壳寡糖防止苹果果汁褐变的机理

以红富士苹果为材料,分别测定不同质量浓度壳寡糖(OCS)对果汁中自由基的清除作用,对超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)4种抗氧化酶酶活性和多酚氧化酶(PPO)酶活性以及与抗氧化有关物质(还原型VC和总酚)含量的影响。结果表明:壳寡糖对果汁中自由基的清除作用比较明显,尤其在2mg/mL和4mg/mL的质量浓度条件下可以较好的抑制O2-.的产生。壳寡糖可以明显提高抗氧化酶的酶活性,并且降低PPO的酶活性。壳寡糖对果汁中还原型VC和多酚含量的变化无显著性影响。提示壳寡糖可以提高抗氧化酶的活性,降低果汁中自由基的含量,抑制PPO的酶活性,从而抑制苹果果汁加工中褐变的发生。

壳聚糖聚乳酸羟基乙酸纳米粒子作为抗瘤药物载体的研究

研究采用乳化溶剂挥发技术和共价交联技术。合成了壳聚糖聚乳酸羟基乙酸（壳聚糖PLGA）的3种纳米载体：空白的PLGANPs、表面修饰的C-NPs和自组装的GNPs。利用人乳腺癌细胞MCF-7细胞作为模型细胞，抗肿瘤药物阿霉素为载药，通过荧光显微镜观察了肿瘤细胞对FITC标记的纳米载体的体外摄取情况，并进行了定量测定。用MTT法测定了包载药物阿霉素后纳米粒子对肿瘤细胞生长的抑制率，分析了不同纳米粒子作为抗肿瘤药物载体的靶向性和载药抑制性。研究结果表明，在低浓度条件下（25～400μg／mL），MCF-7细胞对C-NPs和G-NPs的吞噬具有时间依赖性和浓度依赖性。载药纳米粒子（DOX-PLGA NPs，DOX-C-NPs和DOX-G- NPs）和游离药物（DOX）对细胞生长的抑制率也具有时间依赖性和浓度依赖性，在低药物浓度下（1～4μg／mL）孵育12h后，载药纳米粒子基本呈现出高于游离药物的细胞生长抑制率，而当药物浓度从8μg／mL增加到16μg／mL后，游离阿霉索显现出更高的细胞生长抑制率，C-NPs和G-NPs均表现出高于PLGA NPs的细胞生长抑制率。壳聚糖修饰的2种纳米粒子C-NPs和G-NPs具有良好的细胞靶向性和低浓度药物抑制率，是一种良好的抗肿瘤药物载体。

壳聚糖的纳米载体应用于口服蛋白类药物/疫苗递送的研究

近年来,细菌性和病毒性的传染性疾病已成为制约水产鱼类养殖业发展的瓶颈。口服免疫因其对鱼体操作方便、无损失、不受时间地点及鱼体大小的限制近年来得到了广泛的关注。然而口服免疫因疫苗在通过鱼的胃肠道时易被消化酶降解,导致免疫效率低下。因此,随着纳米技术的迅速发展,基于壳聚糖的纳米载体与水产疫苗的有效结合在鱼类口服免疫领域越来越受到重视。本文利用离子交联法和聚电解质凝聚法分别合成了壳聚糖纳米粒(CS-NPs)和壳聚糖/羧甲基壳聚糖复合纳米粒(CS/CMCS-NPs),其平均粒径分别为(178±6.27)和(255±7.54)nm,zeta电位分别为(+16.4±0.51)和(+15.9±0.37)mV。纳米粒对模式蛋白药物牛血清白蛋白(BSA)的包封率分别为(42.9±1.2)%和(59.4±3.2)%。红细胞溶血试验及MTT试验表明相较于CS-NPs,CS/CMCS-NPs具有更好的生物相容性。以荧光染料Cy5.5对纳米载体进行了荧光标记来评价Caco-2细胞对荧光纳米载体的摄取,结果表明,在一定浓度和时间范围内,Caco-2细胞对纳米粒的摄取存在一定的浓度依赖性和时间依赖性。为了研究纳米载体所包载的蛋白类药物在大菱鲆体内的分布情况,以FITC对BSA进行荧光标记,口服灌胃大菱鲆36h后,对于FITC-BSA:CS-NPs组,荧光药物主要分布在肝脏和前肠中;对于FITC-BSA:CS/CMCS-NPs组,荧光药物主要分布在后肠、肝脏和脾脏中;作为对照组的FITC-BSA组,在肝脏中的荧光分布最强,由此可见,CS/CMCS-NPs能够更有效的保护药物到达大菱鲆的后肠,有望成为一种安全有效的口服蛋白疫苗运送载体。

经皮给药载体载MD-CPT透明质酸纳米乳的细胞吞噬与体内药代动力学研究

本文在研究制备了包载10,11-亚甲二氧基喜树碱(MD-CPT)的透明质酸纳米乳(HANs)经皮给药系统的基础上,进一步研究了载MD-CPT透明质酸纳米乳的细胞吞噬,并进行了体内药代动力学分析.通过优化制备条件,得到了皮肤渗透性良好的缓释剂型.从CLSM观察到药物被细胞摄入并传递入细胞核,同时,载药纳米乳的细胞吞噬效率呈时间依赖性,不同细胞株HSF、HUVES、MCF-7、KF的细胞吞噬率略有不同.用Rhodanmine B标记HANs,通过荧光显微镜观察到载药纳米乳透过角质层到达真皮层的拟动态过程.利用HPLC检测MD-CPT血药浓度,测得经皮给药半衰期T1/2是静脉注射的3.6倍,肌肉注射的1.6倍,体内药物滞留时间显著增加;血药浓度峰谷值差异小,曲线平缓,说明经皮给药能保证血药浓度呈现可控的持续性.最终通过活体成像系统和组织切片荧光显微镜,直观地反映出经皮给药后药物在大鼠体内的分布情况和各组织器官药物含量,确定载药纳米乳主要采取胞间渗透的扩散方式,在局部给药的区域滞留时间较长,有利于对浅表性的病灶区持续给药,延长药效,而剩余的MD-CPT和解离的HANs都进入了血液循环,最终通过新陈代谢被排出体外.为无创型HANs经皮给药系统应用于浅表性肿瘤治疗提供了理论基础.