正交试验法优选维药神香草总黄酮的提取工艺研究

目的筛选维药神香草总黄酮的最佳提取工艺。方法以总黄酮的含量为指标,采用L9(34)正交试验,考察乙醇浓度、提取时间、提取次数及料液比为因素,采用紫外分光光度法对神香草总黄酮含量进行检测,确定最佳提取工艺。结果最佳提取工艺为A2B3C1D3,即12倍量的70%的乙醇提取3次,每次1h。结论优选得到的工艺方法合理、稳定,为进一步研究提供参考。

罗勒提取物对肾性高血压大鼠的影响

目的:通过验证罗勒(全草)提取物(OBL)对肾性高血压模型大鼠的降压作用,探讨OBL的降压作用机理。方法:正常Sprague-Dawley(SD)大鼠适应性喂养1周后测基础血压。然后进行左肾动脉狭窄手术。手术后4周,形成两肾一夹(2K1C)肾性高血压。将高血压大鼠60只随机分成5组:罗勒提取物高剂量组(H,400 mg/kg)、罗勒提取物中剂量组(M,200 mg/kg)、罗勒提取物低剂量组(L,100 mg/kg)、卡托普利组(Cap,30 mg/kg)、高血压模型组(Model)。从肾动脉狭窄手术后4周开始灌胃给予相应药物,持续4周,每周末测血压;外加假手术组(Sham)10只。处死动物取血测血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、内皮素(ET)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)。结果:两肾一夹(2K1C)术后4周,假手术组血压为(138±2.04)mmHg,模型组血压为(201±3.69)mmHg,两组血压差异有统计学意义(P<0.05)。同时AngⅡ、ET以及MDA含量明显增高;而SOD活性降低。给予罗勒提取物后血压(收缩压和舒张压)均有下降。ET、MDA明显下降、而SOD活性增高(P<0.05),且作用强于卡托普利组(P<0.05)。同时AngⅡ也明显下降。结论:罗勒提取物对肾性高血压大鼠具有降压作用,其降压作用机制可能与通过抗氧化反应来保护内皮细胞,改善血管内皮功能紊乱,抑制缩血管物质(内皮素、血栓素A2、血管紧张素Ⅱ)的释放有关。

维药神香草总黄酮抗炎、止咳、祛痰及平喘作用研究

目的探讨维药神香草总黄酮的抗炎、止咳、祛痰及平喘作用。方法昆明种小鼠50只,体质量(20±2)g,雌雄各半,随机分成空白对照组(0.9%生理盐水)、阳性对照组(急支糖浆5.0g/kg)、神香草总黄酮高剂量组(0.8g/kg)、神香草总黄酮中剂量组(0.4g/kg)、神香草总黄酮低剂量组(0.2g/kg)5组;采用小鼠右耳二甲苯致炎法、氨水喷雾致小鼠咳嗽法、小鼠气管酚红排泌法、2%氯化乙酰胆碱与0.1%组胺1∶1混合液致豚鼠哮喘法进行实验。结果不同剂量神香草总黄酮可明显抑制二甲苯致小鼠的耳廓肿胀(P<0.05),减少氨水喷雾致小鼠咳嗽次数(P<0.05),促进小鼠气管段酚红排泌(P<0.05),使豚鼠哮喘潜伏期明显延长(P<0.05),且其抗炎、止咳、祛痰及平喘作用均呈明显的剂量依赖关系(P<0.05)。结论维药神香草总黄酮具有显著的抗炎、止咳、祛痰、平喘作用。

维药神香草乙酸乙酯部位的抗炎、止咳、祛痰及平喘作用研究

目的:观察维药神香草乙酸乙酯部位的抗炎、止咳、祛痰及平喘作用。方法:采用系统溶剂法对神香草醇提物进行初步分离,制备其乙酸乙酯部位;采用小鼠耳廓二甲苯致炎法、氨水喷雾致小鼠咳嗽法、小鼠气管酚红排泌法、2%氯化乙酰胆碱与0.1%组胺1:1混合液致豚鼠哮喘法进行实验。结果:神香草乙酸乙酯部位不同剂量可明显抑制二甲苯致小鼠的耳廓肿胀(P<0.05)、减少氨水喷雾致小鼠咳嗽次数(P<0.05)、促进小鼠气管酚红排泌(P<0.05)、豚鼠哮喘潜伏期明显延长(P<0.05),且其抗炎、止咳、祛痰及平喘作用均呈明显的剂量依赖关系(P<0.05)。结论:维药神香草乙酸乙酯部位具有显著的抗炎、止咳、祛痰、平喘作用。

维药神香草不同提取物镇咳、祛痰作用比较研究

目的:比较维药神香草水、醇提物及乙酸乙酯萃取物的镇咳、祛痰作用。方法:分别采用小鼠氨水引咳法、气管酚红排泄法考察其镇咳、祛疾作用。结果:阳性对照组和神香草不同提取物给药组对浓氨水致小鼠咳嗽反应有明显抑制作用,能延长小鼠咳嗽反应的潜伏(P<0.05),能明显提高小鼠呼吸道酚红排泌量(P<0.05)。其中神香草乙酸乙酯萃取物的作用更显著,并呈剂量依赖趋势(P<0.05)。结论:神香草乙酸乙酯萃取物镇咳、祛痰作用比其水、醇提取物更显著,推测神香草乙酸乙酯萃取物可能是其主要活性部位。

维药神香草挥发油与超临界CO_2流体萃取物化学成分的比较研究

目的研究维药神香草水蒸气蒸馏提取挥发油与超临界CO2流体萃取物化学成分的异同。方法采用水蒸气蒸馏法与超临界CO2流体萃取法分别提取神香草挥发油和超临界CO2流体萃取物,并通过气相色谱-质谱(GC-MS)联用仪对其化学成分进行分析和鉴定。结果维药神香草挥发油的水蒸气蒸馏法提取率为0.68%,GC-MS分析、鉴定出所有65种化合物,其中含量较高的是亚油酸(13.83%)、棕榈酸(13.80%)、(+)-胡薄荷酮(8.31%)、(+)斯巴醇(6.27%)、二十一烷(5.34%)、香茅酸(4.07%)、二十六烷(4.02%)、二十四烷(3.28%)、二十烷(3.06%)。维药神香草超临界CO2流体萃取物的萃取得率为5.5%,GC-MS分析、鉴定出所有34种化合物,其中γ-谷甾醇(31.882%)、二十八烷(19.953%)、亚麻酸(16.279%)、三十六烷(15.939%)、棕榈酸(10.658%)、亚麻酸乙酯(12.471%)、三十一烷(12.215%)、9,12,15-十八烷三烯酸乙酯(9.057%)化合物含量较高。结论维药神香草挥发油与超临界CO2流体萃取物化学组成存在较大的差异,超临界CO2流体萃取物中的γ-谷甾醇、亚麻酸、亚麻酸乙酯等被认为是具有较强生物活性的化合物,且含量较高,具有较大的潜在研究前景。

维药神香草总黄酮对卵清白蛋白致大鼠哮喘模型气道炎症的影响

通过观察哮喘大鼠肺组织病理学改变、测定支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞总数、淋巴细胞(Ly)、嗜酸性粒细胞(Eos)、中性粒细胞(Neu)的百分比以及肺组织和BALF中的转化生长因子-β1(TGF-β1),以探讨神香草总黄酮对哮喘大鼠气道炎症的影响,阐明维药神香草总黄酮抗哮喘的部分作用机制。试验中将大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、氨茶碱阳性对照组、神香草总黄酮高、中、低剂量治疗组。采用卵清白蛋白(OVA)、氢氧化铝及百白破疫苗联合致敏和OVA生理盐水雾化激发的方法制备哮喘模型。测定BALF中细胞总数、Ly、Eos、Neu的百分比;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测肺组织及BALF中TGF-β1水平。结果显示,与模型组相比,各治疗组中,大鼠BALF中细胞总数、Ly、Eos、Neu的百分比、TGF-β1水平及肺组织中的TGF-β1水平均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);神香草总黄酮各剂量组之间相互比较,BALF及肺组织中的以上指标差异均有统计学意义(P<0.05),呈剂量依赖性趋势。由此推测,维药神香草总黄酮可能通过抑制Ly、Eos、Neu等炎症细胞及细胞因子TGF-β1的分泌,减轻或改善哮喘的气道炎症。

维药神香草乙酸乙酯部位对大鼠实验性哮喘炎症反应的影响

通过观察哮喘大鼠肺组织病理学改变,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中内皮素-1(ET-1)水平及细胞总数、淋巴细胞(Ly)、嗜酸性粒细胞(Eos)、中性粒细胞(Neu)的百分比,血清中的内皮素-1(ET-1)、白介素-2(IL-2)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)水平,探讨神香草乙酸乙酯部位对哮喘炎症反应的影响,阐明维药神香草抗哮喘的部分作用机制。将大鼠随机分为正常对照组,哮喘模型组,氨茶碱阳性对照组,神香草乙酸乙酯部位高、中、低剂量治疗组。采用卵清白蛋白(OVA)、氢氧化铝及百白破疫苗联合致敏和OVA生理盐水雾化激发的方法制备哮喘模型。测定BALF中细胞总数,Ly、Eos、Neu的百分比;采用酶联免疫吸附实验法(ELISA)检测血清及BALF中ET-1水平,放射免疫法检测血清中ET-1、IL-2、IL-6、TNF-α水平。结果显示,与模型组相比,各治疗组大鼠BALF中细胞总数,Ly、Eos,Neu的百分比,ET-1水平及血清中的ET-1、IL-2、IL-6、TNF-α水平均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);神香草乙酸乙酯部位各剂量组之间相互比较,BALF及血清中的以上指标差异均有统计学意义(P<0.05),呈剂量依赖性趋势。由此推测,维药神香草可能通过抑制IL-2、IL-6、ET-1、TNF-α、Ly、Eos、Neu的分泌,减轻哮喘的炎症反应。