骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠慢性阻塞性肺疾病

目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠的治疗作用。方法:健康雄性SD大鼠,随机分成3组,正常对照组、模型组和治疗组。通过烟熏法建立COPD模型后,大鼠尾静脉注射BMSCs进行生物治疗。应用细胞膜荧光染料PKH26标记的BMSCs回输大鼠体内,制作肺组织冰冻切片,在荧光显微镜下观察BMSCs是否定位于肺组织;采用硫代巴比妥酸和黄嘌呤氧化法分别检测血清和肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)和活性丙二醛(MDA)含量;收集支气管肺泡灌洗液(BALF),计数细胞总数,并进行分类;制作肺组织病理切片,观察肺组织微细结构变化并定量测定肺平均内衬间隔(MLI)、平均肺泡数(MAN)。结果:BMSCs能够归巢到COPD大鼠的肺组织并存活;BM-SCs治疗组与模型组相比,血清中SOD的活性明显增高、MDA含量显著降低(P<0.05);BALF中细胞总数明显减少,中性粒细胞总数及比例均减小(P<0.05);病理有明显的改善,MLI减小,MAN增大(P<0.05)。结论:BMSCs对COPD大鼠具有治疗作用。

三苯氧胺联合5-氟尿嘧啶对人结肠癌细胞HT-29的抑制作用

目的探讨三苯氧胺(tamoxifen,TAM)联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对人结肠癌细胞株HT-29的增殖、凋亡及细胞迁移的影响。方法采用MTT法、流式细胞仪分别检测不同浓度(12.5、25、50μmol/L)5-FU及其联合TAM对HT-29细胞增殖的抑制作用、细胞凋亡的诱导作用,应用细胞划痕实验检测TAM(1×10-7、1×10-6、1×10-5、1×10-4mol/L)、5-FU及其联合TAM对细胞迁移的抑制作用。结果 5-FU及其联合TAM均可提高HT-29细胞增殖抑制率,单用5-FU的抑制率分别为(50.8±8.9)%和(62.8±8.8)%和(69.7±9)%,12.5μmol/L 5-FU联合低浓度TAM(1×10-7、1×10-6 mol/L)的抑制率分别为(82.9±2.9)%和(84.0±1.6)%,其作用呈剂量依赖关系;高浓度(1×10-4mol/L)TAM联合12.5μmol/L 5-FU表现出明显的促细胞凋亡作用[凋亡率为(95.7±4.2)%];划痕实验证实经1×10-6和1×10-5mol/L TAM及单用5-FU处理HT-29细胞72 h后均可明显地抑制细胞的迁移,但联合用药未显示出较TAM单药更明显的抑制作用。结论 TAM和5-FU均具有抑制细胞增殖、迁移和促进细胞凋亡的作用,TAM亦可增加结肠癌细胞株HT-29对5-FU的敏感性。

影响胃肠间质瘤完全切除术后复发转移及预后的相关生物标志物研究

目的探讨影响胃肠间质瘤（GIST）完全切除术后复发转移及预后的生物标志物。方法收集1990年1月至2008年12月中山大学肿瘤防治中心148例完全切除术后的GIST标本．利用免疫组织化学技术、以组织芯片为载体，检测Ki-67、E-cadherin、MMP7、CD44、nm23、P53、Survivin、CyclinD1、COX．2和VEGF共10个生物指标，研究其表达与GIST完全切除术后复发转移和预后的关系。结果单因素预后分析（Log-rank检验）结果显示，Ki-67、E-cadherin、MMP7、CD44、P53和Survivin与GIST术后无瘤生存有关（均P〈0．05），Kj-67、E-cadherin、P53和Survivin与总体生存有关（均P〈0．05）。多因素预后分析（Cox回归模型）结果显示，Ki．67、CD44和P53是影响GIST完全切除术后复发转移的独立因素（均P〈0．05）；Ki-67是影响术后生存的独立因素（P〈0．05）。结论Ki．67、CD44和P53与GIST完全切除术后复发转移密切相关．Ki-67还能提示预后。

长链非编码RNACCAT2在结肠癌组织的表达及其意义

目的检测长链非编码RNACCAT2（1ncRNACCAT：）基因在结肠癌中的表达并探讨其表达差异与临床资料及预后的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ．PCR）的方法检测结肠癌及其癌旁正常组织中lncRNACCAT2的表达量，取中位数分为高表达组与低表达组，分析其与临床资料及病例特征的关系；应用Kaplan-Meier法分析lncRNACCAT2的表达差异与临床预后的相关性。FQ—PCR法检测结肠癌细胞中lncRNACCAT：的表达，细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测干扰lncRNACCAT：表达后结肠癌细胞增殖的变化。结果lncRNACCAT2在结肠癌中的相对表达水平为10．438±2．415，高于癌旁肠正常组织的相对表达水平（P〈0．01）；FQ-PCR高表达与肿瘤的大小、分化、血管浸润及肿瘤分期密切相关（P〈0．05）；lncRNACCAT：高表达组的中位生存时间为26个月，低表达组的中位生存时间为39个月，差异有统计学意义（P〈0．05）。lncRNACCAT2在48、72h的吸光度（A）值为0．16±0．02、0．28±0．01，均低于对照组的0．35±0．03、0．41±0．02，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论lncRNACCAT：过表达参与了结肠癌的发生和发展。