固相萃取-高效液相色谱电化学法检测大鼠血浆儿茶酚胺

建立了一种Oasis HLB固相萃取-高效液相色谱（HPLC）电化学检测大鼠血浆儿茶酚胺（CAs）的方法。血浆样本在形成二苯基硼酸-儿荼酚胺复合物后经优化的固相提取技术，得到较高样本回收率。以Atlantis C18色谱柱为固定相，确定了各种影响色谱的参数，如流动相组成、pH范围及检测器的设定。儿茶酚胺所有组分肾上腺素（E）、去甲肾上腺素（NE）和多巴胺（DA）的平均提取回收率在90％～95％之间。E、NE和DA的质量浓度在0．25～30ng／mL时与峰面积呈良好的线性关系（r值分别为0．9989，0．9992和0．9984）；检出限为0．4pg。该法灵敏、准确、重现性好、结果可靠。

槐角不同部位中芦丁和槐角苷含量的比较研究

目的考查槐角不同部位,即角皮和种子占槐角重量的百分比,及各组分中芦丁和槐角苷的含量差异,为科学、有效地利用现有槐角资源提供理论依据。方法采用高效液相色谱法同时测定角皮或种子提取物中芦丁及槐角苷的含量。HPLC测定条件:Diamonsil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-1%冰醋酸-乙腈(57∶38∶5,V/V),流速1.0ml.min-1,检测波长260 nm。结果槐角角皮和种子占槐角重量的平均百分比分别为64%和36%。芦丁浓度在0.08～1.0 g.ml-1,槐角苷浓度在0.125～2.0 g.ml-1范围内,与峰面积呈良好的线性关系。槐角皮和槐角种子中黄酮类化合物HPLC谱型相似,但含量差别较大,槐角皮中芦丁与槐角苷含量分别为(0.44±0.15)%和(6.20±0.57)%,种子中两者的含量分别为(0.36±0.09)%和(0.49±0.20)%。槐角皮中槐角苷的含量明显高于槐角种子,P≤0.01,提示差异显著。结论槐角中的槐角苷主要存在于槐角皮中,因此提取这类化合物时可以将槐角皮和种子分开,只以角皮为材料,种子可用于其他目的的研究,以达到科学、有效地利用槐角资源。

缺血性脑损伤大鼠海马皮层递质氨基酸变化的研究

目的 建立高效液相色谱分析法 ,研究缺血性脑损伤大鼠海马皮层递质氨基酸的变化。方法 用邻苯二甲醛 β 巯基乙醇柱前衍生 ,反相程序洗脱 ,荧光检测分析实验动物脑组织中的海马、皮层递质氨基酸即氨基丁酸 (GABA)、天门冬氨酸 (Asp)、谷氨酸 (Glu)、牛磺酸 (Tau)、甘氨酸 (Gly)的含量。 结果 该方法在 5 0 pmol～ 2nmol/L范围内具有良好的线性 ,线性相关系数平均为 0 .9997,平均回收率在 87.75 %～ 10 8 5 3 %之间 ,峰面积变异系数小于 4 73 %。缺血脑损伤大鼠皮层海马脑区的兴奋性氨基酸明显高于正常对照组。结论 为目前缺血性脑损伤功能障碍机理及健脑中药的药理研究提供了快速分析手段。为从神经生化角度揭示多发梗塞性痴呆的发生机制提供了有意义的线索和依据。

高铁负荷对化学性肝损伤大鼠Bcl-2/Bax基因表达的影响

目的 研究高铁负荷对化学性肝损伤大鼠Bcl 2 /Bax基因表达的影响。方法 复制大鼠高铁负荷模型 ,以四氯化碳 (CCl4)攻击复制肝损伤模型。观察各实验组和对照组的血清铁 (SI)、肝组织铁 (HIC)及丙二醛 (MDA)含量变化 ,流式细胞仪检测肝细胞DNA含量、Bcl 2和Bax表达量 ,计算凋亡指数 (ApoptoticIndex ,AI)和增殖指数 (ProliferationIndex ,PI)。结果 高铁组大鼠SI,HIC及MDA含量增加 ,AI升高 ,PI无明显变化。CCl4+高铁组与高铁组相比 ,MDA ,AI及Bax均有显著增加。结论 铁可以诱导肝细胞凋亡 ,其机制可能为 :上调促凋亡基因Bax水平 ,催化脂质过氧化反应 ,促进氧自由基的产生 ,从而引起肝细胞凋亡 ,并且 ,铁与CCl4在促进肝细胞凋亡上有协同作用。

改变铁负荷对免疫性肝损伤大鼠肝细胞脂质过氧化与凋亡的影响

目的 研究改变铁负荷后 ,免疫性肝损伤大鼠肝细胞脂质过氧化与细胞凋亡的变化 ,探讨免疫性肝损伤的作用机制。方法 将 32只Wistar大鼠随机分成 4组 ,采用放血法复制低铁模型 ,采用卡介苗加脂多糖诱导法复制免疫性肝损伤模型。观察各处理组血清总蛋白 (TP)含量及天门冬氨酸氨基转移酶 (AST)活性的变化 ,观察肝组织中丙二醛 (MDA)含量、超氧化物歧化酶 (SOD)活性及细胞凋亡相关指标的变化。结果 通过相应损伤对照组比较 ,低铁肝损伤组AST活性增高幅度和TP含量的降低幅度均小于肝损伤组 ,各损伤组MDA含量均增高 ,SOD活性均降低。与正常对照组比较 ,低铁对照组MDA显著降低、Bcl 2和Bax表达量、Bax Bcl 2比值及凋亡指数 (AI)值均增高 ,肝损伤组Bcl 2表达量基本不变。低铁肝损伤组Bcl 2表达量显著高于肝损伤组。与相应损伤对照组比较 ,各损伤组Bax表达量显著升高 ,肝损伤组Bax Bcl 2比值和AI值明显增高 ,低铁损伤组Bax Bcl 2比值和AI值均下降 ,低铁损伤组增殖指数 (PI)值增高幅度大于单纯肝损伤组。结论 降低铁负荷 ,减轻了肝损伤的程度 ,其作用机制可能是通过改变肝细胞脂质过氧化 ,影响Bcl

尾式卟啉吡啶季铵盐二阶导数分光光度法测定锌的研究

卟啉试剂作为高灵敏度显色剂测定锌,已有报道,但测定时有的需要加入表面活性剂、掩蔽剂等。而我们新合成的新型尾式卟啉吡啶季铵盐5-[4-(4-吡啶丁氧基)苯基]-10,15,20-三(4-氯苯基)卟啉溴化物,由于含有季铵盐基团,因而具有表面活性剂的作用。

中国北方青年女子基础代谢率的研究

目的测定中国北方青年女子的基础代谢率。方法根据2002年全国营养调查提供的数据,在标准化实验对象和实验条件的前提下,应用K4b2心肺功能测定仪,对16名20～25岁正常体质指数的青年女子进行基础代谢率的测定,将实测值与Schofield公式(修正)计算值进行比较,并对基础代谢率与身高、体重、体表面积等指标进行相关性分析。结果20～25岁正常体质指数的青年女子基础代谢率实测值为3.60±0.28kJ/(kg.h),Schofield公式(修正)计算值为3.95±0.13kJ/(kg.h);基础代谢率与体表面积、瘦体重、体重、身高呈显著正相关。结论中国北方青年女子基础代谢率的实测值明显低于《中国居民膳食营养素参考摄入量》推荐使用Schofield公式(修正)计算值。

槐角不同部位中主要黄酮苷元成分的比较

目的比较研究槐角不同部位,即槐角皮和种子中3种主要苷元形式黄酮类化合物,槲皮素、染料木素和山萘酚的含量差异,为科学、有效地利用现有槐角资源提供理论依据。方法采用高效液相色谱法同时测定酸水解样品中槲皮素、染料木素和山萘酚的含量。HPLC测定条件:Diamonsil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.4%磷酸-甲醇溶液(50∶50),流速1.0 ml/min,检测波长360 nm。结果槐角皮中槲皮素、染料木素和山萘酚含量分别为(2.4±0.8)、(41.3±3.8)和(29.2±0.23)mg/g,种子中三者的含量分别为(1.9±0.4)、(3.3±1.3)和(3.6±1.1)mg/g,其中槐角皮中染料木素和山萘酚含量明显高于种子中的含量,差异显著(P<0.01)。结论槐角中主要苷元形式的黄酮类化合物为染料木素和山萘酚,且二者主要存在于槐角皮中。了解这种分布差异,可以改变以完整槐角为材料的研究思路,将槐角皮与槐角种子分别用于不同目的的研究,对于缓解目前槐角资源紧张的现状,更有效地利用现有槐资源,具有一定的指导意义。

我国北方男性青年基础代谢率

目的:测定具有正常体质指数的中国北方青年男性的基础代谢率。方法:根据2002年全国营养调查提供的中国北方青年男性平均身高和体重,筛选受试者(年龄20～24岁、身高165～177cm、体重57～73kg)30名。采用心肺功能测试仪测量其基础代谢率和静息代谢率;以四电极生物电阻抗仪测量体成分。结果:20～24岁正常体质指数的青年男性基础代谢率为129.16±24.59kJ/(h·m2),静息代谢率为166.36±28.03kJ/(h·m2)结论:与中国营养科学全书推算的理论值或修正值相比,中国北方青年男性的基础能量消耗的实测值明显偏低。

差示分光光度法测定苯扎溴铵消毒液中主药的含量

目的 建立苯扎溴铵消毒液中苯扎溴铵和亚硝酸钠含量的测定方法。方法 取浓度相同的两份苯扎溴铵消毒液 ,一份加入氨基磺酸铵和 1mol·L-1盐酸作为参比液 ,在 35 4 6nm测定亚硝酸钠的ΔA。取参比液 ,在波长2 6 2 2nm直接测定苯扎溴铵的含量。结果 亚硝酸钠在 0 4～ 2 5 0mg·ml-1浓度范围内 ,线性良好。RSD =0 3%。苯扎溴铵在 0 1～ 3 5 0mg·ml-1浓度范围内 ,线性良好 ,RSD为 1 0 %。结论 该法操作简便 ,灵敏 ,结果满意。

槐米中主要黄酮苷元成分的分析

槐米样品经甲醇连续提取及盐酸水解,以HPLC法同时测定其中主要黄酮苷元(槲皮素、染料木素、山柰酚及异鼠李素)含量,并对5个不同采摘地槐米样品主要黄酮苷元进行定量分析.结果证明,所用方法可以有效分离水解槐米样品中存在的槲皮素、染料木素、山柰酚及异鼠李素,其中槲皮素的平均峰面积占4种苷元馏出峰总面积的(72.12±5.96)%,为主要苷元形式.槐米样品中4种黄酮苷元总含量为(98.4±6.4)mg/g,其中槲皮素、染料木素、山柰酚与异鼠李素的含量分别为(78.8±1.6),(1.3±0.5),(8.5±6.1),(9.8±2.1)mg/g.HPLC法同时测定4种黄酮苷元含量的方法简便易行,适用于槐米及其制剂内在质量的控制;虽然以芦丁为主的槲皮素苷占了槐米总黄酮的75%,但仍有约25%的染料木素苷、山柰酚苷与异鼠李素苷,这些黄酮成分的开发利用对于科学利用槐米资源具有重要意义.

不同剂量碘对小鼠大脑和血液中乙酰胆碱的影响

目的 研究不同剂量高碘、缺碘动物模型仔鼠、成鼠脑组织和血液中乙酰胆碱 (Ach)的含量。方法 用随机区组实验设计方法将初断乳昆明小鼠随机分为 5组 ,用碘酸钾配制成含碘 0 (缺碘 ) ,5 0 (适碘对照 ) ,5 0 0(高碘 ) ,15 0 0 (高碘 ) ,30 0 0 (高碘 ) μg/ L 溶液 ,喂养 10 0 d后复制成高碘、缺碘动物模型 ,交配生仔 ,选择 2 0日龄仔鼠、90日龄成鼠测定大脑和全血中 Ach含量。结果 不同剂量高碘和缺碘均使仔鼠、成鼠脑组织和血液中Ach含量明显降低 (P <0 .0 5 ) ;高碘 组仔鼠和成鼠脑组织中 Ach含量显著降低 (P <0 .0 5 ) ;高碘 组仔鼠和成鼠血液中 Ach含量显著降低 (P <0 .0 5 ) ;成鼠脑组织、血液中 Ach含量较仔鼠含量高 ,有的组间差异有显著意义。结论 高碘、缺碘均可引起小鼠脑组织和血液中 Ach含量明显降低 ,90日龄成鼠较 2 0日龄仔鼠脑组织和血液中

肉碱和长链脂肪醇对小鼠大脑乙酰胆碱的影响

目的 探讨肉碱和长链脂肪醇对小鼠大脑乙酰胆碱 (Ach)含量的影响。方法 用析因实验设计方法将BALB/C成年雄性小鼠随机分为标准对照、高脂对照、肉碱、长链脂肪醇、肉碱和长链脂肪醇合用共 5组 ,标准对照组饲标准饲料 ,其它各组饲含 2 0 %油脂的饲料 ,肉碱 [剂量 50mg/ (kg·鼠重 ) ]和长链脂肪醇 [剂量 50mg/ (kg·鼠重 ) ]以0 0 9%的剂量加到饲料中连续喂养 3 0d后 ,称体重、脑重 ,计算脑体比 ,用碱性羟胺比色法测大脑组织中Ach含量。结果 肉碱和长链脂肪醇对成鼠体重、脑重、脑体比无显著影响 (P >0 0 5) ;高脂饲料组小鼠脑内Ach含量较对照组明显降低 (P <0 0 5) ,长链脂肪醇可引起高脂动物脑内Ach含量升高 (P <0 0 5) ,但与正常饲料组无明显差异 (P >0 0 5) ;肉碱引起脑内Ach含量明显增多 (P <0 0 5) ;但两者联合作用时有交互作用 (P <0 0 1) ,且脑内Ach含量约等于者单独作用的差值。结论 肉碱、长链脂肪醇能分别促进小鼠大脑Ach含量的增加 。

牛磺酸对半乳糖性白内障大鼠房水和晶状体游离氨基酸含量的影响

Ｗｉｓｔａｒ大鼠ｉｐ８０％半乳糖溶液并饮用１０％半乳糖诱发半乳糖性白内障，治疗组从试验的ｄ４开始结膜下注射１５％牛磺酸溶液，在试验的ｄ３，８，１４取大鼠房水，晶状体，采用高效液相色谱仪测量大鼠房水，晶状体中氨基酸含量变化，结晶显示半乳糖性白内障大鼠房水，晶状体中谷氨酸，丙氨酸，丝氨酸，谷氨酰胺，牛磺酸含量明显地下降；治疗组给予牛磺酸后，五种氨基酸的含量不同程度地升高，尤其以谷氨酸，牛磺酸含量升高最为明显．因此我们认为牛磺酸可以抑制半乳糖性白内障发病过程中游离氨基酸含量的下降．

不同时间采摘的槐角中芦丁和槐角苷的含量测定

[目的]研究槐角中芦丁和槐角苷含量与生长时间(采摘时间)的关系,确定不同应用目的槐角药材的最佳采摘时间。[方法]在2006～2008年的89、1、0月中旬分别采摘槐角样品,采用无水甲醇连续提取法提取槐角中的总黄酮,并用HPLC法测定提取物中芦丁和槐角苷含量。色谱条件:色谱柱为Diamonsil C18(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相为无水甲醇-浓度1%冰醋酸-乙腈(30.4∶64.6∶5,V/V/V);流速为1.0 ml/min;检测波长为260 nm。[结果]8月中旬采摘的槐角中芦丁的含量最高,为(0.87±0.16)%8,月中旬以后采摘的槐角中芦丁的含量逐渐降低;槐角苷在9月中旬到10月中旬达到高峰期,含量分别为(5.76±0.22)%和(5.33±0.39)%,明显高于冬季含量。[结论]槐角中芦丁和槐角苷含量具有明显的季节变化规律,而冬季恰是槐角中芦丁和槐角苷含量最低的时期。根据槐角的不同用途选择合适的采摘时间,为科学利用现有槐角资源提供一定的理论依据。

去铁疗法在实验性肝损伤中的保护作用

目的探讨去铁疗法在实验性肝损伤中的保护作用机制。方法 Wistar大鼠56只,随机分为6组:空白组、高铁组、低铁组、CCl_4组、CCl_4+高铁组和CCl_4+低铁组,复制高组铁模型、铁模型和CCl_4攻击肝损伤模型。观察各组血清铁(SI)、ALT、AST、丙二醛(MDA)、肝组织铁含量(HIC)以及病理变化。结果低铁组与空白组、CCl_4+低铁组与CCl_4+铁组比较,HIC明显降低(q_1=17.79,P<0.01;q_2=17.56,P<0.01)。CCl_4+低铁组与CCl_4+高铁组比较,ALT,MDA显著性降低(q_1=3.96,P<0.05;q_2=6.70,P<0.01)。铁在肝脏中的分布有三种类型:窦周型、血管周围型、肝细胞型,无肝损伤或轻微肝损伤时,以窦周型为主。肝损伤严重时,以血管周围型为主,并且病变周围,铁沉积增多。结论放血疗法可以减轻高铁负荷加重的实验性大鼠肝损伤。