别使APD50从对照组的(273±78)m s增加到(456±35)m s(P<0.01)和(513±41)m s(P<0.01),使APD90从对照组的(286±82)m s增加到(468±36)m s(P<0.01)和(524±40)m s(P<0.01);实验电压为+70 mV时,50和100μmol.L-1As2O3分别使IK从对照组的(6.7±1.7)pA/pF减少至(4.9±1.6)pA/pF(P<0.05)和(4.5±1.8)pA/pF(P<0.05);在实验电压为-120 mV时,As2O350和100μmol.L-1分别使IK1从对照组的(-20±5)pA/pF减少至(-13±3)pA/pF(P<0.05)和(-11±2)pA/pF(P<0.05)。结论As2O3诱导QT间期延长的离子机制可能与其扰乱了心肌细胞膜离子通道间的平衡,抑制IK和IK1,从而导致APD延长有关。

抗心律失常药物靶点——IKr／HERG通道的调控机制研究

目的探讨快速延迟整流钾电流（IKr／HERG）在缺血性心律失常发生过程中的调控作用及机制。方法新西兰兔12只，随机分为对照组和缺血组，采用酶解法分离单个心室肌细胞，应用全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞IKr／HERG变化趋势；应用Western blot技术，检测转染小RNA（miRNA）后人乳腺癌（SKBr3）细胞IKr／HERG通道蛋白表达量的改变。结果IKr／HERG在实验电压＋60mV下，缺血组（2．25±0．31）pA／pF明显低于对照组（3．81±0．64）pA／pF；miRNA转染进入SKBr3细胞后，细胞膜IKr／HERG通道蛋白表达量降低，仅是对照组的10％。结论miRNA调控IKr／HERG通道蛋白的表达，进而抑制IKr／HERG，参与缺血性心律失常的发生与发展。

缺血性心律失常相关微小RNA在大鼠心脏的表达变化

目的筛查缺血预适应大鼠心脏微小RNA(microRNA,或miRNA)的表达变化,寻找与缺血性心律失常相关的微小RNA。方法SD大鼠随即分为假手术组和缺血预适应组(IP),每组3只。应用手术套管法建立在体大鼠心肌缺血预适应模型(5min缺血、5min再灌,三个循环)。建模4h后取材提取RNA,应用微小RNA芯片技术检测IP组非缺血再灌注区(a)I、P组缺血再灌注区(b)和假手术组(c)心肌组织小RNA的表达情况。结果同假手术组相比,缺血再灌区心肌有4个miRNA上调,5个miRNA下调;缺血预适应组非缺血再灌区有23个miRNA上调,包括三个肌肉特异表达的miRNA(mir-1、mir-133和mir-206),另有9个miRNA表达下调。结论在心肌缺血预适应过程中,心肌微小RNA的表达发生明显变化,这些微小RNA可能对缺血预适应介导的抗心律失常起重要调节作用,为缺血性心律失常机制研究提供了新思路。

槲寄生总黄酮苷对缺氧、心肌缺血及心律失常的预防作用的研究

目的研究槲寄生总黄酮苷对缺氧、急性心肌缺血和心律失常的预防作用。方法采用乙醇和有机溶剂萃取方法从槲寄生中提取总黄酮有效成分;用磨口瓶法观察完全密闭小鼠的存活时间;垂体后叶素(1U/kg)致心肌缺血模型,用分光光度法测LDH、MDA、SOD值;用乌头碱(40μg/kg)建立心律失常模型,观测对室颤发生率等的影响。结果耐缺氧实验中给药组小鼠的平均存活时间显著长于对照组(P<0.05);在心肌缺血实验中,给药组血清中LDH、MDA、SOD的含量与模型组有显著差异(P<0.05);在心律失常实验中室性心动过速(VT)、室颤(VF)的发生率有降低趋势,室性早搏出现时间有延长趋势,对窦性节律恢复率没有影响。结论槲寄生总黄酮苷可显著增强小鼠耐缺氧能力;槲寄生总黄酮苷对垂体后叶素引起的大鼠急性心肌缺血损伤具有显著的保护作用;槲寄生总黄酮苷对大鼠心律失常有一定拮抗作用。

槲寄生黄酮苷对大鼠实验性心肌梗死保护作用的研究

目的观察槲寄生黄酮苷(Viscum coloratum flavonoid glycoside,VCFG)对大鼠实验性心肌梗死的保护作用。方法通过结扎大鼠冠状动脉左前降支造成急性心肌梗死模型,观察术后30min内VCFG对心肌缺血大鼠心电图(ECG)ST段抬高的影响,6h后,计算心肌梗死面积(MIS),测定血清乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量等指标,来评价VCFG对大鼠急性心肌梗死的保护作用。结果与模型对照组比较,VCFG高剂量给药组可抑制心肌缺血大鼠心电图ST段的抬高,明显缩小MIS,降低LDH和MDA含量,也能明显提高SOD活性。结论槲寄生黄酮苷对大鼠实验性心肌梗死具有保护作用。

鲑鱼鱼白DNA对老龄BALB/c小鼠胸腺的形态学影响

〔目的〕探讨外源核酸对老龄小鼠胸腺的形态学影响。〔方法〕10月龄雌性BALB/c小鼠按体重随机分成3组,在普通饲料饲喂的基础上,各组分别每日灌胃0.1mol/L的柠檬酸钠缓冲液（缓冲液对照组）和166.67mg·kg～（-1）·b·w·d～（-1）、333.3mg·kg～（-1）·b·w·d～（-1）的鲑鱼鱼白DNA低、高剂量核酸补充组）。饲喂5周后常规处死实验动物。每只动物常规取胸腺,测量胸腺脏器指数;每个胸腺单独用蜡块包埋,均选择最大切面切片,每张切片随机观察10个视野。将镜下观察的图像输人Image-pro Plus专业图像分析系统（4.0版）进行细胞计数和皮质厚度测量,SAS统计软件分析所得数据。〔结果〕不同剂量鲑鱼鱼白DNA充组小鼠的体重、胸腺重量和胸腺指数与对照组相比无差异显著性,P>0.05;高剂量鲑鱼鱼白DNA补充组小鼠的胸腺皮质细胞数量与对照组相比显著增多,P<001,髓质细胞数与对照组相比也明显增多,P<0.05;低剂量鲑鱼鱼白DNA补充组的胸腺皮、髓质细胞数量与对照组相比差异不显著,P>0.05;不同剂量鲑鱼鱼白DNA补充组的胸腺皮质平均厚度均显著高于对照组,高剂量组的差异更为显著（P<0.01）。〔结论〕鲑鱼鱼白DNA有可能缓解老龄小鼠胸腺的退化萎缩。

大明胶囊对大鼠急性心肌缺血的保护作用

目的研究大明胶囊对大鼠急性心肌缺血的保护作用。方法结扎冠状动脉左前降支(LAD)建立大鼠急性心肌缺血模型,观察30min内心电图(ECG)变化和术后6h血清中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、抗超氧阴离子活性,以及心肌梗死面积来评价大明胶囊的作用。结果大明胶囊能显著缩小冠脉结扎所致急性心肌缺血大鼠的心肌梗死面积,降低血清中CK、LDH活性,提高血清中抗超氧阴离子浓度;ECG显示各给药组与病理模型组比较S-T段明显降低(P<0.05)。结论预防性给予大明胶囊对大鼠急性心肌缺血损伤具有保护作用。

大明胶囊对大鼠实验性缺血心肌的保护作用

目的观察大明胶囊对大鼠实验性急性心肌缺血的保护作用。方法采用大鼠舌下静脉注射垂体后叶素(Pit)诱发急性心肌缺血模型,观察各组注射Pit后15min内心电图ST段、心率的变化以及6h后血清乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、肌酸激酶(CK)浓度的变化。结果大明胶囊对Pit所致急性缺血性心电图ST段抬高、降低和心率的降低都有明显对抗作用,能明显增加血清SOD的活性,降低CK和LDH的含量(P<0.05)。结论预防性给予大明胶囊对Pit致大鼠急性心肌缺血具有明显的保护作用。

鲑鱼鱼白DNA延缓小鼠衰老的实验研究(英文)

目的探讨鲑鱼鱼白DNA(salmonmiltDNA,SMD)对小鼠胸腺增龄性萎缩的作用及作用机制。方法10月龄雌性BALB/c小鼠按体重随机分成缓冲液对照组(controlgroup,C组)、低剂量组(lowdosagegroup,L组)和高剂量组(highdosagegroup,H组),每组26只。在标准饲料基础上分别每日灌胃0.1mol/L的柠檬酸钠缓冲液和166.67mg/(kg·d),333.33mg/(kg·d)的SMD。5周后,无菌取胸腺,测量胸腺脏器指数;每个胸腺单独蜡块包埋,切片用Image-proPlus专业图像分析系统(4.0版)进行细胞计数和皮质厚度测量并经SAS(6.12版)统计软件分析数据。应用基因芯片技术在C组和H组胸腺组织中筛选表达差异的基因片段、RT-PCR鉴定部分片段。结果SMD对小鼠的体重、胸腺重量和胸腺指数均无影响(各指标F<3.0,P>0.05);高剂量组小鼠的胸腺皮、髓质细胞数量与对照组相比均显著增多犤皮质D(H,C)=9.46,P<0.01;髓质t(H,C)=2.53,P<0.05犦;低剂量组的胸腺皮、髓质细胞数量与对照组相比差异均不显著犤皮质D(L,C)=3.65,P>0.05;髓质t(L,C)=0.8,P>0.05犦;高、低剂量组的胸腺皮质平均厚度均显著高于对照组犤t(H,C)=4.01,P<0.01;t(L,C)=2.80,P<0.05犦;经基因芯片技术初筛出112条差异表达的基因片段;Genebank登录号为Aw209102,U23789,X80232的3条上调表达的基因片段。

酵母RNA对老龄大鼠生理机能和肝、脑形态学的影响

目的 探讨外源核酸对老龄大鼠的生理机能和肝、脑形态学影响。方法 选取健康老龄 (2 0月龄 )Wistar雄性大鼠随机分为高、中、低 3个剂量组和老龄对照组、另取青龄 (3月龄 )作为青龄对照组 ,高、中、低剂量组在标准饲料基础上 ,每日每只分别添加酵母RNA93 75mg、4 6 88mg和9 38mg ,饲喂 4周。结果 高剂量组超氧化物歧化酶 (SOD)活性、血清高密度脂蛋白 (HDL)和生长激素水平均高于老龄对照组 ,酵母RNA补充各组丙二醛含量均低于老龄对照组 ,高、中剂量组血清睾酮达到青龄对照组水平 ,而老龄动物各组间雌二醇水平未见统计学差异 ;补充酵母RNA组的老龄大鼠脑神经元数与老龄对照组大鼠相比有增多趋势并存在剂量效应关系 ,但没有统计学差异 ;肝细胞核面积与核浆比均大于老龄对照组 ,其中核浆比具有统计学差异。结论 酵母RNA可能具有改善老龄大鼠生理机能和肝、脑组织形态学改变的作用 ,并可能具有量 效关系。

三氧化二砷与白藜芦醇联用对急性早幼粒细胞性白血病NB4细胞存活率的影响

目的 观察三氧化二砷（ATO）与白藜芦醇（Res）联用对人急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4细胞存活率的影响,并探讨其作用机制.方法 采用不同剂量的ATO[0（对照）、0.1875、0.3750、0.7500、1.1250、1.5000、2.2500、3.0000、5.0000 μmol/L]、Res[0（对照）、1.5625、3.1250、6.2500、12.5000、18.7500、25.0000、37.5000、50.0000 μmol/L]孵育NB4细胞.应用四氮唑盐比色法（MTT）检测不同处理组的细胞存活率,计算ATO和Res对NB4细胞的半数抑制浓度（IC50）.根据IC50,设置联合用药比例分别为1.5∶18、.5∶25、.5∶35,并根据药物联合指数计算公式,分别计算出联合用药在不同抑制效应（0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9）时的联合指数,判断ATO与Res在不同抑制效应时各自所需药物浓度之间的相互作用.应用DCFH-DA荧光探针检测对照组、ATO（1.5000 μmol/L）加药组、Res（25.0000 μmol/L）加药组、联合用药组（0.9000 μmol/L ATO＋12.5000 μmol/L Res）NB4细胞活性氧（ROS）水平,每组各检测10份样品.结果 ①ATO（≥0.7500 μmol/L）加药组NB4细胞存活率明显低于对照组（P＜0.05）,呈剂量依赖性的量效关系,IC50为（1.78±0.11）μmol/L.②Res（≥18.7500 μmol/L）加药组NB4细胞存活率明显低于对照组（P＜0.05）,呈剂量依赖性的量效关系,IC50为（18.71±0.18）μmol/L.③ATO和Res联合应用对NB4细胞存活抑制效应呈现拮抗作用.④Res加药组NB4细胞内ROS水平（1670.55±13.97）明显低于对照组（2345.88±14.48,P＜0.05）.ATO加药组NB4细胞内ROS水平（3092.42±94.84）明显高于对照组（P＜0.05）.联合用药组NB4细胞内ROS水平（1860.27±15.99）明显低于ATO加药组（P＜0.05）.结论 ATO、Res均可致NB4细胞存活率下降,而两者联合应用时表现为拮抗效应,ROS可能参与了这种拮抗作用.