缺氧诱导因子-1在弓形虫感染孕鼠中的表达

目的探讨缺氧诱导因子-1(hypoxia-inducible factor-1,HIF-1)在小鼠妊娠早期感染弓形虫后母胎界面的表达及可能发挥的作用。方法将20只妊娠C57BL/6小鼠(体质量为16~20 g)随机分为4组,即12 d对照组、12 d感染组和18 d对照组、18 d感染组。在小鼠孕6 d时,给予12 d感染组、18 d感染组小鼠腹腔注射弓形虫PRU株速殖子150个/只,孕12 d、孕18 d对照组孕鼠则注射等量PBS。于孕12、18 d分别处死相应对照组和感染组小鼠,取各组孕鼠胎盘和子宫组织观察其组织病理变化;采用实时荧光定量PCR(q PCR)技术检测孕鼠胎盘和子宫中HIF-1α、HIF-1β及血管内皮生长因子(VEGF)m RNA表达水平,并分析HIF-1α和VEGF m RNA表达水平的相关性。此外,设置孕12 d感染组和孕18 d感染组PBS阴性对照组,采用免疫组化染色检测孕鼠胎盘和子宫组织中HIF-1α表达水平。结果与孕12 d、孕18 d对照组相比,孕12 d、孕18 d感染组孕鼠出现畸胎、胎盘发育不良等不良妊娠结局。HE染色结果显示,与相应对照组相比,孕12 d、孕18 d感染组小鼠胎盘组织迷路区细胞分别出现肿胀和瘀血,且均出现血窦减少、炎性细胞浸润;两组小鼠子宫组织均有柱状上皮细胞损伤和炎性细胞浸润。q PCR检测结果显示,与同期对照组相比,孕12 d感染组小鼠胎盘组织中HIF-1α、HIF-1βm RNA表达水平显著上升(F=132.6、286.9,P均<0.05),子宫组织中HIF-1α、HIF-1βm RNA表达水平显著下降(F=111.5、55.2,P均<0.05);孕18 d感染组小鼠胎盘和子宫组织中HIF-1α、HIF-1βm RNA表达水平均显著下降(F=215.8、418.9、156.8、200.1,P均<0.05)。与同期对照组相比,孕12 d感染组小鼠胎盘组织中VEGF-A、VEGF-B和VEGF-C m RNA表达水平均显著下降(F=426.2、104.6、566.9,P均<0.05),子宫组织中VEGF-A、VEGF-B和VEGF-C m RNA表达水平显著上升(F=95.8、502.4、610.0,P均<0.05);孕18 d感染组小鼠胎盘组织和子宫组织中VEGF-A、VEGF-B和VEGF-C m RNA表达水平均显著上升(F=521.9、100.6、275.9、224.6、108.2、333.4,P均<0.05)。免疫组化染色结果显示,与相应对照组相比,孕12 d、孕18 d感染组小鼠胎盘迷路区HIF-1α分别呈强阳性和弱阳性表达,子宫组织中HIF-1α均不表达。结论小鼠孕早期感染弓形虫后,胎盘组织中HIF-1α表达呈现孕中期上升、孕晚期下降的趋势,且与VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C表达变化趋势相反;推测HIF-1α通过抑制VEGF表达而抑制小鼠妊娠期间胎盘血管生成,导致不良妊娠结局。