PBL结合Seminar模式在留学生心血管病见习中的应用

目的探索以问题为基础的教学法(problem-based learning,PBL)结合Seminar模式在留学生心血管疾病临床见习的应用效果。方法选取2020年9月—2021年9月在广州医科大学附属第二医院心血管内科见习的2016级及2017级留学生各60名为研究对象。2016级临床医学留学生作为对照组,2017级临床医学留学生作为试验组。对照组采用以教师教授为主的传统教学模式。试验组实行PBL结合Seminar模式完成心内科见习。对比学生出勤率和对课程满意度评价,教师见习评价,以及见习综合考核成绩。结果试验组学生对两种教学模式的见习出勤率、学生对课程满意度评分高于传统授课组,差异有统计学意义(P<0.05)。试验组的教师见习评价指标,包括参与程度、分析推理能力、解决问题能力、文献查阅、归纳学习能力、创新思维、沟通表达能力、团队合作能力也均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。试验组见习综合考核成绩[(89.75±3.60)分]高于对照组[(81.61±4.22)分],差异有统计学意义(P<0.001)。结论临床医学留学生采用PBL结合Seminar模式更有助于提升临床见习的学习自主能动性,有助于临床思维的培养以及心血管见习重点知识的掌握,从而提高留学生心血管病学见习的教学质量。

薤白皂苷化合物对CD40L表达及血小板中性粒细胞黏附的影响

目的探讨薤白皂苷化合物对血小板表面CD40L表达及血小板中性粒细胞黏附的影响。方法制备富含血小板血浆和中性粒细胞,用荧光实时定量PCR和玫瑰花结计数的方法检测经不同浓度薤白化合物单体预处理后血小板表面CD40L的表达及其与中性粒细胞之间的黏附性。结果在6个薤白皂苷单体化合物中,化合物1、4、6呈剂量依赖性抑制血小板CD40L的表达,并明显抑制ADP诱导的血小板与中性粒细胞之间的黏附。结论薤白皂苷化合物可能具有抗血小板相关炎症的作用。

超声联合微泡对兔股动脉血栓的促溶作用

目的探讨无溶栓药物条件下超声+微泡对血栓溶解的作用。方法建立12只兔双侧股动脉急性血栓模型,对其中6只经静脉注射白蛋白微泡,一侧动脉接受经皮超声(超声+微泡组)而另一侧接受无超声治疗(微泡组)。另外6只兔一侧动脉只接受超声治疗(超声组)而另一侧不接受任何处理(对照组)。结果单独超声治疗的6条动脉只有2条再通,接受超声+微泡治疗的6条动脉全部实现再通(P=0.014),微泡组和对照组动脉无再通。超声+微泡组动脉再通时间和残余血栓面积比值显著小于超声组(P=0.004,P=0.003 )。结论超声作用下经静脉注射微泡能有效促进在体动脉血栓溶解,这对临床急性血栓形成患者有潜在的应用意义。

血小板受体特异性微泡造影剂靶向粘附血栓的实验研究

目的构建能够靶向血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体的特异性脂质微泡,观察其对微血栓、体外人工血栓的粘附效应。方法用RGDS(Arg-Gly-Asp-Ser)耦联的方法构建靶向微泡,观察其对血小板聚集形成的微血栓的粘附效应。另在体外制作人工血栓模型,在二维超声下观察微泡造影剂对声学信号的影响。结果血小板聚集后加入经构建的靶向微泡,最后粘附在血小板微血栓周围;而加入普通微泡的对照孔则未见这种粘附效应。体外血栓模型中,未加微泡的血栓超声图像周围边界模糊,加入靶向微泡后血栓图像边界明显增强。结论血小板受体特异性靶向微泡对血栓有明显的趋附作用,并且能够增强血栓的超声信噪比。对血栓的临床诊断和治疗有潜在的意义。

超声微泡介导靶向传输基因和药物的研究进展

超声微泡造影剂经静脉注射到靶组织后 ,在超声能量作用下发生空化作用 ,能有效穿透血管内膜屏障 ,定向释放内部包裹的基因和药物 ,使局部浓度大大增高 ,达到靶向治疗的目的。脂质微泡因其壳的特性可以在其表面装配不同的配体 ,因而比白蛋白微泡有更高的传输效率。微泡可能成为靶向治疗的载体 ,但这种技术仍需做更多进一步的研究。

雌激素对血管平滑肌细胞内游离钙的调节作用

目的：动态观察雌二醇（Ｅ２）对单个血管平滑肌细胞内游离钙离子浓度及血管紧张素Ⅱ引致的细胞内钙离子浓度变化的影响，以探讨雌激素对平滑肌细胞内储存钙释放的调节作用。方法：体外培养健康雌性兔胸主动脉中层平滑肌，细胞接种在５７０型粘附式细胞仪专用的培养皿中，加入１０－５、１０－７、１０－９ｍｏｌ／Ｌ３种不同浓度的Ｅ２处理。另用３种不同浓度的Ｅ２预处理细胞１小时后，加入血管紧张素Ⅱ。实验分单纯血管紧张素Ⅱ处理组和血管紧张素Ⅱ＋不同浓度Ｅ２预处理组，用ｆｕｒａ－３法测定细胞内钙离子浓度。结果：３种浓度Ｅ２对平滑肌细胞内游离钙离子浓度的基础水平无影响，但１０－５、１０－７ｍｏｌ／Ｌ的Ｅ２预处理细胞后血管紧张素Ⅱ未能激发细胞内游离钙离子浓度升高。

基质细胞衍生因子受体在造血干/祖细胞宫内移植中的作用

目的探讨基质细胞衍生因子受体(CXCR4)在造血干/祖细胞(HSC)宫内移植归巢中的作用。方法分离人脐血CD34+细胞,用流式细胞仪检测SCF、IL-6处理前后细胞表面CXCR4(CD184)的表达及在Transwell板中的迁移率。在BALB/c胎鼠孕13～14d期间,经胎鼠腹腔注射经不同处理的CD34+细胞,胎鼠出生1个月后取骨髓,用流式细胞仪检测人CD45细胞。结果预处理后表达CD184的CD34+细胞的百分数由原来的9.58%±1.56%上升为19.32%±3.64%。CD34+/CXCR4high细胞迁移率显著增高,但迁移作用可以被antiCXCR4mAb和PTX明显抑制。SCF和IL-6预处理组胎鼠人CD45细胞阳性率显著高于其他组。抗CXCR4抗体或PTX预处理组人CD45细胞检出率显著降低。结论增加CD34+细胞CXCR4的表达有助于宫内移植HSC的归巢,HSC宫内移植归巢过程依赖CXCR4受体,SDF-1/CXCR4调节信号通过Gi蛋白进行跨膜传导。

HPLC-MS法测定大鼠血浆与组织中薤白皂苷的含量

目的：建立测定薤白皂苷在大鼠血浆及组织中浓度的HPLC-MS方法。方法：采用液相色谱/串联四级杆质谱联用仪对薤白皂苷提取物中暴露量最高的单体化合物进行检测,运用稀释比标准曲线法获取其相对血药浓度-时间曲线及相对组织药物浓度-时间曲线,计算药动学参数。结果：血浆与组织中薤白皂苷的标准曲线在0.001~1 mg/L浓度范围内线性良好,方法加样回收率为86.97%~116.25%。大鼠给予薤白皂苷提取物灌胃后,药时曲线呈双峰,达峰时间为30 min,半衰期约20 h,其在肝肾含量较其他组织为高,脑及肺组织中未检测到该药物原型。结论：所建立的HPLC-MS方法简单、专属性强,可用于大鼠血浆及组织中薤白皂苷的含量测定。

自制脂质微泡造影剂显影效果的研究

目的:以白蛋白微泡作对照,比较自制脂质微泡的心脏显影效果。方法:以胆固醇、卵磷脂为原料声振制备脂质微泡。以东冠注射液和全氟显作比较,评价自制脂质微泡左室及心肌的显影效果。经股静脉弹丸注射不同剂量的3种造影剂,剂量设置为:极高(0.225mlkg)、高(0.15mlkg)、中(0.1mlkg)、低(0.05mlkg)、极低(0.025mlkg),全氟显只设极低剂量组。比较造影前后左室腔显影等级、显影时间、左室内膜边界增强节段数及心肌显影情况。结果:脂质微泡在极低剂量组和低剂量组右室显影好,但左室显影较淡;中等剂量组的显影效果与全氟显极低剂量组及东冠注射液极高剂量组相似,但显影时间仍较全氟显短。脂质微泡心肌显影只在极高剂量组较明显。结论:以胆固醇、卵磷脂为主要成分的脂质壳含气微球能实现左室及心肌显影,有望开发出新一代的心肌声学造影剂。自制脂质微泡显影效果优于东冠注射液,但逊色于全氟显。

雌激素替代治疗与妇女更年期冠心病

目前,雌激素(E)能减少妇女冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)发病危险度的观点已被多数人接受。本文就雌激素替代治疗(ERT)与妇女更年期CHD发病关系的研究现状作一综述。许多研究发现。

浅谈现阶段内科PBL教学改革实践中教师的角色定位

PBL(Problem-Based Learning)教学的特征之一是以学生为主体,要求教师及时转变传统角色。但PBL在我国依然受许多客观因素制约,教师的作用和地位也因此有它与国外不同的特殊性。笔者根据所在院校临床医学本科心血管内科PBL教学实践经验,提出现阶段内科PBL教学中课程导师应具有符合中国国情的复合角色定位。

细胞因子短期扩增对造血干／祖细胞黏附和迁移能力的影响

目的:探讨干细胞因子(SCF)+白细胞介素-6(IL-6)短期扩增对CD34+造血干/祖细胞黏附和迁移能力的影响。方法:用密度剃度离心的方法分离脐血CD34+细胞,经SCF和IL-6孵育48 h,用CCK-8方法检测CD34+细胞增殖能力;用流式细胞仪检测处理前后的CD49d(VLA-4)、CD11 a(LFA-1)、CD62L(L-selectin)及CD184(CXCR4)的表达。用纤连蛋白(FN)包被96孔板,检测经或未经因子扩增的CD34+细胞的黏附能力。扩增的CD34+细胞悬浮于transwell培养板的上层,下层添加基质细胞衍生因子(SDF-1),流式细胞仪检测迁移细胞数,计算迁移率。结果:经SCF+IL-6处理48h后CD34+细胞扩增近3倍;表达CD49d、CD11 a、CD62L及CD184的CD34+细胞的百分数分别由原来的26.34%±5.37%、17.63%±4.57%、46.38%±6.61%和9.58%±1.56%增加到65.67%±8.72%、56.67%±6.34%、84.76%±9.57%和19.32%±3.64%(P<0.01)。扩增后的CD34+细胞对FN的黏附能力及在SDF-1诱导下的迁移作用都显著增强(P<0.01)。结论:SCF+IL-6短期扩增CD34+造血干/祖细胞显著增加细胞的黏附能力,增加SDF-1诱导的迁移作用,可能是SCF+IL-6促进归巢的主要机制之一。

白蛋白微泡促进报告基因在细胞表达的实验研究

目的 :探讨白蛋白微泡作为非病毒载体在基因传输中的作用。方法 :6孔板培养脐静脉内皮细胞(EC)和血管平滑肌细胞 (VSMC) ,每孔加pcDNA3 1/His/LacZ质粒 2 0 μg ,加不同浓度微泡或不加微泡 ,超声条件为连续波 ,频率 2MHz,机械指数 1 8,照射时间 1min ,4 8h后计算蓝染细胞百分率和 β -半乳糖苷酶活性。另以不同浓度微泡及超声照射时间处理细胞 ,测定细胞增殖情况。结果 :与单纯超声质粒组相比 ,含微泡组蓝染细胞率增加约 10- 15倍 (其中内皮细胞组 11 6倍 ,平滑肌细胞组 15 2倍 ) ,报告基因表达定量增加近 8倍。微泡浓度为 10 %时细胞转染效率最高。超声照射对细胞增殖无影响 ,微泡浓度为 5 0 %时有明显的细胞毒作用。结论 :白蛋白微泡在超声作用下能明显增加基因的传输效率 ,有可能成为一种安全有效的基因治疗的载体。

冠心病患者血小板蛋白质组学研究

目的初步建立冠心病患者与健康对照的血小板蛋白质表达图谱,并鉴定其差异表达的蛋白质。方法选取冠心病患者9例和健康志愿者11名作为研究对象,抽取外周血,分离血小板并提取蛋白质。采用二维凝胶电泳技术分离并建立血小板蛋白质表达图谱,以Image Master 2D platinum 5.0软件进行图谱分析,选取差异点进行基质辅助激光解析/电离-飞行时间质谱(Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry,MALDI-TOF-TOF)分析,再采用Mascot软件搜索数据库鉴定差异表达蛋白质。结果 (1)初步建立了两组对象的血小板蛋白质表达图谱;(2)筛选出17个差异蛋白点,质谱成功鉴定7个:Plastin-2、Coronin-1A、Clusterin、Annexin A1、Chloride intracellular channel protein 1、Peroxiredoxin-6、Peroxiredoxin-2。结论血小板蛋白Plastin-2、Coronin-1A、Clusterin、Annexin A1、Peroxiredoxin-6、Peroxiredoxin-2在冠心病的发生发展中可能起到关键作用。

LBL和PBL结合教学法在心血管内科学教学中的应用

PBL教学法改变了传统填鸭式授课方式,强调自主学习,因而较好地调动了学生学习积极性和主动性。但由于中西方文化差异较大,我国传统教育理念依然根深蒂固;加之受国内高等教育体制结构性矛盾及社会经济转型等多方面因素影响,PBL教学存在不同于国外的主客观条件。

雌激素对绝经后冠心病妇女糖、脂代谢和内皮功能的调节作用

目的 研究雌激素替代治疗(ERT)对绝经后妇女冠心病(CHD)患者血糖、胰岛素、血脂、血浆一氧化氮(NO)、内皮素(ET-1)及前列环素(PGI2)的影响,探讨雌激素对心血管的保护效应。方法 58例绝经后妇女CHD患者随机分为治疗组和安慰剂组,治疗组每天给予病人服用克龄蒙(含戊酸雌二醇2mg,第1-12天服;戊酸雌二醇2mg和醋酸环丙孕酮1mg,第13-22天服)1片,安慰剂组每天给予安慰剂1片,观察治疗6个月后血糖、胰岛素、胰岛索敏感性指标、血脂、血浆NO、ET-1及PGI2的变化。结果 治疗组血糖、总胆固醇、低密度脂蛋白显著降低(P<0.05),胰岛素水平、ET-1显著降低(P<0.01),胰岛素敏感性指标、NO、NO/ET-1及PGI2水平显著升高(P<0.01),安慰剂组则变化不明显。结论 ERT能改善绝经后妇女冠心病患者糖代谢、脂代谢及血管内皮功能,可能有助于绝经后妇女CHD的二级预防。

1-磷酸鞘氨醇受体信号在造血干/祖细胞迁移中的作用

目的探讨1-磷酸鞘氨醇受体(S1PRs)在CD34+造血干/祖细胞迁移中的作用。方法用密度梯度离心法分离脐血CD34+细胞,悬浮于transwell培养板的上层,在不同组细胞中分别给予FTY720预处理、含或不含百日咳毒素(PTX)或CXCR4单抗,下层添加SDF-1,流式细胞仪检测迁移细胞数,计算迁移率。同时用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测迁移前后CD34+细胞的S1PRs的表达情况。另用FTY720处理脐血CD34+细胞,在不同时间点(1、8、16h)用流式细胞仪检测CD49d(VLA-4)、CD11a(LFA-1)、CD62L(L-selectin)的表达。结果FTY720不影响CD34+细胞的自发迁移,但明显促进SDF-1诱导的CD34+细胞迁移(15.262.14vs28.642.37),这种作用可以被PTX和CXCR4单抗完全阻断。新鲜分离的脐血CD34+细胞表达S1P1-5,但在FTY720和SDF-1作用下发生迁移的CD34+细胞只表达S1P1、S1P3,S1P4。CD34+细胞在FTY720作用下各个时间点测得的黏附分子表达水平无差别。结论S1PRs可能与CD34+细胞快速迁移有关,激活S1PRs能够增加SDF-1对CD34+细胞的趋化作用,这种作用是通过CXCR4介导的,信号传递偶联PTX敏感的Gi蛋白受体家族。表达特定S1PRs的CD34+细胞才容易发生快速迁移。FTY720不改变CD34+细胞黏附分子的表达。

晚期激活抗原-4在CD34^+造血干/祖细胞宫内移植早期归巢中的作用

目的探讨黏附分子晚期激活抗原-4(VLA-4)在脐血CD34+造血干/祖细胞小鼠宫内移植早期归巢中的作用。方法用密度剃度离心的方法分离脐血CD34+细胞,经SCF和IL-6扩增24h,在BALB/c母鼠怀孕第15天经胎鼠腹腔注射CD34+细胞,每只胎鼠约注射1×105个细胞。用PKH26标记细胞的方法追踪早期归巢情况。在VLA-4阻断实验中,CD34+细胞注射前用20μg/ml抗VLA-4单抗孵育30min。分别于注射后48h用流式细胞仪检测小鼠胎肝细胞中的人CD45+细胞。结果SCF+IL-6扩增后脐血CD34+细胞VLA-4表达由原来的(26·34±5·37)%增高至(65·67±8·72)%(P<0·01)。扩增的细胞经胎鼠腹腔移植48h后,在胎肝中可以见到PKH26标记的CD34+细胞,流式细胞仪检测胎肝中人CD45+细胞百分率为(26·54±9·56)%。CD34+细胞移植前经抗VLA-4单抗预处理后胎肝中人CD45+细胞检出率显著降低(3·57±1·25)%,P<0·01。结论VLA-4对CD34+造血干/祖细胞宫内移植早期归巢有重要作用。

雌激素替代治疗对绝经后妇女冠心病患者血浆前列环素和血栓素水平的影响

目的 :研究雌激素替代治疗与非吸烟绝经后妇女冠心病患者血浆前列环素和血栓素之间的关系 ,探讨雌激素对心血管保护作用的机制。方法 :5 4例非吸烟绝经后妇女冠心病患者随机分为治疗组和安慰剂组 ,采用双盲法每日给予病人服用克龄蒙 (含戊酸雌二醇 2mg ,第 1～ 12天服 ;戊酸雌二醇 2mg和醋酸环丙孕酮 1mg ,第 13～ 2 2天服 )或安慰剂 1片 ,观察治疗 6个月后血浆前列环素和血栓素的变化。结果 :治疗组血浆前列环素水平显著升高 (P <0 .0 1) ,血栓素水平显著降低 (P <0 .0 5 ) ,安慰剂组两者变化皆不明显。结论 :雌激素替代治疗能改善非吸烟妇女冠心病病人血浆前列环素、血栓素水平 。

超声心动图观察左室肥厚对评价高血压心肌微血管病变的价值

目的探讨超声心动图诊断左室肥厚(LVH)对评价高血压心肌微血管病变的价值。方法应用心肌对比超声心动图(MCE),静注微泡造影剂(全氟显)后,采用间断谐波成像技术测量静息时和注射双嘧达莫后心肌的最大微泡数量(A)、充填速度(β)和A·β值,并计算出A、β比值和冠脉微血管的血流储备(CFVR)。结果与对照组相比,高血压伴LVH和无LVH患者静息时的A、β和A·β值均增高,尤以伴LVH者增高更明显;而应用双嘧达莫后它们增加的幅度明显减少,A、β比值以及CFVR显著降低,LVH患者降低更明显;A和A·β与LVM和LVMI显著相关(P<0.01)。随着高血压病情的加重,A和A·β值增高,A比值和CFVR下降,A和A·β值与收缩压(SBP)、舒张压(DBP)显著正相关(P<0.01),CFVR与DBP显著负相关(P<0.01)。结论高血压患者,尤其是伴LVH患者的静息心肌微循环血流量增加、心肌微血管储备功能和非内皮依赖性的血管扩张能力明显受损、心肌毛细血管密度明显减少,并且随着疾病的进展而加重;高血压患者如果合并LVH时应考虑存在心肌微血管病变的可能性;MCE对诊断高血压微血管疾病有着良好的应用前景。