黑顶黄堇化学成分及其Cdc25A/Cdc25B酶抑制活性

目的研究黑顶黄堇Corydalis nigro-apiculata C.Y.Wu化学成分及其Cdc25A/Cdc25B酶抑制活性。方法黑顶黄堇95%乙醇提取物采用硅胶柱、Sephadex LH-20、半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用全自动多功能酶标仪测定不同极性部位提取物对组蛋白磷酸化酶Cdc25A/Cdc25B的抑制效果。结果从中分离得到16个化合物,分别鉴定为mucroniferanine A(1)、mucroniferanine C(2)、mucroniferanine D(3)、mucroniferanine F(4)、山缘草定碱(5)、山缘草碱(6)、二氢血根碱(7)、6-甲氧基二氢血根碱(8)、血根碱(9)、乙氧基血根碱(10)、黄连碱(11)、原阿片碱(12)、巴马亭(13)、紫堇碱(14)、hendersine B methyl ester(15)、tomentelline C(16)。黑顶黄堇氯仿部位、正丁醇部位和水相萃取部位对于Cdc25A酶和Cdc25B酶均存在较好的抑制效果,其中正丁醇和水部位最为显著。结论化合物1~16均为首次从该植物中分离得到,该药材氯仿部位及正丁醇部位对组蛋白磷酸化酶Cdc25A/Cdc25B具有抑制效果。

藏药蓝侧金盏花的挥发油成分分析及其抑菌活性研究

采用水蒸气蒸馏法获得藏药蓝侧金盏花的挥发油,对其进行GC-MS分析,并运用滤纸片扩散法初步研究了该挥发油的抑菌活性。结果表明:对蓝侧金盏花挥发油GC-MS分析得到34种匹配度均在85%以上的化学成分,占总离子峰相对含量的64.17%,其主要成分包括蒈烯(9.70%)、α蒎烯(5.70%)和红没药醇(4.82%)。纸片扩散法测试藏药蓝侧金盏花挥发油对7种革兰氏阴性菌和1种革兰氏阳性菌有较好的抑制活性,对3种供试真菌无抑制作用。

大孔树脂法分离纯化塞北紫堇总生物碱的工艺研究

目的研究大孔树脂分离纯化塞北紫堇总生物碱的工艺条件.方法以盐酸小檗碱为对照品,采用酸性染料比色法,分别考察总生物碱在5种类型的大孔树脂(AB-8、NKA-9、LKY131、HP20、PHD400A)上的吸附和解吸附行为,同时分析了上样液浓度、洗脱液浓度和洗脱量、洗脱流速等参数对分离的影响.结果所比较的5种树脂中,AB-8型大孔树脂对总生物碱分离纯化效果最好,富集能力强,较优富集工艺为:2.0mg/ml上样液浓度、9倍量70%浓度的乙醇溶液洗脱、洗脱流速为2.0ml/min,最大吸附量为160mg/g.结论使用AB-8型大孔树脂对塞北紫堇总生物碱具有较好的纯化作用,可使其纯度提高16.6%.

塞北紫堇提取物脂溶性成分的GC-MS分析

目的采用气相色谱-质谱法(GC-MS)研究藏药塞北紫堇提取物中的脂溶性化学成分.方法选用乙醇冷浸法提取.提取物经酸溶解,调节至碱性后用石油醚萃取,浓缩后得塞北紫堇脂溶性成分.经GC-MS联用技术对脂溶性成分进行分析鉴定,采用色谱峰面积归一化法计算各脂溶性成分的含量.结果共鉴定出38个挥发性成分,化合物类型为甾醇类、甾酮类、多不饱和脂肪酸类、脂肪酸酯类、有机胺类、酰胺类及含氧杂环类化合物.结论塞北紫堇提取物脂溶性主要成分为棕榈酸,棕榈酸乙酯,9,12,15-十八烷三烯酸甲酯,二十烷,亚油酸乙酯,二氢猕猴桃内酯,6,7-二甲氧基-1(3H)-异苯并呋喃酮,亚油酸甲酯,9,12,15-十八碳三烯酸,十七烷酸-14-甲基-甲酯,豆甾-7-烯-3-醇.实验结果为了解塞北紫堇的物质基础和进一步开发研究提供了一定的科学依据.

藏药麻花秦艽不同部位醇提物的抗炎作用研究

目的:观察藏药麻花秦艽不同部位醇提物的抗炎作用。方法:72只雄性SPF级昆明种小鼠随机分为模型组[等体积0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液]、醋酸泼尼松组(10 mg/kg)及麻花秦艽地上部位醇提物低、高剂量组(10、30 g/kg)与麻花秦艽地下部位醇提物低、高剂量组(10、30 g/kg),每组12只;灌胃给药,每天2次,连续6次;末次给药40 min后于小鼠右耳廓正反两面均匀涂抹二甲苯(0.05 mL)以建立耳肿胀模型,考察各组小鼠的耳肿胀度,并计算耳肿胀抑制率。分组同上;灌胃给药,每天2次,连续5次;末次给药40 min后于小鼠右足皮下注射1%角叉菜胶0.9%氯化钠溶液(0.05 mL)以建立足肿胀模型,考察各组小鼠的足肿胀度,并计算足肿胀抑制率。无菌条件下将灭菌棉球植于小鼠鼠蹊部皮下以建立肉芽肿模型;分组同上,建模24 h后灌胃给药,每天1次,连续10次;末次给药24 h后剥离棉球,考察各组小鼠的肉芽肿胀度,并计算肉芽肿胀抑制率。84只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(等体积0.5%CMC-Na溶液)、模型组(等体积0.5%CMC-Na溶液)、醋酸泼尼松组(7 mg/kg)及麻花秦艽地上部位醇提物低、高剂量组(7、21 g/kg)与麻花秦艽地下部位醇提物低、高剂量组(7、21 g/kg),每组12只;灌胃给药,每天1次,连续30次;灌胃给药4次后于大鼠右后足皮下注射完全弗氏佐剂(0.1 mL)以建立关节炎模型;建模18 h后,考察各组大鼠的足肿胀度,并计算足肿胀抑制率,建模20 d后进行大鼠全身关节病变评分,末次给药24 h后称定大鼠胸腺、脾、肾上腺质量和体质量并计算相应脏器指数。结果:与模型组比较,醋酸泼尼松组、麻花秦艽地上部位醇提物高剂量组和麻花秦艽地下部位醇提物低、高剂量组小鼠耳肿胀度均显著降低(P<0.05或P<0.01),耳肿胀抑制率分别为67.12%、27.39%、19.86%、54.79%;麻花秦艽地下部位醇提物低、高剂量组小鼠足肿胀度均显著降低(P<0.01),足肿胀抑制率分别为34.63%、46.07%;醋酸泼尼松组、麻花秦艽地上、地下部位醇提物低、高剂量组小鼠肉芽肿胀度均显著降低(P<0.05或P<0.01),肉芽肿胀抑制率分别为42.52%、14.02%、23.36%、21.50%、35.58%;醋酸泼尼松组和麻花秦艽地上、地下部位醇提物高剂量组大鼠关节肿胀度均显著降低,全身关节病变评分均显著降低(P<0.05或P<0.01)。与正常对照组比较,模型组大鼠胸腺、脾脏、肾上腺指数均显著降低(P<0.01);与模型组比较,麻花素艽地上、地下部位醇提物低、高剂量组各脏器指数差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:麻花秦艽地上、地下部位醇提物均具有一定的抗炎作用。

45种藏药材的CDC25A/CDC25B磷酸酶抑制活性筛选

目的:初步研究了45种藏药材乙醇提取物抑制CDC25A/CDC25B酶活性。方法:通过体外酶抑制活性测定,利用基于重组表达的CDC25A/CDC25B建立的高通量筛选模型,筛选获得活性乙醇提取物。结果:得到45种藏药材对CDC25A/CDC25B显示不同程度的抑制作用。其中有13种藏药材(防风、荆芥、雪层杜鹃、锁阳、侧金盏、斑花黄堇、黑顶黄堇、条裂黄堇、尼泊尔黄堇、粗梗黄堇及柳兰)对CDC25A/CDC25B有很好的抑制作用,且抑制率均小于50%。讨论:该实验结果为揭示藏药抗肿瘤活性提供科学依据,同时为进一步开发利用提供参考。

藏药细果角茴香的HPLC指纹图谱研究

目的:建立细果角茴香HPLC指纹图谱评价体系。方法:采用ZORBAX SB-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1mol/L醋酸铵溶液(每1 L溶液中加冰乙酸0.5 m L)为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 m L/min,检测波长300 nm,建立了30批细果角茴香的指纹图谱,使用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004版A)"软件计算相似度。结果:建立了细果角茴香HPLC指纹图谱共有模式,标定了15个共有峰,相似度在0.867~0.992,用聚类分析对指纹图谱进行模式识别。结论:将指纹图谱和模式识别结合起来对细果角茴香进行质量控制是一种有效的评价方法,为细果角茴香的全面质量控制提供了基础。

新型6-巯基嘌呤衍生物的合成及其生物活性研究

以6-氯嘌呤为原料,设计合成了新型6-巯基嘌呤衍生物,通过IR、1HNMR和HPLC-MS等方法对所合成化合物的结构进行了解析,并测试了其抗菌以及抗肿瘤活性。生物活性测试结果表明,N'-(2-氨基乙基)马来酰亚胺基-6-甲巯基嘌呤-9-己酰胺具有较高的抗菌活性和抗肿瘤活性。抗菌活性测试结果显示,其对所测试的10个菌种均有较好的抗菌活性。体外抗肿瘤细胞活性测试中,对6种肿瘤细胞株的IC50值在1. 35和1. 76μmol/L之间,相比对照药物6-巯基嘌呤(IC50=1. 97～4. 53μmol/L)表现出更好的抗肿瘤活性。

藏药麻花秦艽不同部位提取物的镇痛和急性毒性作用比较研究

目的比较麻花秦艽不同部位提取物的急性毒性及其镇痛作用。方法(1)甲醛致小鼠足疼痛反应:按照体重将小鼠分为6组:2个剂量实验-1组(灌胃麻花秦艽地上部分提取物10,30 g·kg^(-1)),2个剂量实验-2组(灌胃麻花秦艽地下部分提取物10,30 g·kg^(-1)),空白对照组(灌胃等量0. 5%羧甲基纤维素,CMC),阳性对照组(一次性腹腔注射吗啡30 mg·kg^(-1)),每组12只。每天2次,连续5次。末次给药后40 min,在小鼠右后足皮下注射5%甲醛30μL,观察并记录在注射后0～5 min、50～55 min的动物疼痛反应情况。(2)乙酸致小鼠扭体反应:分组与给药方法同(1)。末次末次给药后40 min,在小鼠腹腔注射0. 9%冰乙酸10μL·mg^(-1),观察并记录在注射冰乙酸后5～20 min的动物扭体次数。(3)急性毒性实验:5个剂量实验-1组分别灌胃麻花秦艽地上部分提取物72. 8,91. 2,113. 6,142. 4和177. 6 g·kg^(-1); 5个剂量实验-2组分别灌胃麻花秦艽地下部分提取物82. 0,102. 4,128. 0,160. 0和200. 0 g·kg^(-1),在给药后14 d内,观察并记录动物中毒表现和死亡情况。结果实验-1组与实验-2组对甲醛引起的2个时段的疼痛反应均无明显影响,但可抑制冰乙酸引起小鼠的扭体反应;实验-1组的LD50大于177. 6 g·kg^(-1),实验-2组的LD50为109. 80g·kg^(-1)。结论实验-1组与实验-2组均对小鼠具有一定的急性毒性作用,并有一定的镇痛作用。

优化藏药丛菔SFE-CO_2萃取挥发性成分工艺及GC-MS分析

目的:利用超临界CO_2萃取(SFE-CO_2)技术摸索藏药材丛菔中的脂溶性成分提取的最佳条件和主要成分分析。方法:采用均匀设计试验法优化SFE-CO_2萃取藏药丛菔中化学成分工艺,并用GC-MS技术进行对其化学成分进行分析。结果:最优萃取条件为:压力28MPa,温度为30℃,时间为30min。在丛菔提取物中分离出可识别峰107个,其中,26种化学成分的匹配度高于55%以上,其中,角鲨烯、甾固醇、香叶基香叶醇等化合物保留指数高且含量均在2%以上。结论:通过均匀设计方法快速准确地筛选出了SFE-CO_2技术萃取脂溶性化学成分的最佳条件,并采用GC-MS技术分析和鉴定了丛菔主要脂溶性化学成分,本研究为进一步研究藏药丛菔脂溶性化学成分提供了实验依据。