鲤鱼Sox9基因HMG保守区的克隆及序列分析

为研究鲤鱼中与性别决定及骨组织发育相关基因Sox 9的特征及功能,从大量常见养殖鲤鱼品种及黄河野生鲤鱼个体中克隆得到了多个版本CcSox 9基因的HMG保守区序列,并对这些序列及国内外的其他鲤鱼Sox基因进行了启动子、多态性等序列分析。结果显示,鲤鱼中至少存在5个版本的活性Sox 9基因及1个Sox 9假基因。这些基因在编码序列中存在一定的多态性,在内含子序列中存在大量序列多态,并且活性基因中都存在至少1个启动子序列。假基因无内含子序列,在编码序列中存在多个终止密码子。

高简并引物小温度范围不规则降落PCR在庞大基因家族扩增中的应用(英文)

[目的]探讨了高简并性引物扩增庞大基因家族基因的特殊方法。[方法]采用常规高简并引物对鲤鱼基因组DNA分析进行了常规PCR扩增、常规降落PCR扩增以及优化后的小温度范围不规则跳跃降落PCR扩增。[结果]采用PCR仅得1条明显条带,得到的基因较少;采用常规降落PCR法仅得到弥散性扩增,无明显条带出现;而采用小温度范围的不规则跳跃降落PCR则得到了得到了3条明显条带和多个基因,扩增结果理想。[结论]为庞大基因家族扩增条件中的优化与选择提供了理论依据。

豆粕提取物用于药用空心胶囊制作的研究

用脱脂豆粕提取物(大豆分离蛋白及可溶性大豆多糖)替代部分明胶用于药物空心胶囊制作,可降低胶囊的制作成本,提高大豆利用价值。本研究获得了一种以豆粕提取物替代大部分或部分明胶用于药用空心胶囊制作的方法,采用正交试验及辅助实验手段找到了既经济又符合使用要求的最佳原料配比(明胶∶大豆蛋白∶大豆多糖=1∶1∶0.5)。使用交联剂后,制得了符合使用要求的肠溶型空心胶囊,并用国家药典标准方法对有关指标进行了检测。

高简并引物小温度范围不规则降落PCR在庞大基因家族扩增中的应用

[目的]探讨高简并性引物扩增庞大基因家族基因的特殊方法。[方法]采用高简并引物对鲤鱼基因组DNA分别进行了常规PCR扩增、常规降落PCR扩增以及优化后的小温度范围不规则跳跃降落PCR扩增。[结果]采用常规PCR仅得1条明显条带,得到的基因较少;采用常规降落PCR仅得到弥散性扩增,无明显条带出现;而采用小温度范围不规则跳跃降落PCR则得到了3条明显条带和多个基因,扩增结果理想。[结论]为庞大基因家族扩增条件的优化与选择提供了理论依据。

豆粕提取物用于药用空心胶囊制作的研究

用脱脂豆粕提取物(大豆分离蛋白及可溶性大豆多糖)替代部分明胶用于药物空心胶囊制作,可降低胶囊的制作成本,提高大豆利用价值。本研究获得了一种以豆粕提取物替代大部分部分明胶用于药用空心胶囊制作的方法,采用正交试验及辅助实验手段找到了既经济又符合使用要求的最佳原料配比(明胶:大豆蛋白:大豆多糖=1:1:0.5)。使用交联剂后,制得了符合使用要求的肠溶型空心胶囊,并用国家药典标准方法对有关指标进行了检测。

杂粮配粉对面粉及饼干品质的影响

采用不同配比的杂粮粉加入到面粉中,测定面粉指标和饼干指标,研究杂粮配粉对面粉及饼干品质的影响。结果表明:随着杂粮粉比例的增加,湿面筋含量、干面筋含量、沉降值、降落值都有降低的趋势;面粉的峰值黏度、最后黏度与回升值都逐渐降低,而糊化温度变化不显著;添加20%左右的杂粮粉,可使饼干的色泽和香味得到改善,弹韧性和外观形状得分也有适度的提高,综合得分也有所增加。

鲤鱼中Sox9b基因的克隆和表达

Sox9基因是一个重要的转录调控因子,参与性别决定及软骨等多种组织和器官的发育过程。本研究利用简并引物扩增鲤鱼基因组DNA,首次发现在鲤鱼中存在两种形式的Sox9基因。二者在保守盒区编码的氨基酸序列相同,并都存在一个内含子,但内含子序列差异很大,分别长704bp和616bp。在此基础上采用RACE技术克隆了鲤鱼Sox9b基因的5’端和3’端,通过拼接获得了2447bp 的全长cDNA序列,编码428个氨基酸。其中96-174位共79个氨基酸为HMG保守盒。将鲤鱼Sox9b基因与三刺鱼等九种动物的氨基酸序列相比较发现,它们的同源性高达75%以上,显示Sox9 基因在进化中较保守。应用半定量RT-PCR技术对成体鲤鱼不同组织中Sox9b基因的表达进行了分析,结果表明该基因广泛表达,尤以脑及精巢中表达最为丰富。

玉米秸秆水解液发酵产微生物油脂动力学研究

对发酵性丝孢酵母在玉米秸秆水解液中发酵合成微生物油脂动力学特性进行了研究。采用Lo-gistic菌体生长模型、Luedeking-Piret模型和产物生成的基质消耗模型,描述了完整发酵过程的动力学特性,提出了发酵过程中菌体生长、微生物油脂合成、基质消耗的动力学模型。采用牛顿迭代法对模型参数进行非线性拟合,结果表明,模型计算与试验数据能较好地拟合,菌体生长、产物油脂生成及糖分消耗等3条曲线的相关指数R2分别为0.990、0.987和0.890。表明该动力学模型可以较好描述发酵性丝孢酵母发酵过程的动力学特征。

鲤鱼中5个Sox基因保守区的克隆和比较

SRY/Sry基因已被公认为是哺乳动物的睾丸决定因子(TestisDeterminingFactor,TDF)基因,它的正确的时空表达是雄性生殖腺形成的关键,即导致哺乳动物胚胎性别决定的开关基因.作为一个大基因家族的首位成员,它的发现诱发了Sox基因家族的研究热潮.Sox基因家族是在动物中发现的一类新的编码转录因子的基因家族,其产物具有一个HMG基序保守区,参与诸如性别决定、骨组织的发育、血细胞生成过程、神经系统的发育、晶状体的发育等多种早期胚胎发育过程.鱼类是脊椎动物中进化地位较低的一类生物,除了个别种类出现了与性别相关的染色体外,绝大多数都无异形性染色体,说明了鱼类正处于性别染色体进化的重要时刻.研究鱼类中的Sox基因对于研究SRY的发生、性别染色体的进化以及性别的决定机制有着重要的意义.本实验利用兼并引物PCR的方法,参照Sox基因的HMG-box区氨基酸序列设计简并引物,对鲤鱼(Cyrinuscarpio)的基因组进行扩增,获得5个新的基因片段.经过在Genbank中进行同源性比较和分析,证明它们是鲤鱼的Sox基因并分别命名为CcSox3、CcSox4、CcSox11、CcSox14、CcSox21.与鲤鱼中的这些Sox基因具有最高同源性的基因分别是OlSox3,同源性为94.03%;CvSox4基因,同源性为88.06%;DrSox11基因,同源性为97.01%;MmSox14和HsSox14基?

伪狂犬病毒对鼠脾细胞分裂抑制性研究

伪狂犬病毒 ( PRV)的感染可使猪产生免疫抑制 ,从而导致其它病毒和细菌的继发感染。这种免疫机制抑制机理尚不清楚 ,本研究以小鼠为试验对象 ,探索了 PRV对免疫系统的影响。用 BALB/c小鼠的脾脏制备脾细胞和淋巴细胞进行体外培养 ,并检测细胞的增殖能力。表明 PRV在淋巴细胞中并不繁殖 ,但感染细胞的分裂能力却受到了抑制。经紫外线灭活后的 PRV同样能抑制鼠脾细胞的增殖。结果表明 ,可能是由于

破解“用工荒”的职业教育之策

从＂民工潮＂到＂用工荒＂ 就业问题一直是困扰世界各国的一道难题。曾几何时,在我国出现的＂民工潮＂、＂民工流＂引起了国人的广泛关注与担忧,甚至被斥为＂盲流＂。然而,时过境迁,今天为全社会关注的焦点、热点话题恰恰是＂用工荒＂。

相关序列扩增多态性分子标记及其在植物研究中的应用

在阐述相关序列扩增多态性(SRAP)的原理和流程后,详细论述了SRAP标记目前在植物遗传多样性分析、遗传图谱构建、绘制基因组转录图谱、重要性状基因标记、标记测序与基因克隆等方面的研究进展及应用前景。

第二代生物燃料中纤维素乙醇的现状与发展

文章综述了第二代生物燃料中纤维素乙醇生物燃料的现状,而中国是纤维素资源大国,利用木质纤维素生产燃料乙醇可改善能源保障,实现能源供应的可持续发展,阐述了发展纤维素乙醇对环境有利方面,以及对纤维素乙醇的未来展望。

一株β-环状糊精葡萄糖基转移酶产生菌的筛选与发酵条件研究

从明阳淀粉厂周围的土壤中分离出一株产β-环状糊精葡萄糖基转移酶的野生菌株。该野生菌株的酶活为634.37 U/mL,经UV和LiCl的初步诱变以及摇瓶产酶条件的优化后酶活达到了1530.61 U/mL。适宜的产酶条件为:0.5%可溶性淀粉和0.5%酵母膏分别作为碳源和氮源,装量50ml/250ml、转速250r/min、pH8.0、适宜温度35℃、接种量2%、发酵周期3d。

小议餐厨垃圾处理技术及应用

本文从日常生活垃圾餐厨垃圾出发,介绍了其成分、特点以及处理技术,总结了餐厨垃圾资源化技术的现状和发展趋势。

淀粉体外消化模型的构建及在交联淀粉消化研究中的应用

在体外对淀粉的消化条件进行仿生模拟,对淀粉的消化产物检测条件进行优化,构建了淀粉体外消化模型。以环氧氯丙烷为交联剂,制备土豆交联淀粉,以构建的体外消化模型,对不同交联度淀粉的消化速度进行研究。结果显示,以恒温振荡培养箱保持37℃恒温,以pH6.9缓冲液维持恒定的pH,以20 r/min的转速振荡模拟肠的蠕动,以透析袋模拟肠,对淀粉的消化可很好的仿生模拟。采用硫酸-苯酚法,消化产物检测的最佳条件为∶波长485 nm,显色温度100℃,显色时间30 min,糖浓度在（0~80）μg/mL范围内线性关系良好,其回归方程为y=0.004 4x-0.005,R2=0.998 8,且样品溶液在2 h内显色稳定。土豆交联淀粉和交联前相比,消化性降低了13.7%~34.5%,且与交联度呈负相关,即交联度越高（沉降积越小）,消化性就越低。

脂肪酶的工业应用研究进展

作为应用广泛的重要工业酶类,脂肪酶近些年一直是行业研究热点。本文综述了目前脂肪酶在各工业领域中的应用:包括油脂工业、食品工业、化学品合成业、医药、生物能源、纺织、聚酯产业等,并对其未来发展进行了展望。