大鼠肝脏冷/热缺血再灌注损伤钠钾ATP酶、钙ATP酶及镁ATP酶与肝细胞死亡方式的研究

目的 :研究肝脏冷 /热血再灌注损伤条件下 ,钠钾ATP酶、钙ATPATP酶及镁ATP酶活性与细胞凋亡和胀亡的关系 ,并探讨减少此类损伤的途径。方法 :建立大鼠肝门部分阻断热缺血 1h再灌注模型及大鼠原位肝移植冷缺血 1h再灌注模型 ,分别于再灌注 0h、1h、12h和 72h处死取材 ,测定肝细胞钠钾ATP酶、钙ATP酶及镁ATP酶活性。用形态学及AnnexinV、PI双染法流式细胞仪定量测定早期细胞凋亡和胀亡百分数。结果 :与对照组相比 ,冷 /热缺血 1h(再灌注 0h)后钠钾ATP酶、钙ATP酶及镁ATP酶活性均持续显著下降 ,再灌注 1h达低谷。但热缺血再灌注后 72h钠钾ATP酶活性恢复 ,钙ATP酶及镁ATP酶活性仍未恢复。冷缺血再灌注后 12h钙ATP酶先恢复活性 ,72h钠钾ATP酶、镁ATP酶活性才恢复。细胞死亡方式 :①冷缺血再灌注损伤 ,细胞死亡以凋亡为主 ,并于再灌注后 12h后到顶峰。②热缺血 1h胀亡细胞显著增多 ,再灌注 1h后减少 ,细胞死亡方式转为以凋亡为主。结论 :肝脏冷 /热缺血再灌注损伤均能导致 3种ATP酶活性下降 ,细胞内离子浓度失衡 ,热缺血期ATP酶活性严重下降 ,细胞死亡 ,以胀亡为主。冷缺血期ATP酶轻度下降 ,细胞死亡以凋亡为主。术前或术中给予能量物质 ,对提高钠钾ATP酶、钙ATP酶及镁ATP酶活性 ,减轻炎症反应 ,延长肝门阻断?

中国高速铁路运输组织模式研究

通过对内涵和影响因素的分析,将高速铁路运输组织模式概括描述为在一定的运营管理体制、一定社会经济和科技发展水平、一定的路网功能结构条件下,高速铁路所承担列车的组织方法,并按此对高速铁路运输组织模式进行了分类。本文以中国2012年4月以前所开通的高速铁路为例,对中国高速铁路的运输组织模式进行了分析,将其归纳为四种类型;并与国外典型国家高速铁路运输组织模式进行了对比。结合国外经验以及中国的国情路情,提出了与中国高速铁路相适合的运输组织模式——不同性质(不同速度、不同停站、本线和跨线、旅客和货物)列车共线运行的运输组织模式。

结直肠癌患者手术前后肠道菌群与正常人群的比较

目的探讨结直肠癌患者手手术前后肠道菌群与正常人群菌群差异。方法结直肠癌手术病理证实患者15例按术前术后分组,对照组为正常人群15例。晨起排便,37℃培养,分别对各菌株进行鉴定,按平板活菌计数法计数,并进行比较。结果对照组与术前、术后组比较:术前、术后组大肠杆菌显著增加;双岐杆菌,双歧杆菌/大肠杆菌比值显著减少。术前组与术后组比较:术后组大肠杆菌显著增加,双歧杆菌/大肠杆菌比值显著减少。结论结直肠癌患者术前即存在大肠杆菌显著增加,双歧杆菌减少,术后更加明显。加强对结直肠癌患者肠道菌群易位的研究,采取相应的措施,可能对结直肠癌的防治具有重要的意义。

大鼠肝移植缺血再灌注损伤对肝细胞凋亡、胀亡及再生的影响

目的 :通过对大鼠原位肝移植缺血再灌注损伤所致肝细胞两种细胞死亡方式的动态研究 ,结合细胞再生情况 ,探讨减轻此类损伤的途径 .方法 :SD大鼠随机分为 5组 ,对照组 (n =5 )麻醉后开腹取材 ;其余 4组 (n =4 0 ,每组 5对 )建立大鼠同种异体原位肝移植模型 ,分别于术后 0、 1、 12和 72h取材 .(1)流式细胞仪上机检测AnnexinV与碘化丙锭混匀双染色的肝细胞 ,计数正常、胀亡、凋亡、坏死 4种细胞百分数 ;(2 )流式细胞仪检测G1期、S期、G2期肝细胞 ,计算增殖指数 .结果 :与对照组比较 ,供肝冷缺血 1h后凋亡细胞显著增多 ,再灌注后继续增多 ,并于 72h逐渐下降 ;坏死和胀亡细胞变化不大 .G2期细胞、增殖指数于再灌注后显著增加 ,在 72h仍处于高峰 .结论 :肝移植过程中细胞凋亡是肝细胞死亡的主要形式 ,肝移植后存在细胞增殖 ,增强肝细胞的再生能力也是减轻损伤的一种途径 .再灌注期凋亡的作用和机制均值得进一步研究 .

长大坡道货物列车下坡限速检算分析

合理的下坡限速可以保证列车在长大下坡道上安全运行，并能充分发挥铁路的运输能力。文章分析了现行TG／01—2014（铁路技术管理规程》中制动摩擦材料及闸瓦压力的变化情况，综合考虑列车常用制动限速和紧急制动限速的影响，采用合力分析法和分段累加法，计算得出列车在21‰～33‰坡度下的下坡限速。研究发现当列车常用制动系数取为0．6时：（1）21‰-29‰坡道下的下坡限速由紧急制动限速决定，下坡限速值随坡度值的增加而递减，坡度每增加1‰，限速值减少1km／h；（2）30‰～33‰坡度下的下坡限速由列车常用制动限速决定，下坡限速值随坡度值的增加而急剧递减，坡度每增加1％o，限速减少10km／h。研究结论对长大坡道线路设计具有一定的借鉴意义。

老年自身免疫性肝炎的临床及病理特点

目的分析老年人自身免疫性肝炎(AIH)的临床及病理特点。方法回顾性分析45例AIH患者临床及病理资料,比较老年患者(11例)和中青年患者(34例)的临床表现及肝穿病理学等特征。结果中青年组及老年组AIH均以女性为主,老年组伴发其他自身免疫性疾病者更多见;老年AIH患者临床症状不典型,生化检查发现ALT升高并不明显;球蛋白升高,以IgM升高为主。病理组织学上,AIH患者有界面炎、肝小叶内炎症重、胆管破坏不明显和不同程度纤维化三个特点。老年组患者病理上多为晚期表现。结论老年人AIH临床表现更加缺乏特异性,确诊时间更晚,危害更加严重。对未以AIH典型症状就诊的老年患者应常规行肝功能、免疫功能及自身免疫性肝病抗体检测甚至肝穿活检,以提高老年人AIH的诊断率,尽早治疗干预。

实时荧光定量PCR在测定艾滋病患者肠道菌群量变化中的应用及意义

目的:应用实时荧光定量PCR观察艾滋病患者肠道菌群量的变化,研究艾滋病对肠道微生态的影响及其在发病中的作用。方法:分别设计双歧杆菌属、乳酸杆菌属、大肠杆菌、粪肠球菌及屎肠球菌的特异性引物。收集艾滋病患者粪便标本30份及正常对照标本30份,提取细菌基因组DNA,应用实时荧光定量PCR反应测定5种细菌的数量。结果:艾滋病患者组双歧杆菌属、乳酸杆菌属的数量较正常对照组明显减少;大肠杆菌、粪肠球菌、屎肠球菌数量明显增多,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:艾滋病患者肠道微生态发生了明显变化,提示艾滋病患者肠道微生态紊乱。

肠内营养对AIDS患者肠屏障功能影响的研究

艾滋病是由人类免疫缺陷病毒引起的慢性消耗性疾病^[1]。是人类最严重的传染病之一。云南是中国HIV感染发现最早．流行最为严重的地区之一^[2]。部分地区出现高流行趋势^[3]。艾滋病患者常因腹泻和营养不良，导致肠道屏障功能损坏．细菌及内毒素移位，易出现各种复合感染；肠内营养不但能补充AIDS患者营养的不足，还能增强AIDS患者的营养吸收川，

腹部手术后早期炎性肠梗阻的营养支持治疗体会

腹部手术后早期出现肠梗阻是常见的外科术后并发症,而手术后早期炎性肠梗阻(early postoperative inflammtory small bowel obstraction,ERISBO)是其中的一种特殊类型,约占术后肠梗阻的20%.其一般发生于腹部手术后早期(术后1~3周).

结肠癌手术对肠道菌群微生态的影响

目的观察结肠癌手术处理对肠道菌群微生态的影响。方法收集手术前后结肠癌患者的粪便标本60份,采用实时荧光定量PCR法检测肠道拟杆菌属、梭杆菌属及梭菌属量的变化。结果手术前后粪便中细菌数量分别为:拟杆菌属(9.64±0.58 vs.6.21±0.37),梭杆菌属(9.87±0.72 vs.6.36±0.68),梭菌属(7.01±0.37 vs.5.30±0.29);拟杆菌属中的脆弱拟杆菌为(5.92±0.24 vs.3.24±0.78),梭杆菌属中的坏死梭杆菌为(7.12±0.97 vs.3.70±1.21),梭菌属中的肉毒梭菌为(5.68±0.36 vs.1.52±1.06),艰难梭菌为(3.45±0.38 vs.1.42±0.25)。术后患者粪便中细菌数量明显低于术前,P均<0.05。结论结肠癌患者粪便中拟杆菌属、梭杆菌属和梭菌属术后数量较术前明显降低,提示手术对肠道菌群有一定抑制。

原发性胆汁性肝硬化患者血清抗GP210和抗SP100检测的临床意义

目的研究抗GP210和抗SP100检测诊断原发性胆汁性肝硬化(PBC)的临床意义。方法采用免疫印迹法检测118例自身免疫性肝病患者血清抗GP210和抗SP100。结果 71例PBC和47例非PBC患者两抗体阳性率无显著性差异;在PBC患者,抗GP210、抗SP100和两抗体同时阳性诊断的特异性分别为40.2%、76.6%和82.4%,敏感度分别为26.8%、11.2%和10.2%;不同病理分期PBC患者血清抗体阳性率无显著性差异(P>0.05)。结论抗GP210和抗SP100的检测并不能提高诊断PBC的效能。

大肠癌患者与正常人肠道菌群的比较研究

目的比较大肠癌患者与正常人的肠道菌群不同点,为大肠癌的防治提供新的思路.方法大肠癌(包括结、直肠癌)患者镜检取材、病理证实患者30例,正常对照组人群30例,所选病例为正常人群、大肠癌患者手术前未做肠道准备,晨起排便.稀释性平板菌落计数法+快速细菌鉴定法:取材,定量,稀释,37℃分别做厌氧、需氧培养,涂片镜检,然后分别对各菌株进行鉴定并按平板活菌菌落计数法计数.结果正常对照组与实验组比较结果:大肠癌患者组大肠杆菌、粪肠球菌计数显著增加;双歧杆菌,乳酸杆菌、类杆菌(弯曲杆菌)计数显著减少.结论大肠癌患者存在大肠杆菌、粪肠球菌数量增加;双歧杆菌,乳酸杆菌、类杆菌(弯曲杆菌)数量减少.加强对大肠癌患者肠道菌群数量改变(失调)的研究,并采取相应的对策、措施,可能对大肠癌的防治具有重要的意义.

艾滋病科研设计的伦理思考

艾滋病严重地影响着人类的健康及生活质量,艾滋病相关因素的研究迫在眉睫,其科研中包含着一系列的伦理问题,如艾滋病患者的依从性问题,艾滋病患者进行试验研究的双盲、随机、对照等原则问题及艾滋病患者科研相关质量问题。要深刻地理解和认识这些伦理问题,在艾滋病科研设计中注意理解和尊重受试者,制定出有效而合乎伦理的科研政策,加强交流,从而得到艾滋病患者和家属以及社会的认同,以有利于在不同范围内进行科研合作。

实验性肝硬化大鼠纹状体中神经元及一氧化氮合酶的研究

目的:观察肝硬化大鼠脑纹状体中神经元的变化及一氧化氮合酶(NOS)的表达,探讨纹状体神经元的形态学改变及一氧化氮(NO)在肝硬化和肝性脑病发病机制中的作用。方法:建立CCI4肝硬化模型,用尼氏染色法观察纹状体中神经元的变化,经烟酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶(NADPH-d)染色法观察纹状体NOS阳性神经元的变化;用图像分析仪对纹状体神经元进行光密度及数目测定,同时对纹状体NOS的表达程度和数目进行定量分析,并与对照组相比较。结果:肝硬化模型制备成功。肝硬化时纹状体神经元光密度值变小(实验组0.67±0.04,对照组0.78±0.06),数目减少(实验组12.0±3.1,对照组19.7±5.4),纹状体NOS表达增强(阳性神经元平均灰度:实验组148.0±12.1,对照组172.0±10.7;阳性细胞数:实验组14.80±2.59,对照组8.96±1.71)。结论:肝硬化大鼠纹状体中神经元数目减少,尼氏体减少、消失可能是肝硬化并发肝性脑病,尤其是以运动异常为主要表现的肝性脑病的重要组织学基础之一;NO可能介导了神经元的损伤,并参与了肝硬化和肝性脑病的发病。

Fogarty取栓管联合导尿管在细肝外胆管结石手术中的临床应用

目的探讨Fogarty取栓管联合导尿管在细肝外胆管结石手术中的临床价值。方法对25例胆囊结石合并肝外胆管结石患者,实施开腹胆囊切除,胆总管切开Fogarty取栓管联合导尿管取石,T管引流术。结果 25例手术均获成功,无并发症发生,手术时间100～150 min,平均125 min,术中出血量80～150 ml,平均100 ml,住院时间6～15 d,平均8 d。结论 Fogarty取栓管联合导尿管在细肝外胆管结石手术中的临床应用是安全、有效、经济、可行的,值得推广应用。

高脂饮食对结肠癌肝脏转移的影响及作用机制

目的探讨高脂饮食对结肠癌肝脏转移的影响及其作用机制。方法30只NSI第三代免疫缺陷裸鼠脾脏种植结肠癌细胞DLD1构建移植瘤裸鼠模型,分别喂养普通饲料(对照组)、高脂饲料(高脂饮食组)和高脂饲料并腹腔注射CXCR4拮抗剂AMD3100(高脂饮食+AMD3100组),每组10只。12周后颈椎脱臼处死,称量各组裸鼠体重、肝脏重量,统计肝脏中肿瘤转移灶数目,并采用Western blot和RT-qPCR检测肿瘤组织中SDF-1、CXCR4的蛋白和mRNA表达水平。结果12周后,高脂饮食组裸鼠体重、脂肪重量、肝脏重量及血清瘦素浓度高于对照组和高脂饮食+AMD3100组(P<0.05)。对照组、高脂饮食组和高脂饮食+AMD3100组裸鼠发生肝脏转移的比例分别为30.0%、80.0%和40.0%。高脂饮食组裸鼠的肿瘤体积及肝脏转移灶数量均明显高于对照组[(3.83±0.42)mm3vs(1.00±0.15)mm3,P<0.001;(4.33±0.58)个vs(1.33±0.58)个,P=0.002]和高脂饮食+AMD3100组[(3.83±0.42)mm3vs(1.96±0.15)mm3,P<0.001;(4.33±0.58)个vs(2.33±0.58)个,P=0.002]。Western blot和RT-qPCR检测结果显示,高脂饮食组结肠癌组织中的SDF-1、CXCR4的蛋白和mRNA表达水平均较对照组和高脂饮食+AMD3100组明显上调(均P<0.05)。结论高脂饮食可通过促进结肠癌癌组织中SDF-1和CXCR4的表达水平而增强结肠癌的肝脏定向转移。

腹腔镜结直肠癌手术应用快速康复外科与传统方法对比80例

结直肠癌是人类常见的恶性肿瘤之一,其发病率居全球恶性肿瘤第三[1],在西方国家居第二,亚洲国家发病率在持续上升[2]。腹腔镜结直肠癌手术具有出血少、切口小、创伤小、视野好、恢复快。

手术处理对结直肠癌患者肠道菌群变化的临床研究

目的探讨结直肠癌手术处理对肠道菌群变化的影响,为临床治疗提供理论依据。方法收集手术前后结直肠癌患者粪便标本50份及正常对照标本50份,应用SYBRGreenI实时荧光定量PCR反应测定不同细菌的。结果正常对照组,手术前、后实验组粪便中细菌数量分别为双歧杆菌(8.85±0.57、5.22±0.45、0.47±0.28)、乳酸杆菌(8.06±0.654.86±0.38、3.52±0.26),手术前、后实验组数量较正常组明显减少(P<0.05),以术后为甚。大肠杆菌为(5.46±0.48、6.57±0.85、4.83±0.47),粪肠球菌为(5.98±0.44、9.76±0.67、2.38±0.14),屎肠球菌为(4.79±0.69、6.88±0.35、1.45±0.19),拟杆菌为(7.98±0.84、9.12±0.53、5.83±0.54),梭杆菌为(8.12±0.78、9.67±0.82、5.41±0.59),梭菌为(5.16±0.55、7.01±0.43、4.42±0.48),术前实验组数量较正常组明显增多(P<0.05),术后实验组数量较术前明显减少(P<0.05)。结论结直肠癌患者手术处理可引起肠道菌群失调,可能与结直肠癌的复发和发展有关,应重视围手术期肠道菌群的微生态调理。