大链壶菌对蚊幼虫作用的组织学观察

目的：观察灭蚊真菌大链壶菌感染蚊幼虫后两者的组织形态学变化以了解该真菌致死蚊幼虫的机理。方法：用真菌实验室感染蚊幼虫后取不同感染程度和时间的蚊幼虫作常规组织切片，Ｈ．Ｅ．染色，然后以正常蚊幼虫为对照，用比较组织学方法观察受染蚊幼虫和菌体的组织学变化。结果：在较早的Ⅰ度感染蚊幼虫，可见蚊头，胸部组织间隙有较细的、不分隔的大链壶菌营养型菌丝体，后者进而在血体腔内大量繁殖，并侵入肌肉、脂肪体、胃、肠等组织和细胞内，被入侵处的组织发生破坏和消失；Ⅱ度感染的蚊幼虫体内，可见蚊组织被严重破坏甚至消失，菌丝体发育为生殖型，即菌丝出现分隔，变粗变短或形成圆形、卵圆形或串珠状的孢子体。感染时间较长时蚊体内正常结构大部分消失，而此时菌丝体和孢子体内的原生质和核也已消失，只剩下中空的细胞壁管道。结论：认为大链壶菌对蚊幼虫组织的直接入侵和破坏是该菌致蚊幼虫死亡的主要原因之一。

中国西部地区牛带绦虫的分子鉴定和生物行为研究进展

本文对近年来涉及中国西部7省(区)10县(市)的牛带绦虫病的流行病学调查和驱虫治疗、成虫标本的形态学观察、11个地理虫株的分子生物学鉴定、牛带绦虫和亚洲带绦虫感染中间宿主猪和牛后囊尾蚴的发育和生物行为观察,以及中间宿主组织病理学变化的比较等进行综述,认为将亚洲带绦虫定为新物种比作为牛带绦虫的亚种更合适。

贵医实验动物中心大小白鼠体内外寄生虫调查

贵医实验动物中心大小白鼠体内外寄生虫调查包怀恩马贵恩万明明王宝麟李建华陈艳郎书源裘学丽（贵阳医学院寄生虫学教研室贵阳５５０００４）为开展对我省实验动物寄生虫的监测工作，我们于１９９５年分别对贵阳医学院实验动物中心提供的１００只小鼠和２０只大鼠进行了体...

多媒体组合课堂教学设计（一）

多媒体组合课堂教学设计（一）包怀恩，詹业著，李建华，万明明，王宝磷，徐小兴，陈艳，徐小安（贵阳医学院寄生虫学教研室贵阳５５０００４贵阳医学院电化教育教研室）随着现代科技的发展，视听教育技术已越来越广泛地应用于医学教育，对改革传统教学方法和教学思想发挥...

斯氏狸殖吸虫可溶性抗原-SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析

为提高免疫学诊断在诊断斯氏狸殖吸虫病的准确性,亟待解决该虫抗原的纯化问题,我们试用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,对该虫可溶性抗原中蛋白质和多肽组分的分子量进行了初步分析,简报如下。1材料和方法1.1可溶性抗原制备采自本省铜仁市郊的斯氏狸殖吸虫囊幼实验感染家猫,

组织切片免疫酶染色法诊断斯氏狸殖吸虫病的初步研究

斯氏狸殖吸虫病病原学诊断很困难,以往主要依靠皮试法协助;因皮试法特异性较差,结果往往不理想。为寻求较特异、敏感而又简便易行、适合于基层医疗单位使用的血清学免疫诊断方法,我们参照Kamiya和向选东等人的方法。

免疫酶染色法检测斯氏狸殖吸虫抗体实验研究

用斯氏狸殖吸虫成虫冰冻切片和石蜡切片为抗原作免疫酶染色试验(IEST)检测家兔血清特异性抗体,血清最高稀释度为1:256,反应性免疫复合物位于虫体皮层和肠壁內面;前、中、后段虫体反应基本相同。该抗原片与华支睾吸虫、血吸虫和弓形虫等阳性血清无交叉反应,与同批虫体可溶性抗原Dot-ELISA法检测结果一致。以华支睾吸虫成虫和旋毛虫幼虫肌肉囊包切片与斯氏狸殖吸虫抗血清反应,结果亦呈阴性;但卫氏并殖吸虫成虫和童虫切片与其呈阳性反应。

斯氏狸殖吸虫在大鼠和家兔体内发育和所致病理变化的观察

本文初次报告斯氏狸殖吸虫可以在实验大鼠和家兔体内发育成熟,并可从大鼠粪便中排出虫卵,提示鼠粪可能成为该虫的保虫宿主。同时首次报告了斯氏狸殖吸虫在大鼠肝脏的异位成囊寄生,组织病理学观察发现肝内虫囊主要由肝内胆管扩张增生形成。文中并对该虫在大鼠和家兔肺部的病理变化、虫体的移行和寄居习性等进行了分析和讨论。

试论医学视听教育的人才建设

我国的医学视听教育自70年代末重新起步以来,已经走过了顽强拼搏、胜利发展的10余年。经过辛勤的浇灌,医学视听教育这株教育之树上绽发的新芽早已枝繁叶茂、群芳争艳,并在视听教育理论、设备建设、教材建设和人才培养等方面结出了累累硕果。对促进医学教育改革、提高教学质量发挥了巨大作用,在教育领域取得了公认的学术地位。但是,应该清醒地看到。

贵州都匀牛带绦虫亚洲亚种的调查和虫体内元素及氨基酸的检测

目的 了解贵州省都匀市牛带绦虫病的流行因素及病原虫种 ,并对成虫体内氨基酸组分及元素进行检测。 方法 ①对该市河阳乡的米秀村等 6个村寨进行牛带绦虫病流行病学调查 ,对 70名现症患者 (男性 67,女性 3 )的感染原因、临床症状进行了解分析并作驱虫治疗。②对驱出的成虫作形态学鉴定和测量。③采用氨基酸分析仪、原子吸收光谱仪及分子荧光仪等分别测定成虫体内游离氨基酸组分及各种元素的含量。 结果 ①当地牛带绦虫感染主要是因群众喜吃生的或不熟的猪肝引起 ,患者的临床表现以排节片、肛门瘙痒、腹痛、腹泻等为主。 70位有临床症状的成人中 ,有 2 5人驱出成虫 (男性 2 4人 ,女性 1人 )。②成虫外形与牛带绦虫极其相似 ,头节上无顶突及小钩 ;但虫体较短 ,大小在 0 .61～ 2 .5 8m之间 ,节片较薄而且数量少。③检测了成虫的 16种氨基酸及 12种元素。 结论 贵州省都匀有牛带绦虫病局部流行 ,患者的临床表现与传统的牛带绦虫病相似。根据感染原因和对虫体的测量结果 ,认为病原体应当是牛带绦虫亚洲亚种 (Taeniasaginataasiatica)。

亚洲带绦虫成虫全长cDNA质粒文库的构建及EST测序

目的构建亚洲带绦虫成虫全长cDNA质粒文库,为获取亚洲绦虫成虫的基因信息,建立基因表达谱,并为筛选疫苗基因和诊断抗原基因奠定基础。方法提取亚洲带绦虫成虫mRNA,构建pBluescript II SK全长cDNA质粒文库,测定扩增文库的滴度;用载体克隆位点两端的引物进行PCR扩增,以检测所构建文库的质量。随机挑选质粒文库转化的阳性重组克隆,进行较大规模的5′端测序,归并unigene。结果测定文库的滴度为1011pfu/μl,插入片段的大小主要在1000bp以上。共测1495个克隆,获得有效EST序列1126个,归并为643条unigene。结论已成功获得一高质量的亚洲带绦虫成虫全长cDNA表达文库,并获得了较丰富的成虫表达基因数据。

猪带绦虫成虫cDNA质粒文库的构建及EST测序

目的构建猪带绦虫(Taeniasolium)成虫全长cDNA表达文库,为获取猪带绦虫成虫的基因信息,建立基因表达谱,并为筛选疫苗基因和诊断抗原基因奠定基础。方法提取猪带绦虫成虫mRNA,构建pBluescriptIISK全长cDNA质粒文库,测定扩增文库的滴度;用载体克隆位点两端的引物进行PCR扩增,以检测所构建文库的质量。随机挑选质粒文库转化的阳性重组克隆,进行较大规模的5’端测序,归并unigene。结果文库库容达到1×106pfu/ml,插入片段的大小主要在1000bp以上。获得有效EST序列2000条,归并为1171条unigene。结论已成功获得一高质量的猪带绦虫成虫全长cD-NA表达文库,并获得了较丰富的成虫表达基因数据。

亚洲牛带绦虫26kDa GST基因表达及免疫学分析

目的对亚洲牛带绦虫成虫26kDa谷胱甘肽S-转移酶基因(glutathione S-transferase,GST)进行克隆、表达和免疫学初步分析研究,为深入研究其生物学功能提供依据。方法将亚洲牛带绦虫成虫26kDa GST克隆到原核表达质粒pET-30a(+)中,在大肠埃希菌BL-21/DE3中用异丙硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定,用镍离子金属螯合剂亲和层析柱进行纯化,纯化的重组蛋白用蛋白印迹(Western Blotting)进行免疫学分析。结果PCR、双酶切及DNA测序结果均表明重组质粒pET-30a(+)-TaGST构建成功。SDS-PAGE结果表明,目的基因在大肠埃希菌BL-21/DE3中获得高效表达,经亲和层析获得了高纯度蛋白。重组蛋白可被其免疫的SD大鼠血清识别,表明其具有免疫原性;并且能识别感染了亚洲牛带绦虫的猪血清和亚洲牛带绦虫患者血清,表明其具有免疫反应性。结论亚洲牛带绦虫成虫26kDa谷胱甘肽S-转移酶基因可在原核表达系统中获得具有免疫学活性的高效表达。

用mtCO技术测定云南及贵州四地区的牛带绦虫

目的 用 mt CO 技术鉴定云南省大理及贵州省都匀、从江等地所发现的是牛带绦虫或牛带绦虫亚洲亚种。 方法 采集成虫样本 ,抽提 DNA,PCR扩增线粒体细胞色素 C氧化酶 (mt CO )部分基因片段并测序 ,经PHYL IP软件包处理 ,计算遗传距离并构建系统发育树状图。 结果 云南省兰坪、大理和贵州省都匀的标本 mt CO 基因片段序列与已知牛带绦虫亚洲亚种的序列相同。贵州从江的标本 mt CO 基因片段序列与已知牛带绦虫的序列相同。两组基因片段的同源性达 97.4 4 % ,氨基酸序列同源性达 99.16 %。系统发育树状图显示 ,牛带绦虫亚洲亚种和牛带绦虫最为接近 ,远离猪带绦虫及其他绦虫。 结论 云南省兰坪、大理及贵州省都匀存在牛带绦虫亚洲亚种 ,贵州省从江发现的虫种为牛带绦虫。

猪囊尾蚴特异性抗原的筛选、鉴定和生物信息学分析

目的对猪囊尾蚴的特异性抗原进行筛选、鉴定和生物信息学分析。方法四川省雅江县呷拉乡猪带绦虫病患者,口服槟榔-南瓜子驱虫,收集、制备虫卵悬液(8万个/ml)。将6头20d龄三元杂交乳猪均分实验组和空白对照组,实验组每猪灌胃虫卵悬液1ml。40d后,分别制备实验组心脏血混合血清及对照组心脏血混合血清;收集、制备实验组猪囊尾蚴蛋白,进行双向电泳(2-DE)分析。将凝胶蛋白斑点转移至聚偏氟乙烯膜(PVDF膜),用实验组混合血清及对照组混合血清(均为1∶10)为一抗,羊抗猪HRP-IgG(1∶200)为二抗,进行蛋白质印迹(Western blotting)分析,比较两组杂交蛋白点的差异,确定猪囊尾蚴抗原抗体阳性杂交斑点,据此挖取双向电泳与之对应的蛋白点,用电喷雾离子阱型质谱仪(ESI-TrapMS)进行质谱鉴定。搜索美国国家生物技术信息中心(NCBI)网站信息进行生物信息学分析。结果双向电泳凝胶共检测到207±9个蛋白质斑点,相对分子质量为Mr14400～94000,等电点(pI)为3.0～10.0。筛选出7个特异性抗原,其中的4个分别为AF239799-1膜联蛋白(AF239799-1 annexin)、细胞支架肌动蛋白-2(cytoskeletal actin-2)、原肌球蛋白(tropomyosin)和肌动蛋白-1(actin-1)。前1个蛋白已被鉴定为猪带绦虫特异性抗原,后3个蛋白抗原与NCBI网上登录的亚洲带绦虫成虫蛋白一致,为猪囊尾蚴特异性抗原。结论共获得3个猪囊尾蚴特异性抗原,即细胞支架肌动蛋白-2、原肌球蛋白和肌动蛋白-1。

亚洲带绦虫烯醇酶基因及其蛋白质的结构与功能

【目的】分析和预测亚洲带绦虫烯醇酶基因及其编码蛋白的结构和特性,用于指导其生物学功能的实验研究。【方法】利用美国国家生物技术信息中心和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统中有关基因和蛋白的序列和结构信息分析的各种工具,结合其他生物信息学分析软件包,如Pcgene和Vector NTIsuite,从亚洲带绦虫全长cDNA质粒文库中识别烯醇酶基因及其编码区,分析、预测该基因编码的蛋白质的理化特性、翻译后的修饰位点、功能域、亚细胞定位、拓扑结构、二级结构、三维空间构象等。【结果】该基因全长1737bp,编码区为第205～1503bp,编码433个氨基酸,为全长基因。GenBank中与棘口吸虫烯醇酶氨基酸序列同源性最高,达78%。相对分子量理论预测值为46653.5 Ku。没有质体、线粒体定位序列。预测编码蛋白有1个跨膜区,3个亲水性部位。与吸虫属的烯醇酶进化关系最近。【结论】应用生物信息方法从亚洲带绦虫成虫cDNA文库中筛选出了亚洲带绦虫烯醇酶cDNA全长序列并预测得到其结构与功能方面信息。