鲫鱼视网膜谷氨酸受体和GABA受体在爪蟾卵母细胞中的表达

我们以两栖类卵母细胞为功能表达系统，通过注射鲫鱼（Ｃａｒａｓｓｉｕｓｃａｒａｓｓｉｕｓ）视网膜ｍＲＮＡ，利用电压箝及药物灌流手段，系统地研究了鲫鱼视网膜内氨基酸受体的类型和特征，结果如下：（１）Ｇｌｕ受体：ＫＡ可以诱发明显的去极化电流，而且Ｄｉａｚｏｘｉｄｅ能增强ＫＡ诱导的反应，这提示鲫鱼视网膜内某些Ｃｌｕ受体是ＡＭＰＡ选择性亚型（ＡＭＰＡ－ｐｒｅｆｅｒｒｉｎｇｓｕｂｔｙｐｅ）。（２）ＣＡＢＡ受体：ＧＡＢＡ能诱发一个快速、光滑的内向电流，绝大部分对ＧＡＢＡ的反应可被ｂｉｃｕｃｕｌｌｉｎｅ所压抑，而ＧＡＢＡ＿Ｂ受体的激动剂ｂａｃｌｏｆｅｎ则无任何作用，这提示，鲫鱼视网膜内大部分是ＧＡＢＡ＿Ａ受体。

反义寡核苷酸片段可抑制鲫鱼视网膜电压依赖性钾离子通道的表达

爪蟾卵母细胞经注射鲫鱼（Ｃａｒａｓｓｉｕｓｃａｒａｓｓｉｕｓ）视网膜总ＲＮＡ后，可表达大量电压依赖性钾离子通道。在此基础上，我们进一步发现，一个特定序列的寡核着酸能专一地抑止该通道的表达。由于我们设计与合成的该片段与果蝇、小鼠中已克隆的钾通道中编码Ｎ端的一个多肽的ｍＲＮＡ完全互补，因此推测：鲫鱼视网膜中的Ｋ＋通道基因这个区域与其它物种的Ｋ＋通道有高度同源性，这为克隆该基因和研究它的功能提供了重要资料。

精氨酸加压素（AVP）的衍生物AVP4-8不能作用于AVPV1a受体而诱发电流反应

在微量注射大量肝脏ｍＲＮＡ之后，通过电压箝方法进行功能鉴定，两栖类卵母细胞成功地表达了ＡＶＰＶ１ａ受体。但在灌流ＡＶ４－８溶液时，却不能诱导卵母细胞产生内向振荡电流反应。提示ＡＶＰ４－８不能通过ＡＶＰＶ１ａ受体而介导生理学效应。

色觉的分子基础

视觉的一个重要功能是对颜色的分辨。60年代以来,对色觉的研究已取得许多进展,Young-Helmholtz三色理论的细胞基础已经奠定。应用眼底反射术在人的视盲膜已鉴定了三种视锥(细胞)色素,即红敏、绿敏、蓝敏色素;并证明红色盲者缺少红色素,绿色盲者缺少绿色素。微分光光度术分析表明。

精氨酸加压素(AVP)的衍生物AVP_(4-8)不能作用于AVPV_(1a)受体而诱发电流反应

在微量注射大量肝脏ｍＲＮＡ之后，通过电压箝方法进行功能鉴定，两栖类卵母细胞成功地表达了ＡＶＰＶ１ａ受体。但在灌流ＡＶ４－８溶液时，却不能诱导卵母细胞产生内向振荡电流反应。提示ＡＶＰ４－８不能通过ＡＶＰＶ１ａ受体而介导生理学效应。

20例藏族人mtDNA多态性的研究

本文通过对20例藏族产妇胎盘线粒体DNA(mtDNA)限制性类型的分析,发现藏族mtDNA是高度多态的,其每个核苷酸位点的平均替换率为0.035,比世界上迄今所报道的值都大。

中华大蟾蜍卵母细胞质膜的外向整流型钾离子通道

我们用电压箝方法研究了中华大蟾蜍卵母细胞的膜生理特性。发现卵母细胞膜去极化至-30mV及更偏正时,有一持续的外向电流出现,该电流与去极化程度约呈正比增加,当膜电位箝在20mV时其峰值达3.7±1.4μA。该电流被钾离子通道拮抗剂TEA和4-AP抑制,TEA半抑制浓度为2.6mmol/L。氯通道拮抗剂9-AC(2.5mmol/L)无抑制作用。无钙的或钙离子浓度增加三倍的胞外灌流液均对该电流无影响、该外向电流的逆转电位随胞外钾离子浓度的改变而变化。胞外钾离子浓度增加十倍,逆转电位约增加47.3mV,而胞外钠、钙或氯离子浓度的改变对逆转电位基本上无影响,因此该电流可被认为主要是电压依赖性钾离子流。取自冬眠蟾蜍的卵母细胞经孕酮诱发成熟后,电压依赖性钾离子流减小,仅为原来的1/20-1/30,而取自全年在高温饲养的蟾蜍的卵母细胞经孕酮处理后未见成熟,其电压依赖性钾离子流仅减小至原来的三分之一。

大鼠脑mRNA在爪蟾卵母细胞内表达的电压门控钙通道的电压箝研究

本工作用电压箝记录方法研究了爪蟾卵母细胞经注射大鼠脑mRNA后表达的电压门控钙通道。钙通道的特性由通过钙通道的钡离子流(I_(Ba))来描述。本研究采用的卵母细胞均取自被鉴定的爪蟾。这些爪蟾卵母细胞内源性I_(Ba)大多为零,或小于15nA。将从出生后10d的大鼠全脑中提取的mRNA微量注入这些卵母细胞。在注射mRNA后的5d内,I_(Ba)逐渐增大。在mRNA注射后第三天,由大鼠脑mRNA表达的电压依赖性I_(Ba)最大值一般超过100nA。作为对比,在注射从胚胎大鼠脑提取的mRNA的卵母细胞,几乎测不到电压依赖性I_(Ba)的表达。我们研究了由大鼠脑mRNA表达的I_(Ba)的电压依赖性激活及失活特性和I_(Ba)的药理。发现镧系金属离子(La^(+3),Nd^(+3),Sm^(+3),Eu^(+3),Gd^(+3),Dy^(+3),Er^(+3)在微摩尔浓度数量级即能有效抑制I_(Ba)。L-型钙通道配体nifedipine和Bay K 8644在浓度100μmmol/L时,抑制I_(Ba),而另一dihydropyridine类配体(±)-nimodipine在相同浓度却增加I_(Ba)。

锌离子在神经系统内的分布及其功能研究进展

神经系统内Zn2＋主要位于端脑边缘系统、尾壳核及大脑皮层，并呈亚区分布。端脑内含Zn2＋纤维系统形成庞大网络，使得同型皮质、异型皮质和边缘系统相互联系。突触囊泡内与谷氨酸共存并以Ca2＋依赖性和脉冲依赖性方式释放的Zn2＋可被组化方法原位检出（约占含Zn2＋总量的10％）。神经系统内Zn2＋的主要功能可能与神经递质的贮存、神经系统发育以及神经兴奋性的调节有关。

鲫鱼脑氨基酸类神经递质受体在两栖类卵母细胞中的表达

两栖类卵母细胞表达系统经注射鲫鱼（Ｃａｒａｓｓｉｕｓｃａｒａｓｓｉｕｓ）脑ｍＲＮＡ后可表达多种神经递质受体和某些离子通道。本工作利用电压箝方法结合药理学手段对ＧＡＢＡ受体和谷氨酸离子型受体作了较详细的研究。结果表明，由ＧＡＢＡ诱发的电流反应中，约９０％由ＧＡＢＡＡ受体介导，剩余约１０％的成分对ＧＡＢＡＡ受体的专一性拮抗剂Ｂｉｃｕｃｕｌｌｉｎｅ不敏感，而ＧＡＢＡＢ受体的专一性激动剂Ｂａｃｌｏｆｅｎ不能引起电流反应，因此这部分受体特性与ＧＡＢＡＣ受体相似。表达的谷氨酸受体包括离子型受体和代谢型受体。离子型受体中除了少量ＮＭＤＡ受体，绝大部分属ＫＡ／ＡＭＰＡ受体亚型。在研究谷氨酸受体各种激动剂的相互作用时，发现ＮＭＤＡ能竞争性地压抑由ＫＡ诱发的电流，提示ＮＭＤＡ可能是ＫＡ／ＡＭＰＡ受体的弱拮抗剂。

Zn^(2+)对爪蟾卵母细胞表达鲫鱼脑GABA受体的调制作用

爪赡卵母细胞注射鲫鱼（Caressescaresses）脑mRNA后表达的CABA受体中约85％为GABAA受体。约15％的成分为GABAC受体。本文利用双电极电压箝方法结合药物灌流研究了Zn2＋对这两型受体的作用。我们观察到Zn2＋对它们的调制都是抑制性的、可逆的。然而，与GABAA受体相比，GABAC受体对Zn2＋不太敏感。其中Zn2＋抑制鲫鱼脑GABAA受体的IC50＝48．4±10．1μmol／L，而它调制GABAC受体的IC50却高达255．6±21．5μmol／L。

GABAc受体研究的最新进展

GABAc受体是一类新型的GABA受体，其药理学性质及电生理特性与已知的GABA受体的两型：GABAA及GABAB有显著差异。现论述GABAC经体的分子结构、调控因子及药理性质等方面取得的最新进展.

鲫鱼、牛蛙、鸡和大鼠视网膜锌离子分布的光镜观察

本文应用neo-Timm染色技术研究了鲫鱼、牛蛙、鸡和大鼠视网膜内锌离子的分布状况。结果发现上述动物视网膜内均存在锌离子。锌离子位于视网膜光感受器的内段、外网层、双极细胞、无长突细胞和神经节细胞等处。鲟鱼视网膜的部分光感受器胞体锌离子染色阳性。此外，牛蛙、鸡和大鼠等动物视网膜内同层锌离子亦呈弥漫性着色。提示在较高等动物作为神经调质的锌离子对视网膜神经无视觉信号的传导与调制可能具有更为广泛的意义。

鲫鱼视网膜锌离子分布的光、电镜观察

本文应用ｎｅｏＴｉｍｍ染色法，观察了鲫鱼视网膜内锌离子的分布情况以及明、暗适应条件下鲫鱼视网膜内锌离子分布的变化。结果发现：明适应条件下，外网层、部分光感受器、双极细胞、无长突细胞以及神经节细胞胞体锌离子着色明显。含锌光感受器和双极细胞的突起伸入外网层。暗适应条件下，外网层锌离子染色减弱抑或消失（Ｐ＜００１）。外核层胞体锌离子染色阴性，少数散在分布的视锥细胞呈锌离子阳性。上述资料提示，明适应条件下外网层视觉通路１、２级神经元之间突触组构区存在锌离子，并在暗适应条件下释放，为锌离子在视网膜内信号调制中起重要作用提供了形态学证据。

鸡视网膜MEL受体的表达及部分电生理、药理特性的研究

褪黑激素（ＭＥＬ）是松果体和视网膜分泌的一种重要内分泌激素，它参与生物季节周期昼夜节律，视网膜信号调制及其他多种重要生理功能的调节。关于鸟类视网膜中ＭＥＬ受体的定位和亲和性类型的研究已有报道，然而由于所用方法的限制，对它的电生理特性知之甚少。我们首次成功地在爪蟾卵母细胞上表达了鸡视网膜ＭＥＬ受体，并利用双电极电压箝技术及常用的药物灌流的方法研究了它的部分电生理、药理学特性。我们发现，这种表达的ＭＥＬ受体是高度敏感的，１ｐｍｏｌ／Ｌ的ＭＥＬ即可诱导出一个振荡型的内向电流，该电流很难失敏，反转电位接近－２６ｍＶ，可被高浓度的氯通道阻断剂９－ＡＣ明显抑制，亦可被钙离子螯合剂如ＢＡＰＴＡ－ＡＭ阻断。这些证据提示，这种表达的ＭＥＬ受体是通过激活钙依赖的氯离子通道而起作用。由于该电流不受咖啡因的影响，与目前已表达出的哺乳动物及鸡脑的ＭＥＬ受体有明显的差异。此外，该电流还可受到锌离子的调制。这些工作为今后研究的深入创造了良好条件。

神经系统基因表达的单细胞分析

神经系统基因表达的单细胞分析宋萍包永德（中国科学院上海生理研究所，上海２０００３１）关键词单细胞分析ＲＴ－ＰＣＲ神经元某种神经元区别于非神经元以及其它类型的神经细胞的各种性质反映出在基因表达方式上必然存在着某些特异性的差别［１］。现代神经生物学中亟待...

固定三角形内插入一点的测边网条件式分析

固定三角形内插入一点的测边网,按条件平差法进行平差计算时,可列出图形条件方程式,也可列出固定角条件方程式,文章分析了两种条件式之间的关系,从理论上证明了不同条件式的替代方法,从而使平差计算更为简单。

鸡视网膜谷氨酸受体和GABA受体在两栖类卵母细胞中的表达

本工作利用两栖类卵母细胞作为功能表达系统，对鸡视网膜中的谷氨酸受体和ＧＡＢＡ受体的类型和基本性质进行了研究。在注射鸡视网膜ｍＲＮＡ的卵母细胞上，谷氨酸受体有明显的表达。Ｌ－Ｇｌｕ及其类似物ＫＡ，ＡＭＰＡ，ＱＡ都毫无例外地能诱导卵母细胞产生快速平滑的去极化电流，而ＮＭＤＡ，Ｌ－ＡＰ４，ＡＣＰＤ以及天冬氨酸不能诱导明显的电流反应。并且ＡＭＰＡ，ＱＡ对ＫＡ反应存在一定的抑制作用，提示ＡＭＰＡ，ＱＡ可能与ＫＡ作用于同一受体。抑制性氨基酸ＧＡＢＡ的受体被证明大部分为ＧＡＢＡＡ亚型，但有小部分的ＧＡＢＡ反应不能为荷包牡丹碱（ｂｉｃｕｃｕｌｌｉｎｅ）所阻断。

褪黑激素及其受体的研究进展

褪黑激素（MEL）具有许多重要的生理作用，近年，有关的研究日益广泛和深入，本文就MEL受体cDNA的克隆、结构、分型、分布以及MEL的药理特性、作用机制和在视觉中的作用等方面的研究近况作一简要综述。

反义寡聚核苷酸:生理学研究中的新工具

反义寡聚核苷酸（antisenseoligonucleotide,AS-ON）通常是指与体内某RNA或DNA序列具有互补顺序，并能通过碱基配对与互补链杂交，从而影响其转录或翻译过程的核酸片段。AS-ONs技术的近来应用为生理学研究开辟了一条新路，对将来了解基因的功能提供了一种新手段。本文综述了AS-ONs的设计策略、作用机理、修饰和导入方式等基本问题，旨在对AS-ONs的应用提供参考。