肉桂油对SAMP8小鼠记忆能力的改善作用

目的探讨肉桂油对SAMP8小鼠记忆能力的改善作用。方法小鼠灌胃给予高、低剂量肉桂油(100、25 mg/kg)8周,采用Morris水迷宫检测定位航行、空间探索能力,免疫印迹法检测大脑颞叶皮质LC3BⅡ蛋白、磷酸化Tau蛋白表达,银染法检测神经纤维缠结,在透射电镜下观察神经细胞内自噬小体。结果与模型组比较,肉桂油各剂量组小鼠神经细胞Tau蛋白磷酸化水平降低,LC3BⅡ蛋白与神经细胞内自噬小体数量增加,神经纤维缠结减少,定位航行与空间探索能力提升(P<0.05,P<0.01)。结论肉桂油可改善SAMP8小鼠记忆能力,其机制可能与增强神经细胞自噬,清除磷酸化Tau蛋白,从而减少神经纤维缠结有关。

五味藤茎皮高效液相色谱指纹图谱及数据挖掘研究

目的建立五味藤茎皮的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。方法采用HPLC法,色谱柱为Shim-pack VP-ODS柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为327 nm(0~45 min)和260 nm(45~105 min),柱温为25℃,进样量为10μL。以1,7-二羟基?酮峰为参照峰,测定13批药材样品的HPLC指纹图谱,采用中药指纹图谱相似度评价系统(2012版)进行共有峰确定和相似度评价;并进行聚类分析和主成分分析。结果13批药材样品的HPLC图谱有10个共有峰,相似度为0.951~0.997。聚类分析和主成分分析结果显示,样品可分为两大类,主要区别在于贮存时间以4年为限,原因可能与购买和贮存时间有关。结论该指纹图谱及聚类分析和主成分分析结果,可为进一步科学评价五味藤茎皮质量提供参考。

复方扶芳藤合剂对D-半乳糖联合AlCl3所致痴呆小鼠学习记忆改善作用研究

目的:探讨复方扶芳藤合剂(FFH)对D-半乳糖和AlCl3所致痴呆小鼠学习记忆的改善作用。方法:将昆明种60只小鼠分为正常对照组、模型对照组、石杉碱甲组和复方扶芳藤合剂高剂量组(9.00 g·kg^-1)、中剂量组(4.50 g·kg^-1)、低剂量组(2.25 g·kg^-1),每组10只。采用D-半乳糖和AlCl3建立老年痴呆小鼠模型。给药后采用Morris水迷宫方法对小鼠学习及记忆行为进行检测;ELISA法检测小鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)及脑组织内乙酰胆碱转移酶(ChAT);采用化学法测定丙二醛(MDA)含量、乙酰胆碱(Ach)及乙酰胆碱酯酶(AchE)含量。结果:与模型对照组比较,FFH高剂量组(9 g·kg^-1)及中剂量组(4.5 g·kg^-1)的逃避潜伏期、寻求次数与平均停留时间明显缩短;FFH能显著升高SOD、GSH-PX、Ach及ChAT含量,降低MDA及AchE酶含量。结论:FFH具有改善老年痴呆小鼠学习记忆能力的作用,与其抗氧化作用及影响胆碱能神经递质传导有关。

平性药桃仁对寒热不同血瘀证大鼠cAMP-PKA信号通路的影响

目的:观察平性药桃仁对瘀热互结和寒凝血瘀两种证型大鼠cAMP-PKA信号通路的影响,探讨其双向适用的作用机理。方法:60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、桃仁组、丹参组、川芎组,每组12只。各中药组灌胃给予相应药液,正常对照组和模型组灌胃给水,2次/d,每次20 mL/kg,连续7 d。瘀热互结证和寒凝血瘀证分2次进行实验。瘀热互结证除正常对照组外,其余各组大鼠先经腹腔注射10%角叉菜胶5 mL/kg,1次/d,连续给药3d;末次注射角叉菜胶24 h后,再于大鼠皮下注射20%干酵母悬液10 mL/kg造成瘀热互结证大鼠模型。寒凝血瘀证除正常对照组外,其余各组大鼠置于特制鼠笼内,然后置于-(18±2)℃冰柜,2 h/次,2次/d,连续7 d,造成寒凝血瘀证大鼠模型。瘀热互结证和寒凝血瘀证分别于末次造模后6、12 h,腹主动脉取血5 mL和并取腹主动脉。采用Elisa法检测血浆中cAMP浓度采用Westernblot法检测腹主动脉PKA蛋白表达。结果:平性药桃仁在瘀热互结证中能降低瘀热互结证大鼠血浆cAMP浓度(P<0.01),抑制PKA蛋白表达(P<0.05);在寒凝血瘀证中能升高寒凝血瘀证大鼠血浆cAMP浓度(P<0.01),增强PKA蛋白表达(P<0.01),对cAMP-PKA信号通路具有双向调节的作用。结论:平性药桃仁在瘀热互结证和寒凝血瘀证两种不同的内环境下,通过对cAMP-PKA信号通路抑制和增强的双向调节作用,以实现对以上寒、热两种证型的双向适用。

中医瘀热互结证大鼠模型的建立及评价

目的探索建立符合中医学理论特点的瘀热互结证大鼠模型。方法 30只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组及丹参组,每组10只。丹参组给予丹参水煎液13.5g/kg灌胃,灌胃体积20mL/kg;正常组和模型组给予相同体积纯净水灌胃。均每天2次,连续7天。给药第4天,模型组及丹参组大鼠腹腔注射角叉菜胶50mg/kg,每天1次,连续3天。末次注射24h后,于大鼠背部皮下注射20%干酵母悬液(10mL/kg),6h后观察大鼠体温、舌象、尾部瘀斑、耳廓和四肢皮肤颜色等表征以及耳廓微循环、血液流变学相关指标。结果与正常组比较,模型组大鼠出现舌质红紫,舌下脉络增粗增长,爪甲色红紫,耳廓边缘发红,尾部出现明显瘀斑(P<0.01),体温明显升高(P<0.01)等瘀热表征;耳廓微血流速度明显减慢,全血高、中、低切黏度,红细胞压积及红细胞电泳时间明显增加,红细胞变形指数明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,丹参组大鼠尾部瘀斑长度明显减少,微血流流态评分明显升高,全血高、中、低切黏度,红细胞压积及红细胞电泳时间明显减少,红细胞变形指数明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论采用联合注射角叉菜胶和活性干酵母方法建立的瘀热互结证大鼠模型具有动物表征明显以及重现性、稳定性好等特点,可用于瘀热互结证的中医基础理论、中药药效筛选以及中药药性理论等多方面的研究。

绞股蓝正丁醇提取物对快速老化小鼠Aβ蛋白的影响

目的探讨壮药绞股蓝Gynostemma pentaphyllum正丁醇提取物对快速老化SAMP8小鼠淀粉样蛋白(Aβ蛋白)的影响。方法 50只快速老化SAMP8小鼠随机分为模型组、石杉碱甲组[0.15 mg/(kg·d)]和绞股蓝正丁醇提取物高、中、低剂量组[500、250、125 mg/(kg·d)],10只正常老化SAMR1小鼠为正常对照组。灌胃给药8周后,取小鼠血清和脑匀浆,以ELISA法检测其Aβ蛋白的水平,RT-PCR和免疫组织化学法检测App基因和APP蛋白的表达。结果与模型组比较,绞股蓝正丁醇提取物给药组小鼠脑组织中的APP基因表达和蛋白表达明显下调,血清和脑组织中的Aβ蛋白水平显著降低。结论绞股蓝正丁醇提取物可通过抑制APP蛋白的生成,使Aβ蛋白的表达减少,从而起到防治阿尔茨海默症(AD)的作用。

不同剂量内毒素诱导瘀热互结证大鼠血液流变学指标的动态观察

目的:探讨不同剂量内毒素诱导的瘀热互结证大鼠模型血液流变学指标的动态变化规律,为研究该模型的生物学基础及药物干预机制提供参考。方法:100只大鼠随机分为模型组(n=80)和正常组(n=20),模型组又按200,100,50,20μg.kg-14个剂量,每个剂量0.5,3,6,12 h 4个时间点,随机分为16组,每组5只大鼠。各剂量分次进行实验,每次实验均设正常组5只大鼠。除正常组外,其余各组大鼠均经尾静脉注射1次相应剂量的内毒素(2 mL.kg-1),大鼠自由饮水、进食。于注射内毒素后各时间点,腹主动脉取血5 mL,进行血液流变学测定。结果:与相应正常组比较,200μg.kg-1剂量的3 h组、6 h组、12 h组,100μg.kg-1剂量的6 h组、12 h组,50μg.kg-1剂量的0.5 h组、3 h组、6 h组、12 h组全血高、中、低切黏度,以及红细胞压积、红细胞电泳时间、卡松屈服应力等指标明显降低(P<0.05或P<0.01);凝血功能检测显示,内毒素不同剂量组大鼠血液呈现低凝溶解状态。结论:不同剂量内毒素诱导建立的瘀热互结证大鼠模型的血液流变学指标均呈低黏、低浓、低聚、低凝状态,研究结果在一定程度上反映了内毒素诱导建立的瘀热互结证大鼠模型血液流变学特征,为该模型的建立方法和条件及药物干预机制提供参考。

广西莪术不同炮制品挥发油成分分析

目的:探讨广西莪术不同炮制品的质量。方法:采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,用毛细管柱色谱法进行分析,归一化法测定其相对含量,并用GC-MS法鉴定化学成分。结果:6个样品挥发油中共鉴定出33种化学成分,主要成分为1-乙烯基-1-甲基-2,4-二(1-丙烯基)环己烷、6-乙烯基-4,5,6,7-四氢-3,6-二甲基-5-异丙烯基-香豆酮等。结论:6个莪术样品质量均有显著差异,其中以醋煮品的挥发油含量为最高。

龙眼肉水提物对小鼠抗疲劳及耐缺氧作用实验研究

目的:探讨龙眼肉水提物对小鼠抗疲劳及耐缺氧作用的实验研究。方法:选取50只小鼠随机分为5组:正常对照组、红景天胶囊(600 mg·kg^-1)、龙眼肉水提物高(9 g·kg^-1)、中(4.5 g·kg^-1)、低(2.25 g·kg^-1)剂量组,灌胃30 d后采用耐缺氧实验和负重游泳实验,观察龙眼肉水提物对小鼠抗疲劳及耐缺氧作用。通过检测血清的超氧化歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性及丙二醛(malefic dialdehyde,MDA)含量、血尿素氮(BUN)、血清乳酸(BLA)和乳酸脱氢酶(LDH)测定肝糖原水平,探讨其可能机制。结果:龙眼肉水提物可以明显降低小鼠体重增长率,延长常压缺氧条件下小鼠存活时间和负重游泳时间;龙眼肉水提物能够提高肝糖原储备量,降低小鼠游泳后血尿素氮和血乳酸水平,增强小鼠血清SOD活性,降低MDA含量。结论:龙眼肉水提物具有明显的抗疲劳和耐缺氧作用。

广西部分特色壮药药理与毒理研究概况

查阅近15年国内研究文献,对壮药的毒理试验和药理作用的研究现状进行综述,以期为壮药的研究和临床应用提供参考。

乌头碱抑制GSK-3β对抗β淀粉样蛋白诱导的神经细胞损伤

本研究旨在探讨乌头碱抑制糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)对抗β淀粉样蛋白片段1-40(Aβ_(1-40))诱导的神经细胞损伤的药理作用。基于细胞安全性测试设置5 nmol/L为后续实验的乌头碱适宜浓度。以20μmol/L的Aβ1-40孵育24 h建立SH-SY5Y神经细胞损伤细胞模型。设置3个实验分组:正常对照组、Aβ_(1-40)细胞损伤模型对照组、乌头碱干预组,后者以5 nmol/L的乌头碱预孵育12 h。ELISA检测细胞培养上清液乳酸脱氢酶(LDH),流式细胞术分析细胞凋亡与坏死,Western blotting检测细胞GSK-3β磷酸化水平。结果显示,乌头碱干预组细胞培养上清液LDH水平、细胞凋亡率与坏死率以及细胞的GSK-3β磷酸化水平均显著低于模型对照组,提示乌头碱可显著减轻Aβ1-40导致的细胞损伤,此作用可能与其抑制GSK-3β过磷酸化有关。

平性活血化瘀药对寒、热2种血瘀证双向适用的实验研究Ⅱ

目的:通过观察10味平性活血化瘀中药对瘀热互结证和寒凝血瘀证大鼠血液流变学指标的作用特点,进一步探讨平性药"双向适用,条件显性"的药性特征。方法:分别采用角叉菜胶和干酵母联合造模的方法建立瘀热互结证大鼠模型和采用全身冷冻法建立寒凝血瘀证大鼠模型,并用10味平性药、5味热性药、5味寒性药进行干预,观察各组大鼠全血黏度、血浆黏度、红细胞压积等指标的变化情况,对比分析平性药的作用特点。结果:方差分析结果表明:10味平性药中,蒲黄、肿节风、苏木等6味药物均能明显改善寒、热2种血瘀证大鼠血液流变学指标;5味寒性药中丹参、益母草、大黄均能明显改善瘀热互结证大鼠血液流变学指标(P<0.01或P<0.05),仅丹参能够显著改善寒凝血瘀证大鼠血液流变学指标(P<0.05);5味热性药中红花、三七能够显著改善瘀热互结证大鼠血液流变学指标,5味药物均能显著改善寒凝血瘀证大鼠血液流变学指标(P<0.01)。血液平均高切黏度分析表明:在瘀热互结证中平性药与寒性药作用特点类似,在降低全血黏度方面优于热性药;在寒凝血瘀证中平性药与热性药类似,在降低全血黏度方面优于寒性药。结论:在改善瘀热互结证大鼠血液流变学方面,平性药表现出类似寒性药的作用特征,在改善寒凝血瘀证大鼠血液流变学方面,平性药显示出类似热性药的作用特征,在一定程度上表明平性药在寒证和热证不同的条件下,显示出了双向适用的药性特征。

平性活血化瘀药对寒、热2种血瘀证双向适用的实验研究Ⅰ

目的:通过观察10味平性活血化瘀中药对瘀热互结证和寒凝血瘀证大鼠微循环的作用特点,以探讨平性药"双向适用,条件显性"的药性特征。方法:分别采用角叉菜胶和干酵母联合造模的方法建立瘀热互结证大鼠模型和采用全身冷冻法建立寒凝血瘀证大鼠模型,并用10味平性药、5味热性药、5味寒性药进行干预,观察各组大鼠耳廓血液流速和流态指标,对比分析平性药的作用特点。结果:方差分析结果表明,10味平性药中,蒲黄、苏木、王不留行等6味药物对寒、热2种血瘀证均能明显升高血液流速(P<0.01或P<0.05);5味寒性药对瘀热互结证均有明显的升高血液流速作用(P<0.01或P<0.05),仅丹参对寒凝血瘀证有一定的升高作用(P<0.05),其他药物没有明显改善作用;5味热性药中红花、川芎对寒凝血瘀证有明显的升高血液流速的作用(P<0.01或P<0.05),对瘀热互结证均没有明显改善作用。血液平均流速分析表明,在瘀热互结证中平性药与寒性药作用特点类似,在升高流速方面优于热性药;在寒凝血瘀证中平性药与热性药类似,在升高流速方面优于寒性药。结论:在瘀热互结证条件下,平性药表现出类似寒性药的作用特点,在寒凝血瘀证条件下,平性药显示出类似热性药的作用特点,在一定程度上表明平性药显示出了"双向适用,条件显性"的药性特征。

平性药桃仁双向适用药性特征的研究

目的:通过观察平性药桃仁对瘀热互结证和寒凝血瘀证模型大鼠中医表征及血液流变学指标的影响,初步探讨平性药桃仁的药性特征。方法:采用注射酵母菌及角叉菜胶的方法制备瘀热互结证大鼠模型,冰柜连续冷冻法复制寒凝血瘀证大鼠模型;用平性药桃仁进行干预,同时以寒性药益母草、温性药川芎为对照药,观察各组大鼠中医表征及血液流变学指标的变化。结果:对瘀热互结证大鼠模型的影响:与正常组比较,模型组大鼠出现明显的"瘀热"表征,全血粘度、红细胞压积、红细胞电泳时间、卡松屈服应力等指标明显升高,红细胞变形指数明显降低;与模型组比较,桃仁和益母草能明显改善模型大鼠的"瘀热"表征,以及血液流变学各项指标,川芎对上述表征和血液流变学指标没有明显的改善作用。对寒凝血瘀证大鼠模型的影响:与正常组比较,模型组大鼠出现明显的"寒瘀"表征;全血粘度、红细胞压积、血沉方程K值、红细胞电泳时间、卡松曲服应力等指标明显升高。与模型组比较,桃仁和川芎能明显改善寒凝血瘀证大鼠的"寒瘀"表征,改善血液流变学各项指标,益母草对上述表征和血液流变学指标没有明显的改善作用。结论:作用于瘀热互结证,平性药桃仁表现出类似寒性药益母草的作用特征;作用于寒凝血瘀证,平性药桃仁表现出类似温性药川芎的作用特征,初步证明了平性药桃仁双向适用的药性特征。

间断注射小剂量脂多糖建立大鼠的慢性炎症模型

目的探讨小剂量脂多糖(LPS)间断注射建立大鼠慢性炎症模型的可行性。方法将40只SD大鼠随机均分为对照组与LPS处理1、2、3、4周组。除对照组外的各组大鼠尾静脉注射LPS(0.2 mg·kg-1·w-1),对照组注射等体积生理盐水。观察各组大鼠存活情况,检测血白细胞计数与分类、血清白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、超敏C反应蛋白(hs-CRP),以及心、肝、肺、肾HE染色镜检。结果大鼠全部存活。尾静脉注射LPS后大鼠血白细胞总数、中性粒细胞比例及血清IL-6、TNF-α、hs-CRP水平均增高,淋巴细胞比例降低,心、肝、肺、肾出现以炎性细胞浸润、组织淤血水肿为主的病理变化。结论 SD大鼠小剂量间断尾静脉注射LPS可诱导典型慢性炎症,可供LPS相关慢性炎症的长期研究之用。

芒果苷对脂多糖诱导慢性炎症的抗炎作用

目的:探讨芒果苷对脂多糖(LPS)诱导慢性炎症的抗炎作用及其机制。方法:90只SD大鼠随机分为正常组、模型组、泼尼松5 mg/kg组与芒果苷200、100、50 mg/kg组。以LPS间断尾静脉注射建立慢性炎症模型,进行大鼠全血白细胞计数,ELISA测定血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1),RT-PCR检测白细胞核转录因子κB(NF-κB)基因表达。结果:与模型组比较,芒果苷200 mg/kg组全血白细胞总数与血清hs-CRP、TNF-α、IL-6、sICAM-1水平明显降低(P<0.05),白细胞NF-κB基因表达下调(P<0.05)。结论:芒果苷可显著抑制LPS诱导的慢性炎症,其作用机制与其下调白细胞NF-κB基因表达而降低炎症因子水平有关。

青藤碱增加配对免疫球蛋白受体B表达抑制巨噬细胞经典活化

本研究以体外实验探讨青藤碱通过上调配对免疫球蛋白样受体B(paired immunoglobulin-like receptor B,PIR-B)的表达水平而抑制巨噬细胞的经典活化。以脂多糖与γ干扰素联合刺激建立巨噬细胞经典活化细胞模型。分别以实时荧光逆转录-聚合酶链反应与蛋白免疫印迹方法检测细胞PIR-B的基因与蛋白表达,以酶联免疫吸附测定法检测培养上清液肿瘤坏死因子α与白细胞介素8,流式细胞术检测M1巨噬细胞,激光扫描共聚焦显微镜观察PIR-B原位表达。结果显示,青藤碱显著增加PIR-B表达,明显减少M1巨噬细胞百分比,降低培养上清液肿瘤坏死因子α、白细胞介素8水平。以上结果提示,青藤碱可显著抑制巨噬细胞经典活化,其机制可能与其增加巨噬细胞的PIR-B表达有关,此药理作用有助于解释青藤碱治疗类风湿性关节炎的药效机制。

10味平性活血药“双向适用”药效学试验的贝叶斯分析

目的:对已获得的药效学试验数据进行挖掘和分析,验证平性活血药"双向适用"的药性特征。方法:采用Weka3.6.2软件进行贝叶斯分析,按数据预处理、属性选择、建立相关贝叶斯网络模型、分类预测的步骤进行数据挖掘与分析。结果:在瘀热互结证中,3类药性中药组与模型组分类,AUC大小顺序为平性药>寒性药>热性药;在寒凝血瘀证中,3类药性中药组与模型组分类,AUC大小依次为热性药>平性药>寒性药。结论:对瘀热互结证,平性活血药与寒性活血药具有类似治疗效果;对寒凝血瘀证,平性活血药与热性活血药具有类似治疗效果;在一定程度上证明平性药具有"双向适用"的药性特征。

亮叶杨桐总黄酮抑制胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞信号转导抑制因子3和抵抗素的过表达

目的:探讨亮叶杨桐总黄酮对高糖高脂膳食诱导的胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞细胞信号转导抑制因子3(SOCS-3)和抵抗素过表达的抑制作用。方法:大鼠随机分为正常对照组、模型对照组和亮叶杨桐总黄酮400、200、100 mg·kg^(-1)·d^(-1)组,首先以高糖高脂膳食饲喂8周建立胰岛素抵抗大鼠模型,随后灌胃给药并继续高糖高脂膳食饲喂4周。于第12周末检测大鼠空腹血糖、胰岛素与抵抗素水平,计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IRI)的自然对数值,分别以实时荧光RT-PCR与流式细胞术检测脂肪细胞SOCS-3、抵抗素的表达。结果:与正常对照组比较,模型组脂肪细胞SOCS-3、抵抗素过表达,伴空腹血糖、胰岛素与抵抗素水平明显升高。与模型组比较,400,200 mg·kg^(-1)·d^(-1)亮叶杨桐总黄酮组的脂肪细胞SOCS-3、抵抗素表达水平显著下调,伴空腹血糖、胰岛素与抵抗素水平明显降低。结论:亮叶杨桐总黄酮可抑制胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞SOCS-3和抵抗素过表达,从而降低空腹血糖、胰岛素与抵抗素水平。