传承保肝蒙药验方Ⅰ号对人肝癌细胞的作用及机制研究

目的:探讨传承保肝蒙药验方Ⅰ号对体外培养的人肝癌细胞的增殖抑制作用,并初步探讨其作用机制。方法:体外培养人肝癌细胞Hep G2,分别设置验方组,验方与5-Fu联合组,以及5-Fu阳性对照组,空白对照组。MTT法观察验方对肝癌细胞增殖抑制作用;流式细胞术分析验方对肝癌细胞凋亡以及细胞周期阻滞作用;Q-PCR技术观察验方对凋亡相关基因表达的影响。结果:MTT分析显示:浓度为1mg/m L的验方即呈现对肝癌细胞Hep G2有较好的增殖抑制率(35.79%),当浓度达到6mg/m L时,抑制率达到82.27%,IC50=2.56mg/m L,呈现浓度及时间依赖性;5-Fu组浓度达到80ug/m L时,细胞抑制率为49.89%,IC50=93.83μg/m L,但是未显示出浓度依赖性;5-Fu联合验方后,抑制率达到80.27%(浓度为6mg/m L),IC50=14.65μg/m L。呈现浓度依赖性。流式细胞术(FCM)分析:与对照组比较,验方单独用药,以及联合5-Fu组凋亡率均明显增加(P<0.01);细胞周期检测结果显示,验方以及5-Fu联合作用于肝癌细胞后,细胞S期和G2/M期明显增加(P<0.01);验方对凋亡相关基因c-1p450、Caspase3、Caspase8的表达具有上调作用。结论:传承保肝蒙药验方对体外培养的人肝癌细胞Hep G2增殖有显著的增殖抑制作用,具有时间与剂量依赖性,其抑制肝癌细胞增殖的机制与细胞周期阻滞及影响肿瘤细胞凋亡相关基因表达相关。研究结果将为传承保肝验方的推广应用,以及推进蒙药验方进入国际医疗市场提供科学的理论及实验数据。

保肝蒙药Ⅰ号对人肝癌Huh-7细胞的作用及机制研究

目的探讨保肝蒙药Ⅰ号对人肝癌Huh-7细胞增殖的抑制作用及机制,为临床应用与推广提供科学的理论及实验数据。方法体外培养人肝癌Huh-7细胞,实验分为四组:对照组(生理盐水)、保肝蒙药Ⅰ号组、5-氟尿嘧啶(5-Fu)组、保肝蒙药Ⅰ号联合5-Fu组。分别采用MTT法、流式细胞术和Q-PCR技术观察药物干涉后对肝癌细胞增殖的抑制作用,对肝癌细胞凋亡、细胞周期阻滞和相关基因表达的影响。结果 5-Fu组、保肝蒙药Ⅰ号(4 mg/m L)组和保肝蒙药Ⅰ号联合5-Fu组对Huh-7肝癌细胞增殖抑制率分别达到67.70%、73.67%和75.35%。保肝蒙药Ⅰ号组单独作用于Huh-7肝癌细胞以及保肝蒙药Ⅰ号联合5-Fu组联合作用,细胞的凋亡率均显示增加(P<0.05)。与对照组比较,保肝蒙药Ⅰ号组和5-Fu组分别作用于Huh-7肝癌细胞后显示细胞G_0/G_1期比率明显增加(P<0.05);然而,保肝蒙药Ⅰ号联合5-Fu组作用于Huh-7肝癌细胞后显示细胞S期比率明显增加(P<0.05)。保肝蒙药Ⅰ号组对凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9的表达具有调控作用,能上调细胞色素C的表达。结论保肝蒙药Ⅰ号对人肝癌Huh-7细胞增殖有显著的抑制作用,其机制与细胞周期阻滞及影响肿瘤细胞凋亡相关基因的表达相关。研究成果将对阐明临床应用的保肝蒙药Ⅰ号治疗肝癌的机制及推广应用有重要意义。