Ⅳ型高脂血症患者血清高密度脂蛋白亚类组成及含量

目的探讨Ⅳ型高脂血症患者血清高密度脂蛋白亚类含量及分布特征。方法采用双向电泳—免疫印迹检测法分析132例Ⅳ型高脂血症患者和163例正常对照者血清高密度脂蛋白亚类的组成及含量。结果与血脂正常组比较,Ⅳ型高脂血症患者血清前β1-高密度脂蛋白、高密度脂蛋白3a含量显著升高(P<0.01),而高密度脂蛋白2a、高密度脂蛋白2b含量显著降低(P<0.01)。无论是血脂正常者还是Ⅳ型高脂血症患者,女性前β1高密度脂蛋白、高密度脂蛋白3b含量均显著低于男性(P<0.05),而高密度脂蛋白2b则显著高于男性(P<0.01)。相关分析发现,Ⅳ型高脂血症患者血清甘油三酯、甘油三酯/高密度脂蛋白胆固醇比值与前β1-高密度脂蛋白、高密度脂蛋白3a含量显著正相关(P<0.01或P<0.05),与高密度脂蛋白2b、高密度脂蛋白2a含量显著负相关(P<0.01或P<0.05)。结论Ⅳ型高脂血症患者血清小颗粒高密度脂蛋白含量明显增加而大颗粒高密度脂蛋白含量明显减少,表明高密度脂蛋白成熟代谢过程受阻,胆固醇逆向转运作用减弱;此外,与男性相比,无论是血脂正常者还是Ⅳ型高脂血症患者,女性小颗粒高密度脂蛋白含量较少而大颗粒高密度脂蛋白含量较多。

基于生物信息学的ECSM2胞外区B细胞表位预测

目的预测内皮细胞特异分子-2(endothelial cell-specific molecule-2,ECSM2)胞外区B细胞表位。方法以ECSM2胞外区氨基酸序列为基础,应用公共的生物信息学工具,分析ECSM2的序列特异性、二级结构,以及极性、亲水性、柔韧性、表面可及性等参数,然后借助专业的B细胞表位预测工具预测潜在的B细胞表位,最后对获得的数据综合分析,评判ECSM2胞外区最有可能的B细胞表位。结果综合分析多种生物信息学工具获得的数据表明,ECSM2胞外区69-93位氨基酸区段包含了4个相互重叠的潜在表位,具有极大的B细胞表位可能性。结论应用生物信息学预测出的ECSM2胞外区B细胞表位,为直接利用该表位从抗体库或杂交瘤细胞库中筛选出血管内皮细胞靶向的特异抗体提供了理论依据。

血清脂蛋白胆固醇水平与HDL亚类组成的关系

目的 探讨血清 HDL- C、L DL- C水平对 HDL 亚类组成及含量的影响。方法 采用双向电泳 -免疫印迹检测法分析了 2 92例受试者血清 HDL 亚类的组成及含量。结果 随血清 HDL- C水平逐渐降低 ,preβ1 - HDL、HDL3b含量呈增加趋势 ,与高 HDL- C组比较 ,低 HDL- C组 preβ1 - HDL(P<0 .0 1)、HDL3b(P<0 .0 5 )含量显著增加 ;相反 ,HDL2 b、 HDL2 a含量呈减少趋势 ,与高 HDL - C组比较 ,中 HDL - C组及低 HDL - C组 HDL2 b、 HDL2 a含量显著减少 (P<0 .0 1)。随血清 L DL - C水平逐渐升高 ,preβ1 - HDL、HDL3C、HDL3b含量呈增加趋势 ,与正常 L DL - C组比较 ,高L DL - C组 (P<0 .0 5 )和极高 L DL - C组 (P<0 .0 1) preβ1 - HDL、HDL3b含量显著增加 ,极高 L DL - C组 HDL3C含量也显著增加 (P<0 .0 1) ;相反 ,HDL2 b含量呈减少趋势 ,与正常 L DL - C组比较 ,高 L DL - C组 (P<0 .0 5 )和极高 L DL - C组(P<0 .0 1) HDL2 b含量显著减少。结论 随血清 HDL - C水平降低或 L DL - C水平升高 ,均有小颗粒 HDL含量增加及大颗粒 HDL含量减少趋势 ,且血清 HDL - C水平与大颗粒 HDL2 a、HDL2

HDL抗动脉粥样硬化的作用

高密度脂蛋白(HDL)逆向转运胆固醇并以此发挥其经典的抗动脉粥样硬化(AS)作用。除此之外,HDL还具有保护内皮细胞、抑制白细胞粘附、调节血凝与纤溶、抑制血小板聚集与活化、抗脂质氧化等生物学活性,且HDL还可通过胆固醇逆向转运作用以外的多种途径发挥抗AS作用。

抗体库技术与策略进展

抗体库为基因工程抗体领域带来了革命性的突破,其技术核心是将抗体的表型与基因型偶联,从抗体库中找到针对特异抗原的抗体基因。抗体库的基因可来自免疫或非免疫的策略;抗体分子形式包括Fab、单链抗体、单域抗体、微型抗体、最小识别单位等;展示平台包括噬菌体、核糖体、酵母、细菌、杆状病毒、哺乳细胞等;筛选策略包括抗原、细胞、组织切片、体内筛选等。抗体库在操作上具有高通量、工程化的特点,便于实现产业化,显示出巨大的商业开发价值。

用于重组蛋白生产的哺乳动物细胞表达新技术

近年来,用于重组蛋白生产的哺乳动物细胞表达领域涌现出一系列革命性的新技术。优化的工程细胞为表达重组蛋白提供了优良的宿主;基于荧光的筛选方法可以快捷地得到高表达细胞株;高通量的培养工艺能够预测适合外源蛋白表达的细胞培养条件;可抛弃式生物反应器为大规模细胞培养提供了更多的选择;大规模瞬时表达技术节省了重组蛋白的生产时间。这些新技术提高了重组蛋白的研发和生产效率,加快了蛋白药物的工业化进程。

血清总胆固醇、甘油三酯与高密度脂蛋白胆固醇比值同高密度脂蛋白亚类组成关系的研究

目的:探讨血清总胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇(TC/HDL-C)、甘油三酯/高密度脂蛋白胆固醇(TG/HDL-C)比值与高密度脂蛋白(HDL)亚类组成及含量关系。方法:采用双向电泳-免疫印迹检测法分析了292例受试者血清HDL亚类的组成及含量。结果:随血清TC/HDL-C比值增大,preβ1-HDL、HDL3a含量升高,HDL2b、HDL2a含量降低。preβ1-HDL(P<0.01,高比值组及中间组)、HDL3a(P<0.05,高比值组)含量显著高于低比值组,而HDL2b(P<0.01,高比值组及中间组)、HDL2a(P<0.01,高比值组)含量显著低于低比值组;此外,高比值组preβ1-HDL、HDL3a含量显著高于中间组(P<0.01,P<0.05),而HDL2a、HDL2b含量显著低于中间组(P<0.01,P<0.01)。随血清TG/HDL-C比值增大,preβ1-HDL、HDL3a含量升高,HDL2b、HDL2a含量降低。preβ1-HDL、HDL3a(P<0.01,P<0.05,高比值组)含量显著高于低比值组,而HDL2b、HDL2a(P<0.01,P<0.01,高比值组及中间组)含量显著低于低比值组;此外,高比值组preβ1-HDL、HDL3a含量显著高于中间组(P<0.01,P<0.05),而HDL2a、HDL2b含量显著低于中间组(P<0.01,P<0.01)。相关分析发现,血清TC、TG、TC/HDL-C、TG/HDL-C与小颗粒preβ1-HDL含量呈显著正相关(P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01),与大颗粒HDL2b含量呈显著负相关(P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.01);HDL-C与小颗粒preβ1-HDL含量呈显著负相关(P<0.05),与大颗粒HDL2b含量呈显著正相关(P<0.01)。结论:血清TC/HDL-C>5或TG/HDL-C>2.2时,小颗粒HDL含量明显增加而大颗粒HDL含量明显减少,表明HDL成熟代谢过程受阻,胆固醇逆向转运作用减弱。

高脂血症高密度脂蛋白亚类分布与Apo A-Ⅰ基因多态性的关系

目的:探讨高脂血症患者高密度脂蛋白(HDL)亚类分布与载脂蛋白A-Ⅰ(Apo A-Ⅰ)基因多态性的关系。方法:采用聚合酶链反应(PCR)-限制性片段长度多态性(RFLP)和双向电泳-免疫印迹检测法,分析比较118例高脂血症患者和109例血脂正常者的Apo A-Ⅰ基因型、HDL各亚类分布及相对含量。结果:Apo A-Ⅰ基因-78bp位点和+83bp位点的多态性分别以G/G和C/C基因型占优势,其中-78bp位点高脂血症组A等位基因的频率显著高于对照组(P<0·05)。高脂血症患者中,G/A突变受试者血清TG、Apo C-Ⅲ、preβ1-HDL及HDL3a水平显著高于,而HDL2a和HDL2b水平则显著低于G/G基因型者。结论:高脂血症Apo A-Ⅰ基因-78bp位点G/A突变与HDL亚类分布相关,G/A突变受试者血清HDL亚类颗粒呈减小的趋势,提示HDL成熟代谢可能受阻。

血清甘油三酯含量与HDL亚类组成的关系

目的探讨血TG含量对HDL亚类组成及含量的影响。方法采用双向电泳-免疫印迹检测法按血清TG含量分层,分析了106例TC正常及147例高TC受试者血清HDL亚类组成及含量。结果无论TC正常或高TC人群,血清小颗粒的per-β1-HDL含量在TG边缘性高(TC正常人群除外)、高TG以及TG极高亚组显著高于相应TG正常组(P<0.05及P<0.01),而且颗粒较小的HDL3b及HDL3a含量也有相似的变化,其中高TG人群HDL3b在TG极高组,HDL3a在TG升高的各亚组均显著高于TG正常亚组(P<0.05及P<0.01);与此相反,大颗粒的HDL2b在高TG组和TG极高组显著少于相应的TG正常亚组(p<0.05),HDL2a也在高TC人群的TG极高组显著少于TG正常亚组(P<0.05)。此外,与TC正常的相应亚组比较,高TC人群的per-β1-HDL(TG边缘性高亚组)及HDL3b(TG极高亚组)显著高于TC正常人群的相应亚组(P<0.05及P<0.01)。结论随着TG、TC水平的升高,血清HDL颗粒呈变小趋势;TG、TC含量变化是影响HDL亚类组成的重要因素。

糠秕马拉色菌酵母态和菌丝态蛋白差异表达的研究

目的通过双向电泳及串联质谱技术鉴定糠秕马拉色菌酵母态及菌丝态差异蛋白,在蛋白水平探讨两态转化机制及致病机理。方法分别诱导糠秕马拉色菌标准株酵母态和菌丝态菌体,利用玻璃珠研磨和超声波破碎细胞壁,三氯乙酸/丙酮沉淀获取总蛋白。双向电泳分离蛋白,PDQuest软件比对找出差异蛋白点。电喷雾串联质谱对差异点进行肽段测序,用Mascot和NCBI的Blast软件经蛋白质数据库鉴定蛋白质。结果经双向电泳分离的糠秕马拉色菌酵母态、菌丝态蛋白各有800多个蛋白点、64个蛋白点表达量有3倍以上差异,其中11个为酵母态特有,9个菌丝态特有。在选取的40个差异点中,成功鉴定出22个点,共16个蛋白。经Mascot和Blast软件检索,有明确功能的蛋白中,肌动蛋白、丝切蛋白等9个蛋白在菌丝态上调,谷胱甘肽转移酶、细胞支架信号蛋白等5个蛋白下调。结论鉴定出16个蛋白分别与细胞代谢、运动、氧化应激等功能相关,为了解糠秕马拉色菌表型转换机制和致病机理提供重要信息。

动脉粥样硬化低危与高危人群血清高密度脂蛋白亚类组成差异的研究

目的 :研究动脉粥样硬化 (AS)低危与高危人群血清高密度脂蛋白 (HDL)亚类组成及含量的差异。方法 :采用双向电泳 免疫印迹检测法分析了 2 92例受试者血清HDL亚类的组成及含量。结果 :与AS低危组比较 ,中间组前 β1 HDL和前 β2 HDL(P <0 .0 1 )以及HDL3a(P <0 .0 5 )含量显著增加 ,AS高危组前 β1 HDL、前 β2 HDL、HDL3b、HDL3a含量显著增加 (P <0 .0 1 ) ;AS高危组与中间组比较 ,前β1 HDL、HDL3a含量显著增加 (P <0 .0 1 )。与AS低危组比较 ,中间组HDL2b含量显著减少 (P <0 .0 1 ) ,AS高危组HDL2a、HDL2b含量显著减少(P <0 .0 1 ) ;AS高危组与中间组比较 ,HDL2a(P <0 .0 5 )、HDL2b(P <0 .0 1 )含量显著减少。结论 :AS高危人群HDL颗粒明显变小 ,其成熟过程受阻 ,维持HDL亚类组成及含量的合理分布 。

治疗性单克隆抗体技术

近20年来，治疗性单克隆抗体已经成为重要的生物技术药物，具有极大的开发应用价值。目前治疗性单克隆抗体的研发技术主要有转基因小鼠、鼠源抗体改造、抗体库、杂交瘤、B细胞永生化，以及B细胞移植等平台。这些技术平台发展迅速、各具特色，为治疗性单克隆抗体的开发提供了丰富多样的研究策略。