小儿卵巢囊肿40例临床分析

目的:分析小儿卵巢囊肿的诊断和治疗方法。方法:回顾性分析我院2012年1月至2014年12月间40例小儿卵巢囊肿患儿的临床资料。结果:发病年龄26 d^14岁,平均9岁。左侧卵巢囊肿22例,右侧17例,两侧1例。38例行手术治疗,其中20例行腹腔镜手术,18例行传统开腹手术。1例非手术治疗因住院期间囊肿自行消失,另1例因囊肿小且无症状行保守治疗。6例卵巢囊肿蒂扭转致卵巢坏死行附件切除术,1例快速病理报告为无性细胞瘤,行附件切除术。31例行卵巢囊肿剥除术。病理报告为囊性成熟性畸胎瘤、浆液性囊腺瘤、黏液性囊腺瘤、混和性囊腺瘤、内膜样囊肿等。结论:儿童卵巢囊肿的临床症状少有特异性,其确诊及鉴别诊断依赖于影像学检查,β-h CG检测对评估囊肿良恶性有较大意义;卵巢囊肿蒂扭转后卵巢能否保留取决于早期诊断、及时手术和肿瘤性质。腹腔镜手术治疗良性卵巢囊肿有其优势,但对于恶性者应谨慎选择术式。

单侧睾丸扭转复位后对侧睾丸组织CGRP和LDH的测定

目的:了解降钙基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)浓度在单侧睾丸扭转复位后对侧睾丸组织中不同时段的变化,阐明CGRP与对侧睾丸早期损伤之间的联系。方法:将30只青春期前SD大鼠随机分为假手术组、扭转复位组和扭转切除(不复位)组,每组10只。假手术组作为对照;扭转复位组和扭转切除组依Turner法建立左侧睾丸扭转模型,在扭转4h后,前者行复位固定术,后者行切除术。三组分别于实验完成后4h、24h各处死大鼠5只,取右侧睾丸组织行CGRP及乳酸脱氢酶(actatedehydrojgenase,LDH)浓度检测。结果:扭转切除组4h与24h时CGRP浓度分别为(712.4±23.1)μmol/L与(733.0±30.0)μmol/L,LDH浓度分别为(417.2±25.9)U/L与(458.1±23.5)U/L;而扭转复位组的CGRP在4h与24h时分别为(852.3±33.9)μmol/L与(861.7±29.8)μmol/L,LDH分别为(690.0±28.8)U/L与(706.7±32.3)U/L;显示CGRP与LDH浓度在扭转复位组均有不同程度升高(P<0.05),但各指标在扭转切除组与假手术组的相比中未显示明显的统计学差异。结论:在单侧睾丸扭转复位后,对侧睾丸组织可能存在缺氧状态,CGRP的反应性升高可能起一定保护作用。

邻苯二甲酸二乙基己酯对成年大鼠睾丸前列腺素E_2含量及COX-2 mRNA表达的影响

目的:研究邻苯二甲酸二乙基己酯(DE-HP)对成年大鼠睾丸前列腺素E2(PGE2)含量及环氧合酶-2(COX-2)mRNA表达的影响。方法:雄性SD成年大鼠40只,随机分成4组,每组10只,设3个染毒剂量组(10、100、500 mg.kg-1.d-1DEHP溶媒为玉米油)和1个对照组(玉米油),饲养4周后处死。用ELISA测定睾丸组织PGE2含量;应用免疫组化法检测40只雄性SD成年大鼠睾丸组织中COX-2的表达及其定位情况;RT-PCR法检测各组睾丸组织COX-2 mRNA表达及其定位情况。结果:实验组睾丸组织中PGE2含量和睾丸组织的COX-2mRNA表达均低于对照组,COX-2则主要表达于精原细胞。结论:DEHP能使成年大鼠睾丸生精细胞功能损伤,使睾丸组织PGE2合成降低,其机制可能与下调COX-2 mRNA表达有关。

应用DWI早期发现SD大鼠单侧睾丸扭转后对侧睾丸损伤的研究

目的证明单侧睾丸扭转后对侧睾丸存在损伤,寻找有效、无创的影像学方法了解对侧损伤情况。方法40只SD大鼠随机分为假手术组和扭转组,每组20只。二组于术后1 h、4 h、24 h、1周各取5只行磁共振扩散加权成像(DWI)并记录表现扩散系数值,其后处死大鼠,取对侧睾丸行病理评分。结果与假手术组比较,扭转组对侧ADC值、病理评分等指标均有不同程度升高,且两者经Pearson法证实存在正相关。结论单侧睾丸扭转后,对侧睾丸早期即可出现损伤。DWI能有效、连续、无创地评估对侧损伤程度,可协助临床诊治。

全反式维甲酸对睾丸卵黄囊瘤细胞VEGF表达的抑制作用

目的研究全反式维甲酸(ATRA)对睾丸卵黄囊瘤细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的抑制作用。方法在体外细胞培养的基础上,采用MTT比色法测定不同浓度ATRA对睾丸卵黄囊瘤细胞增殖影响,半定量RT-PCR方法检测VEGF mRNA的表达水平,Western Blot法检测VEGF蛋白表达水平。结果 ATRA能抑制肿瘤细胞增殖,RT-PCR结果显示实验组卵黄囊瘤细胞的VEGF mRNA表达水平下调,Western Blot显示实验组卵黄囊瘤细胞的VEGF蛋白表达水平降低,且两者下调作用均呈较明显的时间-剂量依赖性。结论全反式维甲酸可以抑制睾丸卵黄囊瘤细胞的增殖,抑制肿瘤增殖机制可能与下调VEGF的表达有关。

大鼠单侧睾丸扭转复位后短期内对侧睾丸组织血流变化的SPECT研究

目的:研究经尾静脉注射同位素锝99(99TcmO4-)后应用单光子发射计算机断层成像(singlephoton emission computed tomography,SPECT)显示大鼠单侧睾丸扭转(unilateral testiculartorsion,UTT)复位后即时及24 h时段对侧睾丸的血流变化,并比较血流变化与对侧睾丸早期损伤之间的联系。方法:将30只青春期前SD大鼠随机分为假手术组、复位组和切除(不复位)组,每组10只。复位组和切除组依Turner法建立左侧睾丸扭转模型(左睾丸720°扭转4 h,并固定于阴囊),4 h后前者扭转侧睾丸复位固定,后者切除,手术完成。其后即时、24 h时各取大鼠5只行SPECT观察对侧睾丸血供,记录结果后处死大鼠。结果:切除及复位组对侧血供手术后即时较假手术组明显增加;手术后24 h切除组对侧血供较假手术组增加,而复位组血流较假手术组则明显降低(P<0.05)。结论:SPECT可以特异性显示大鼠睾丸血流灌注情况;在UTT复位后,对侧睾丸血供呈先升后降趋势,而切除扭转侧睾丸后,对侧血供呈升高并保持平稳趋势,提示扭转侧睾丸保留与否可影响对侧睾丸血流灌注。

大黄牡丹汤对腹腔镜手术后阑尾炎患儿炎症因子和免疫功能的影响

目的观察大黄牡丹汤对腹腔镜手术后急性阑尾炎患儿炎症因子和免疫功能的影响。方法选择我院收治的160例急性阑尾炎患儿,随机分为联合治疗组和腹腔镜手术组,各80例,腹腔镜手术组患儿采用腹腔镜手术治疗,联合治疗组在腹腔镜手术治疗的基础上给予大黄牡丹汤治疗。治疗前和治疗后4 d检测2组患儿免疫细胞及肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和C-反应蛋白(CRP)的水平。结果与治疗前比较,2组术后TNF-α,IL-6,CRP均显著增高,经统计学分析,差异均有统计意义(P<0.05),但联合治疗组升高幅度低于腹腔镜手术组,差异均有统计意义(P<0.05);与治疗前比较,2组术后免疫细胞CD+4,CD+4/CD+8均显著升高(P<0.05),但联合治疗组免疫细胞水平升高幅度均大于腹腔镜手术组(P<0.05)。结论大黄牡丹汤能有效改善腹腔镜手术后急性阑尾炎患儿炎症因子和免疫细胞的水平,对急性阑尾炎患儿的康复具有十分重要的临床意义。

睾丸生殖细胞肿瘤病因学研究

睾丸生殖细胞肿瘤（Testicular germ cell tumors，TGCTs）是一组由不同发病机制、不同病理组织类型和临床表现构成的多样性肿瘤，占男性全部睾丸肿瘤的90％以上。但从整体男性恶性肿瘤的发病来看，其仍是一种比较少见的疾病，只占2％。

小儿睾丸卵黄囊瘤细胞的体外培养及生物学特性研究

目的 采用组织培养技术在体外培养取自人体的睾丸卵黄囊瘤组织，探讨小儿睾丸卵黄囊瘤组织的体外培养方法及生物学特性。方法 采用组织块培养法培养1例睾丸卵黄囊瘤患儿手术的标本，从形态学、细胞生长动力学、肿瘤内分泌、染色体分析、细胞DNA分析等方面初步研究了小儿睾丸卵黄囊瘤细胞的生物学特性。结果 小儿睾丸卵黄囊瘤细胞无论形态学观察，还是功能学测定，均符合卵黄囊瘤细胞的特征，染色体众数39-97条，并具有体外分泌AFP功能。其特有表现为：细胞贴壁生长，呈短梭形或多角形，细胞密集时可多层重叠生长，肿瘤细胞表面有明显的微绒毛，细胞核形态怪异，细胞倍增时间较长。结论小儿睾丸卵黄囊瘤细胞在体外生长稳定，增殖活跃，肿瘤细胞的纯度较高，可以用于后续的实验研究。

跨吻合口支架管引流与双J管引流在儿童Anderson-Hynes术后疗效的比较

目的比较跨吻合口支架管引流与双J管引流在儿童Anderson-Hynes术后的效果及两者的优缺点。方法回顾性分析2007年1月-2010年1月,52例因肾盂输尿管连接处狭窄(UPJO)并由同一位小儿泌尿外科医师行Anderson-Hynes术的患儿的临床资料,其中25例(48.1%)术后放置跨吻合口支架引流(跨吻合口支架管组),27例(57.9%)术后放置双J管引流(双J管组)。对2组患儿手术时间、住院天数、拔管时间、总的并发症和成功率进行比较。结果跨吻合口支架管组出现支架管滑脱1例,双J管组出现膀胱痉挛引起腹痛1例、膀胱内尿盐结垢1例。2组导尿管拔除时间[(2.1±0.7)dvs(4.4±1.1)d]、住院时间[(13.5±1.3)d vs(6.0±1.1)d]比较,差异均有统计学意义(Pa<0.01);而手术时间[(62.8±12.5)min vs(52.6±10.2)min]、肾周引流管拔除时间[(4.0±0.9)d vs(3.4±1.0)d]比较,差异均无统计学意义(Pa>0.05)。跨吻合口支架管拔除时间为(12.4±1.2)d,双J管拔除时间为(5.7±1.3)周。2组术后均未出现再次狭窄而手术的患者。结论两种支架管引流方式在术后总体并发症和成功率无明显差异,但跨吻合支架管引流具有操作简单、兼有内外引流及支撑作用、术后取管方便及经济等优点,最重要的是避免了再次麻醉下取管。

丁酸钠对Caco-2细胞肠屏障的作用及NF-κB途径的影响

目的通过观察高浓度丁酸钠(sodium butyrate,NaB)(5 mmol/L,8 mmol/L)对单层Caco-2细胞肠屏障模型的作用,及该过程中对NF-κB通路的影响,旨在探讨高浓度NaB破坏单层Caco-2细胞肠屏障模型的可能分子机制。方法使用不同浓度的NaB及雷公藤甲素(triptolide,TP)(特异性抑制NF-κB)50 nmol/L作用体外培养的Caco-2细胞及单层Caco-2细胞肠屏障模型,按照作用的试剂和浓度分为0 mmol/L NaB(对照组)、50 nmol/L TP组(TP组)、2 mmol/L NaB组(NaBⅠ组)、5 mmol/L NaB(NaBⅡ组)、8 mmol/L NaB(NaBⅢ组)、5 mmol/L NaB+50 nmol/L TP组(NaB+TP组)。测定单层Caco-2细胞肠屏障模型的跨上皮电阻(transepithelial electrical resistance,TER)及菊粉-FITC(inulin-FITC)的通透性;用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)及蛋白质印迹法检测各组IL-1β和TNF-α的mRNA及蛋白水平;用核质分离试验检测p65蛋白入核水平的变化。结果①高浓度NaB(5 mmol/L、8 mmol/L)作用于单层Caco-2细胞肠模型72 h后,与对照组相比,TER显著下降,inulin-FITC通透性显著升高;如5 mmol/L NaB作用于单层Caco-2细胞肠屏障72 h,TER降低至(106.33±4.04)(Ω×cm^2),inulin-FITC的通透性升高至(12.52±1.82)%,与对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05);而使用50 nmol/L TP特异性抑制NF-κB后,其TER升高至(398.33±3.06)(Ω×cm^2),inulin-FITC的通透性降低至(7.24±0.25)%,差异具有统计学意义(P<0.05),提示5 mmol/L NaB对肠屏障的破坏作用被显著抑制;②高浓度NaB(5 mmol/L、8 mmol/L)作用Caco-2细胞72 h,IL-1β和TNF-αmRNA及蛋白的表达水平较对照组显著提高,且p65蛋白入核水平也显著提高,差异具有统计学意义(P<0.05);③在5 mmol/L NaB的基础上,使用TP抑制NF-κB后,可显著抑制高浓度NaB诱导IκB-α的磷酸化及p65蛋白入核,并显著降低IL-1β与TNF-α的表达水平。结论高浓度NaB可破坏肠屏障功能,其机制可能与活化NF-κB通路,促进炎症因子释放相关。

全反式维甲酸对原代培养卵黄囊瘤细胞系体外生长影响的观察

目的:体外观察全反式维甲酸(ATRA)对卵黄囊瘤细胞系细胞体外生长的影响。方法:卵黄囊瘤细胞系细胞持续培养在含ATRA的96孔板中,采用MTT法检测ATRA的体外抗增殖效果,采用流式细胞仪检测ATRA对细胞周期的影响,用相差倒置显微镜及透射电镜观察细胞形态变化。结果:MTT法检测发现,ATRA作用后细胞的增殖受到了抑制,随着浓度和时间的增加,其抑制作用增强,与对照组比较差异有统计学意义,P<0.05。流式细胞仪检测结果显示,经ATRA处理后的卵黄囊瘤细胞明显阻滞于G1期,S期比例减少,与对照组比较差异有统计学意义,P<0.05。光镜和透射电镜可观察到经ATRA处理后的卵黄囊瘤细胞部分发生形态学的良性分化:超微下见胞核体积缩小且形态规则,核仁减少和消失,细胞表面微绒毛及树枝状伪足消失。对照组细胞无此表现。结论:ATRA对卵黄囊瘤细胞有诱导分化作用,有效抑制了肿瘤细胞的增殖,其机制可能与引起细胞周期阻滞于G1期有关。