猴头菇益生菌发酵对小鼠酒精性胃溃疡的保护作用

该实验采用保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、醋酸菌3种菌种发酵猴头菇,通过比较发酵液的DPPH自由基清除率,确定猴头菇发酵的最优条件。用猴头菇益生菌发酵液对酒精性胃溃疡模型的小鼠进行灌胃,测定胃溃疡小鼠胃组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)和血清中炎症因子白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果表明,最佳发酵条件为起始pH值6.5、菌种复配比(保加利亚乳杆菌:嗜热链球菌:醋酸菌)1:1:1、接种量8.8%、发酵温度37.5℃、发酵时间27 h,发酵液菌落数为8.72×10^(9) CFU/mL、发酵液的DPPH自由基清除率可达79.59%。与模型组相比,高剂量组小鼠胃组织的SOD和CAT水平分别升高了71.38%和99.89%、MDA含量降低了47.45%;小鼠血清中的炎症因子TNF-α和IL-6含量分别降低了32.66%和34.95%、IL-10含量升高了100.46%,表明猴头菇益生菌发酵液对小鼠的急性酒精性胃溃疡有保护作用。该研究为猴头菇的应用提供了理论支持,为猴头菇新产品的开拓和益生菌的开发提供理论基础。

黄精总皂苷提取工艺优化及其对α-淀粉酶及α-葡萄糖苷酶抑制活性

以黄精总皂苷得率为评价指标,通过单因素试验对纤维素酶添加量、果胶酶添加量、料液比、酶解pH、酶解温度以及酶解时间进行研究,采用响应面对提取条件进行优化,并以阿卡波糖为阳性对照,探究不同浓度下黄精总皂苷的α-淀粉酶及α-葡萄糖苷酶抑制活性。结果表明,最佳提取条件为:纤维素酶添加量0.4%、果胶酶添加量5.0%、料液比1∶16 g/mL、酶解pH为5.0、酶解温度45℃、酶解时间2.0 h,总皂苷得率4.06%。当黄精总皂苷浓度为3.000 mg/mL时,其对α-葡萄糖苷酶最高抑制率可达74%,接近于阿卡波糖(0.5 mg/mL)的82%;当黄精总皂苷浓度为2.000 mg/mL时,其对α-淀粉酶最高抑制率可达82%,超过阿卡波糖(0.5 mg/mL)的80%。本研究使用的复合酶法提高了黄精总皂苷得率并证实了其具有一定的α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制活性。

微生物法提取黄精多糖及体外降脂功能评价

【目的】提高黄精多糖(Polygonatum sibiricum polysaccharide,PSP)的提取含量。【方法】利用微生物发酵技术,以原料添加量、葡萄糖添加量、接种量、发酵时间和发酵温度为考察因素,以黄精提取液中多糖含量为指标,在单因素实验基础上采用响应面法Box-Behnken试验设计(BBD)优化黄精多糖提取工艺的最佳工艺参数,并且对比热水浸提法、超声波辅助提取技术和微生物发酵技术3种提取方法对黄精多糖的提取含量及胆固醇和胆酸盐结合量的影响。【结果】发酵时间为26 h,原料添加量为4%,葡萄糖添加量为0.4%,接种量为7%,利用微生物发酵技术提取黄精多糖的提取含量可达33.11%。体外结合试验结果显示,微生物发酵技术提取的黄精多糖的牛磺胆酸钠、胆固醇(pH值为7)结合量分别为297.10±0.71、96.58±0.48 mg/g,均显著高于其他两种方法(P<0.05)。【结论】微生物发酵技术提取效果更好,说明黄精多糖具有较好的胆固醇及胆酸盐吸附能力,可作为天然降脂成分开发利用。

高产维生素K2菌株的选育及发酵条件优化

为了提升纳豆芽孢杆菌发酵过程中维生素K_2(VK_2)的产量,以纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto)SD-3为出发菌株,采用化学和物理的诱变方式,构建高产VK_2的营养缺陷型菌株。首先对纳豆芽孢杆菌SD-3进行硫酸二乙酯(DES)诱变和紫外诱变,以SD-3的致死率为诱变标准做单因素试验得到诱变条件。然后多次连续筛选并检测菌体发酵液中VK_2的含量,最后通过响应面分析法对发酵条件进行优化。实验结果获得1株具有分枝酸-Trp/Phe/Tyr代谢途径,Phe-和Trp-合成缺陷的双重营养缺陷型VK_2高产菌株PT-6;其VK_2的平均产量达到40.23 mg/L,得到诱变条件为:紫外照射距离为25 cm,照射时间为50 s,2%DES,反应60 min;最佳发酵条件为:装液量64 mL,接种量3%,温度38℃,VK_2含量最终达到51.23 mg/L。VK_2的最终产量相较于初始菌株SD-3提高了134.35%。

松仁肽及其Zn^(2+)螯合物的分离纯化、结构表征的对比分析

探究在相同条件下制备得到的松仁肽与其Zn2+螯合物的分离纯化、结构表征,对比分析两者的结构区别及抗氧化能力的变化。采用超滤过滤、葡聚糖凝胶Sephadex G-50和Sephadex G-15分离的方法进行分离纯化;用氨基酸组成、紫外扫描光谱、傅里叶红外光谱、能谱的分析测定结构表征。分离纯化得到抗氧化能力最强的组分P-4-1和P-Zn-3-1,并对该组分进行结构分析。松仁肽与松仁肽-锌螯合物的氨基酸组成分析可得出氨基酸质量分数在螯合前后有所变化。其中天冬氨酸的质量分数由6.306%上升至12.083%,谷氨酸的质量分数由14.953%上升到16.076%。紫外扫描得出松仁肽吸收峰为220 nm,Zn^(2+)螯合物的吸收峰为240 nm,发生了红移。红外扫描显示出螯合前与螯合后的透射率、吸收峰和吸收强度均有所变化。在能谱分析中,根据不同元素的能量来辨别不同物质的元素组成,得出的能谱结果显示螯合前无Zn^(2+)的能量柱,螯合后出现Zn^(2+)。通过对比分析可知抗氧化能力最强的2个组分结构表征有明显的区别,并且与Zn^(2+)螯合后的松仁肽抗氧化能力高于未螯合的松仁肽,由此可以推断有Zn^(2+)参与的螯合反应会对松仁肽的抗氧化能力有所影响。