环境教育携手劳动实践,课程整合促进全面育人

通过环境教育和劳动教育相结合,学生的环保意识增强了,劳动能力提高了,学习兴趣更浓了,科学表达比以往更清晰、创造思维更活跃。青岛重庆路第二小学位于美丽的海边城市,学校以“尊重规律、尊重生命、尊重个性”为办学理念,打造“生长教育”办学特色,建构“生长树”课程体系。优良的环保特色、先进的教育思想、活力无限的课程角都为学生的成长助力。

基于UTAUT模型的在线心理咨询平台用户使用行为研究

目的:基于整合技术接受模型(UTAUT)和信息系统成功模型D&M,探究在线心理咨询平台用户使用行为的影响因素。方法:随机抽取温州市鹿城区、瓯海区、龙湾区、洞头区465名调查对象进行问卷调查,构建结构方程并运用Smart PLS 2.0进行假设检验。结果:信息质量、努力期望、感知信任和感知愉悦性对在线心理咨询平台用户的使用意愿均有正向影响作用(P<0.05),其影响程度按照路径系数从大到小依次为感知信任(0.199)、感知愉悦性(0.139)、信息质量(0.135)、努力期望(0.095)。同时,便利条件(0.134)和使用意愿(0.531)均对用户的使用行为有显著的正向影响作用(P<0.01)。结论:建议该类平台一方面应重视用户隐私信息保护,提高个体信任度;另一方面应充实交互性功能,增强用户参与度和愉悦性,精准定位用户个性化需求。同时政府应加强对在线心理咨询平台有效监管,共同促进平台网络生态有效构建。

叙事医学视域下医学生人文关怀能力培养路径探究

通过构建叙事医学视域下医学生人文关怀能力“理论+实践”双轨培养路径,探讨基于叙事医学理念的理论教学及社会实践对提升医学生人文关怀能力的效果。研究随机选取温州医科大学临床医学专业一年级184名学生为研究对象,并随机分为试验组与对照组,试验组接受叙事医学理论教学及社会实践干预。干预前后运用人文关怀能力量表(care ability inventory,CAI)结合反思日志评估研究对象的人文关怀能力,结果显示干预后试验组CAI总分及各维度得分较对照组均有显著提高。叙事医学理念指导下的医学生人文关怀能力双轨培养路径具备有效性和可行性。

临氢异构多级孔SAPO-31分子筛催化剂的制备

采用水热法合成高纯度的SAPO-31分子筛,在利用等体积浸渍法合成不同负载量含量的Mo/SAPO-31分子筛催化剂.利用XRD、SEM、N_(2)物理吸附、NH_(3)-TPD等表征技术手段对合成的催化剂进行相关表征.在固定床反应装置上对催化剂正己烷异构性能进行评价,0.5wt.%Mo负载时其选择性最高,达到86.1%.

刚地弓形虫自噬相关蛋白8(TgAtg8)多克隆抗体制备及初步应用

目的制备、评价特异性抗刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)自噬相关蛋白8(autophagy protein 8,TgAtg8)多克隆抗体。方法生物信息学方法分析弓形虫基因组中自噬相关蛋白的基因序列和氨基酸序列。以刚地弓形虫RH株速殖子cDNA为模板,PCR扩增TgAtg8编码基因,克隆入pGEX-6p-1载体,构建pGEX-6p-1-TgAtg8重组质粒,转化至大肠埃希菌(Escherichia coli)BL21。异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)分析重组蛋白表达情况。谷胱甘肽-S-转移酶(GST)标签亲和层析法纯化表达产物。以纯化的TgAtg8蛋白为抗原免疫日本大耳白兔,获得特异性抗TgAtg8多克隆抗体。以制备的多克隆抗体作为一抗,进行Western blotting分析和间接免疫荧光(IFA)检测。结果双酶切和测序结果证实,原核表达质粒pGEX-6p-1-TgAtg8构建成功。SDS-PAGE和Western blotting结果表明,TgAtg8蛋白在E.coli BL21中获得高效表达,其融合蛋白相对分子质量(Mr)约40 000,与理论值相近。Western blotting结果证实,所制备的多克隆抗体能特异性识别融合蛋白TgAtg8和虫株体内天然的TgAtg8蛋白。IFA实验表明,TgAtg8均匀分布于虫体胞浆中,但在自噬诱导培养后,TgAtg8逐渐聚集成颗粒状。结论制备的特异性抗TgAtg8多克隆抗体可用于检测虫体内TgAtg8蛋白在弓形虫自噬形成过程中的变化情况。

抗弓形虫β微管蛋白小分子抗原肽多克隆抗体的制备及鉴定

对弓形虫GT1株、ME49株和人的β微管蛋白的氨基酸序列进行生物信息学分析。根据生物信息学分析结果,人工合成弓形虫β微管蛋白氨基酸序列C端小分子抗原肽。用合成的抗原肽免疫日本大耳兔,每2周免疫1次,0.5 mg/(只·次),共5次。末次免疫后2周,收集兔血清,ELISA检测血清中特异性抗体效价,蛋白质印迹(Western blotting)检测该多克隆抗体与弓形虫RH株、ME49株和PRU株速殖子蛋白的免疫反应。生物信息学分析结果表明,弓形虫GT1株与ME49株的β微管蛋白的氨基酸序列完全一致,与人的β微管蛋白氨基酸序列同源性为98%,差异氨基酸主要集中在C端。经5次免疫后,ELISA证实兔血清中抗体效价为1∶52 800。Western blotting分析结果显示,该多克隆抗体可分别与弓形虫RH株、ME49株和PRU株的β微管蛋白特异性结合。

白纹伊蚊唾液腺重组aegyptin相似蛋白alALP的制备及抗原性分析

目的克隆、表达白纹伊蚊唾液腺重组aegyptin相似蛋白alALP编码基因并分析其抗原性。方法运用生物信息学方法分析alALP与aegyptin氨基酸序列(GenBank登录号为ABF18122.1)的同源性、二级结构和抗原肽段。提取白纹伊蚊唾液腺总RNA,根据alALP的基因编码序列(GenBank登录号为AY826121)设计引物,RTPCR扩增目的基因,亚克隆至pGEX-6P-1质粒,转化大肠埃希菌(E.coli)BL21,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)分析重组蛋白表达情况。重组aegyptin相似蛋白(GST-alALP)经还原型谷胱甘肽(Glutathione Sepharose 4B)亲和层析法纯化后,皮下注射免疫BALB/c小鼠,每次免疫剂量60μg,共免疫3次,每次间隔2周,制备小鼠抗GST-alALP血清。分别以小鼠抗GST-alALP血清和白纹伊蚊叮咬后小鼠血清为一抗,Western blotting分析GST-alALP蛋白的抗原性。结果生物信息学预测结果显示,alALP与aegyptin的氨基酸序列具有65.58%的同源性,二级结构高度相似并具有一段保守的抗原多肽。RT-PCR结果显示,alALP成熟肽基因扩增产物约为762 bp。经双酶切、PCR和测序结果显示,重组质粒pGEX-6p-1-alALP构建成功。SDS-PAGE和Western blotting结果显示,经IPTG诱导获得相对分子质量(Mr)约56 000的可溶性重组融合蛋白。Western blotting结果显示,GST-alALP蛋白能被该蛋白免疫的小鼠血清和白纹伊蚊叮咬后的小鼠血清识别。结论克隆的alALP成熟肽基因能在原核表达系统中高效表达,且具有抗原性。

基因芯片分析弓形虫感染宿主细胞microRNAs差异表达

目的:研究弓形虫感染人包皮成纤维细胞(HFFs)的microRNAs(miRNAs)差异表达。方法:基因芯片分析弓形虫感染的HFFs的miRNAs差异表达,并用实时荧光定量RT-PCR法和Northern blot法验证miRNAs差异表达。结果:弓形虫感染HFFs的46种miRNAs表达量有1倍以上上调,37种miRNAs表达量有1倍以上下调。其中4种差异表达的miRNAs的实时荧光定量RT-PCR法和Northern blot法验证结果与基因芯片分析结果一致。结论:弓形虫感染可导致宿主细胞的miRNAs差异表达,差异表达的miRNAs可能在弓形虫和宿主细胞的相互作用中起调控作用。

刚地弓形虫自噬相关蛋白3基因的克隆表达与多抗制备

目的克隆、表达刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)自噬相关蛋白3(Tg Atg3)基因,并制备能特异性识别该蛋白的多克隆抗体。方法以弓形虫RH株c DNA为模板,构建p ET28a-Tg Atg3重组质粒,转化入大肠埃希菌(E.coli)Rosetta感受态细胞,经自诱导培养基诱导表达,用镍柱亲和层析法纯化诱导表达产物,以小鼠抗His标签单克隆抗体作为一抗,蛋白质印迹(Western blotting)进行鉴定。以纯化的Tg Atg3蛋白作为抗原皮下多点注射免疫日本大耳白兔,125μg/(只·次),免疫4次后心脏取血,制备血清,获得特异性抗Tg Atg3多克隆抗体。对制备的多克隆抗体进行Western blotting与间接免疫荧光法(IFA)鉴定。结果双酶切、PCR扩增及测序结果证实目的片段序列正确,原核表达质粒p ET28a-Tg Atg3构建成功。SDS-PAGE和Western blotting结果表明,重组E.coli中可见相对分子质量(Mr)约44 000的可溶性Tg Atg3蛋白的高效表达。抗体检测Western blotting结果显示,制备的多克隆抗体能特异性识别弓形虫RH株的Tg Atg3蛋白。IFA结果显示,该多克隆抗体可与虫体胞浆内Tg Atg3结合。结论获得重组可溶性Tg Atg3蛋白,制备的多克隆抗体能特异性识别弓形虫RH株的天然Atg3蛋白。

合成条件对SAPO-34分子筛晶貌影响

以四乙基氢氧化铵和吗啉作为模板剂,合成SAPO-34磷酸硅铝分子筛.主要研究合成条件,例如:晶化时间,晶化温度,模板剂等.用SEM和XRD等技术对合成的样品表征,结果发现,合成条件对SAPO-34形貌有显著影响.

中小学环境教育现状初探与对策研究

伴随科技的进步、人类文明的提升,生态环境也正在面临着严重的威胁,例如温室效应、大气污染、土地荒漠化加剧等。我国一直在探索部署环境教育工作,1973年第一次全国环境保护会议召开,这标志我国的环境教育工作发展到一个新时期,在各级教育工作中落实可持续发展观念是势在必行的。祖国要发展,更要从中小学时期就抓紧培养学生的环境保护意识,使他们树立正确的生态文明价值观,从点滴做起,为祖国的环保事业添砖加瓦。

叙事医学教育提升医学生共情能力的探索与实践

目的:探索以大学英语课程和医学人文第二课堂为依托的叙事医学教育对提升医学生共情能力的实践路径与效果。方法:选取温州医科大学临床医学专业一年级103名学生并随机分为实验组和对照组。实验组接受基于大学英语课程的叙事医学教育,并参与医学人文第二课堂活动,对照组课程模式无叙事医学介入。干预前后运用人际反应指针量表(Interpersonal Reactivity Index, IRI)测量两组学生共情能力,并结合学生反思日志和访谈观察该教育模式对共情能力发展的影响。结果:干预前两组IRI总分及观点采择(PT)、幻想(FS)、同情关注(EC)和个人悲伤(PD)四个维度得分均无显著差异(P>0.05)。干预后实验组IRI总分以及PT、FS、EC三个维度得分均显著高于对照组(P<0.05)。组内前后测量结果比较显示:实验组干预后IRI总分显著提高(P<0.05),各维度得分较干预前无显著差异;对照组干预前后IRI总分及PT、PD得分均无显著差异(P>0.05),且FS、EC维度得分显著下降(P<0.05)。结论:“新医科”发展背景下医文融通式叙事医学教育是培养医学生共情能力的一条有效途径。

烯烃歧化制备丙烯催化剂积碳失活研究

烯烃歧是一种非常重要的烯烃转化技术,此技术的关键是催化剂,无论何种催化剂,在反应过程中都面临催化剂积碳失活.本文通过多种技术研究钨基烯烃歧化催化剂积碳.结果显示:积碳催化剂的孔容、孔径及比表面积都显著减小,在较大孔内的积碳速率明显高于在小孔内的积碳速率;积碳后的催化剂的酸量比积碳前的酸量减小.

在综合实践活动课中开拓创新的教育氛围

一、在综合实践活动课程中开展京剧教学活动的意义 京剧作为我国的传统文化艺术,系统全面地体现了人们的审美观念和审美追求力。中国京剧艺术的普及和推广,是增强各族人民民族自豪感和凝聚力的重要途径。京剧进中小学课堂,能够胜任传承民族文化的重任。

让导入开启高效信息技术课堂之门

想快速地将学生的注意力和兴趣吸引到课堂中，使其在有限的课堂时间中更快、更好的掌握知识，需要教师精心设计与教学内容相关的情境导入，引发学生探求新知的欲望，使思维活动呈现出积极的状态。

探究小学综合实践活动课程的教学方法

随着新课改的不断推进,综合实践活动课程在小学中被广泛的推行实施。由于地区不同,教学条件也各不相同,导致综合实践活动课程的开展并不顺利,有些学校甚至将这节课作为自习课,或被其他学科的教师占用。针对此种情况,本文对在小学中实施综合实践活动课程的教学方法进行了阐述。

弓形虫沉默信号调节子2(TgSir2)的克隆表达与多克隆抗体制备

目的制备特异识别弓形虫沉默信号调节子2(TgSir2)多克隆抗体。方法以酵母Sir2氨基酸序列为模板,寻找弓形虫基因组中同源序列,并进行信号肽预测。以弓形虫RH株cDNA为模板,构建pET28b-TgSir2重组质粒,转化入大肠埃希菌(E.coli)BL21,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,用镍柱亲和层析法纯化诱导表达产物,并以小鼠抗His标签单克隆抗体作为一抗,蛋白质印迹(Western blotting)进行鉴定。以纯化的TgSir2蛋白作为抗原免疫新西兰大白兔,获得特异性抗TgSir2多克隆抗体。最后,以此多克隆抗体作为一抗,Western blotting检测与虫体蛋白的反应情况。结果同源比对找到弓形虫基因组中TgSir2,信号肽分析提示1-15位氨基酸为其信号肽序列。PCR、双酶切及测序结果证实原核表达质粒构建成功。SDS-PAGE结果表明,IPTG可诱导TgSir2融合蛋白的大量表达。Western blotting结果显示,制备的多克隆抗体既能特异性识别原核表达的TgSir2蛋白,也能识别弓形虫体内的内源性TgSir2蛋白。结论制备的抗重组TgSir2蛋白多克隆抗体能特异性识别弓形虫RH株的TgSir2蛋白。

1例遗传性蛋白S缺陷导致静脉血栓栓塞症分析

目的分析一例杂合缺失变异导致遗传性蛋白S(PS)缺陷症的临床特征及基因变异情况,探讨PS缺陷与静脉血栓栓塞的关系。方法选取1个遗传性蛋白S缺陷症家系为研究对象。检测先证者及其家系成员(2代5人)蛋白S水平及其他凝血指标。采用PCR法扩增PROS1基因所有外显子及侧翼序列等,并采用直接DNA测序及进行基因分析。使用计算机预测软件分析变异氨基酸位点的危害性及变异后对蛋白质功能的影响。结果基因分析显示先证者和其叔叔PROS1基因第5外显子均存在c.458_458delA杂合缺失变异,导致第153位的赖氨酸突变为丝氨酸并框移了6个氨基酸后产生终止密码子(p.Lys153Serfs^(*)6)。Mutation Taster软件预示该缺失变异为有害变异,能够引起相应的疾病;蛋白质模型分析显示该缺失变异导致其与周围氨基酸的氢键发生了改变,所产生的截短蛋白功能不全,可能致使蛋白质错误折叠或无义介导的RNA衰变。结论PROS1第5外显子存在c.458_458delA(p.Lys153Serfs^(*)6)杂合缺失变异是先证者发生静脉血栓栓塞的诱因之一。

弓形虫棒状体颈部蛋白的研究进展

弓形虫棒状体颈部蛋白（rhoptry neck proteins，RONs）是由棒状体分泌的，构成运动结合体（moving junction，MJ）不可或缺的一部分，由于MJ在虫体入侵宿主细胞过程中起至关重要的作用，因此，对于RONs蛋白的研究，有助于更好地了解刚地弓形虫的致病机制，探寻预防和治疗弓形虫病的有效方法。该文就弓形虫棒状体颈部蛋白的结构和功能加以综述，并对该领域今后可能的研究方向进行展望，以期从棒状体颈部蛋白角度对弓形虫研究提供新的思路。