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痹肿消汤干预类风湿关节炎患者外周血单个核细胞蛋白质组学研究 被引量:6
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作者 蒋勇前 梁清华 +5 位作者 熊新贵 杨波 萧梅芳 区建刚 曾年菊 陈疆 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1160-1164,共5页
目的观察痹肿消汤干预前后的早期活动性类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)蛋白质的双向凝胶电泳(2-DE)图谱,并分析其差异表达的蛋白质,寻找RA疾病相关蛋白,探讨痹... 目的观察痹肿消汤干预前后的早期活动性类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)蛋白质的双向凝胶电泳(2-DE)图谱,并分析其差异表达的蛋白质,寻找RA疾病相关蛋白,探讨痹肿消汤治疗类风湿关节炎可能的作用机制。方法 18例早期活动性RA患者随机分为两组,治疗组9例口服痹肿消汤(白花蛇舌草25g肿节风30g丹参15g络石藤20g骨碎补15g薏苡仁30g等15味中药),对照组9例口服甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)和普威(nimesulide tablets),疗程均为3个月。9名健康成年人为正常对照组。健康成年人及RA患者治疗前后分别采血10mL,用淋巴细胞分离液分离单个核细胞,抽提外周血单个核细胞中的蛋白,采用固相pH梯度(IPG)2-DE分离正常人及RA患者PBMCs总蛋白质。凝胶经考染显色后,PDQuest图像分析软件进行比较分析、识别差异表达的蛋白质,对差异蛋白质点用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行鉴定。同时运用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法验证部分差异蛋白质。结果分别获得健康人、RA患者治疗前、后PBMCs总蛋白2-DE图谱,通过RA患者治疗前与健康人比较分析,差异表达蛋白质点数为23,选取18个点进行质谱鉴定,成功鉴定14个蛋白质,其中8个蛋白质点在RA中表达上调,6个表达下调。与对照组治疗后比较,治疗组治疗后有5个蛋白质表达差异更为明显。RT-PCR方法证实,ApoA-I在健康人、RA治疗组、对照组的表达水平与2-DE结果一致。结论 (1)RA患者PBMCs存在一些差异表达的蛋白质,这些差异蛋白质可能是RA发病的内在因素;(2)痹肿消汤可能通过对RA患者PBMCs中某些蛋白质表达的调控达到治疗目的。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 痹肿消汤 单个核细胞 蛋白质组学 双向电泳
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脑梗死急性期、恢复期患者的腺苷酸环化酶表达及意义 被引量:1
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作者 曾年菊 梁清华 +3 位作者 萧梅芳 区建刚 熊新贵 卢明 《山东医药》 CAS 北大核心 2009年第21期6-7,共2页
目的观察脑梗死(CI)急性期、恢复期患者的腺苷酸环化酶(AC)表达,探讨其不同病期的病理生理过程。方法选择CI急性期、恢复期患者各30例,健康者15例,抽取三组外周血分离淋巴细胞,抽提总RNA,用RT-PCR技术检测AC表达。结果CI急性期患者AC m... 目的观察脑梗死(CI)急性期、恢复期患者的腺苷酸环化酶(AC)表达,探讨其不同病期的病理生理过程。方法选择CI急性期、恢复期患者各30例,健康者15例,抽取三组外周血分离淋巴细胞,抽提总RNA,用RT-PCR技术检测AC表达。结果CI急性期患者AC mRNA表达缺失,恢复期患者较健康者表达降低(P<0.05)。结论CI缺血缺氧状态下机体抑制性激素可能占主导地位,与抑制型G蛋白耦联结合后抑制AC活性,降低细胞基础cAMP水平。 展开更多
关键词 脑梗死 腺苷酸环化酶 逆转录聚合酶链反应
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类风湿关节炎患者外周血单个核细胞蛋白质组学研究 被引量:3
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作者 蒋勇前 梁清华 +6 位作者 熊新贵 杨波 区建刚 曾年菊 陈疆 张花先 何金华 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 2008年第7期456-460,共5页
目的运用蛋白质组学的方法,比较正常人及早期活动性类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMCs)蛋白质的差异表达,寻找RA疾病相关致病蛋白质。方法选取9例早期活动期RA患者以及9名健康成年志愿者,用淋巴细胞分离液分离PBMCs,... 目的运用蛋白质组学的方法,比较正常人及早期活动性类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMCs)蛋白质的差异表达,寻找RA疾病相关致病蛋白质。方法选取9例早期活动期RA患者以及9名健康成年志愿者,用淋巴细胞分离液分离PBMCs,抽提PBMCs中的蛋白,采用固相DH梯度(IPG)双向凝胶电泳(2-DE)分离正常人及RA患者PBMCs总蛋白质。凝胶经考马斯亮蓝染色显色后,PDQuest图像分析软件进行比较分析、识别差异表达的蛋白质,对差异蛋白质点用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI—TOF—MS)进行鉴定,运用反转录-聚合酶链反应(RT—PCR)方法验证部分差异蛋白质。结果获得RA患者及正常人PBMCs蛋白质双向凝胶电泳图谱,平均蛋白质点数分别为556和579,匹配率分别为89.4%和88.5%,通过比较分析,差异表达蛋白质点数为23,选取18个点进行质谱鉴定,成功鉴定14个蛋白质,其中β-肌动蛋白、纤维蛋白素原β-链、载脂蛋白A—I(ApoA—I)等9个蛋白质点在RA中表达上调,硫氧还蛋白-2、谷胱甘肽S-转移酶等6个蛋白质点在RA中表达下调,这些差异蛋白质的功能涉及物质代谢、抗氧化、信号传导、能量产生及细胞骨架。并用RT—PCR方法验证差异蛋白质ApoA—I,其结果与上述蛋白质差异表达结果相符。结论在RA患者PBMCs中存在着差异表达蛋白质,这些差异蛋白质可能是RA发病的内在因素。其RT—PCR结果与蛋白质差异表达相符,证明蛋白质组研究的可靠性。 展开更多
关键词 关节炎 类风湿 单个核细胞 蛋白质组学 双向电泳
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