紫苏醇亚微乳剂的制备及其HPLC法测定

按优化处方制备了紫苏醇亚微乳,并考察了其粒径、ζ电位、pH。优化处方所得亚微乳的平均粒径为(271.7±0.75)nm,ζ电位为(41.53±0.15)mV。HPLC法测定制剂含量,采用C18柱,以乙腈-水(40∶60)为流动相,检测波长210nm。紫苏醇在10～250mg/L浓度范围内线性良好(r=0.9996),三个浓度样品的回收率分别为102.8%、107.4%、101.5%,日内和日间RSD分别为0.78%、0.26%、0.20%和1.17%、1.23%、1.47%。

丹参酮ⅡA磺酸钠注射液对人肝星状细胞的影响

目的:研究丹参酮ⅡA磺酸钠注射液(Sulfotanshinone Sodium Injection,STSI)抗肝纤维化的作用及其机制。方法:分别以MTT比色法检测STSI对人肝星状细胞(HSC)增殖的影响;观察对细胞乳酸脱氢酶(LDH)活性的影响;以流式细胞仪检测STSI对HSC凋亡率的影响。结果:STSI各剂量在24与48h对HSC的抑制率呈现出明显的量效关系;STSI对HSC的抑制作用不是非特异性细胞毒性所致;HSC的凋亡率随药物浓度增加而增加,并具有显著性差异。结论:STSI能抑制HSC的增值并促进其凋亡。

清脂复肝颗粒防治大鼠酒精性脂肪肝的疗效及机制研究

目的:探讨清脂复肝颗粒(qingzhifugan granules,QZFG)防治酒精性脂肪肝的作用及其可能的机制。方法:将QZFG分为6、3、1.5g/kg剂量组,进行预防给药,连续4周后,分别检测血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)的含量;用免疫组化法检测肝组织中的半胱氨酸酶3(Caspase-3)表达水平;RT-PCR检测细胞色素P4502E1(CYP2E1)表达水平;并进行肝脏病理组织学检查。结果:QZFG各剂量组血清中AST、ALT的含量及Caspase-3、CYP2E1在肝组织中的表达水平明显低于模型组,且给药组之间差异明显,即表现出剂量相关性。病理组织学检查发现给药组肝脏脂肪变性程度明显轻于模型组。结论:QZFG可能通过降低肝脏中CYP2E1、Caspase-3水平发挥防治酒精性脂肪肝的作用。

川芎嗪抗大鼠免疫损伤性肝纤维化作用及机制研究

目的:观察川芎嗪(TMP)对大鼠免疫损伤性肝纤维化的治疗作用并探讨其相关机制。方法:建立猪血清诱导的大鼠免疫性肝纤维化模型后给予TMP干预,分别观察TMP对受试动物肝组织病理学分级、血清生化和血清纤维化指标的影响,免疫组化法检测TGFβ-1、TIMP-1在肝组织的阳性表达。结果:TMP 10、20和40mg/kg均可显著改善大鼠肝纤维化分级程度;显著降低大鼠血清ALT、AST、ALP水平,提高A/G比值;下调TGFβ-1、TIMP-1表达;TMP各剂量可不同程度的降低肝纤维化大鼠血清HA、LN、C-IV和PⅢNP水平。结论:TMP对大鼠实验性肝纤维化具有明显的治疗作用;其机制可能与抑制细胞因子TGFβ-1、胶原酶抑制因子TIMP-1表达增高有关。

紫苏醇亚微乳中药物的相分布和体外释放研究

采用HPLC法测定紫苏醇亚微乳(含或不含壳聚糖)中的药物含量,考察两种亚微乳中水相、油相、油/水界面的药物分布情况和体外释药。结果表明,紫苏醇在不含壳聚糖亚微乳的油相中分布较高(49.6%),在含壳聚糖的亚微乳中则是油、水界面含量较高(42.9%)。两种亚微乳4h累积释放率均约为60%,且含壳聚糖的亚微乳释放稍慢,这可能与两种亚微乳中药物的相分布不同有关。

注射用头孢他啶舒巴坦钠的特殊安全性

目的通过化药1类（5）新药注射用头孢他啶舒巴坦钠的特殊安全性试验研究,观察供试药注射后对试验动物的过敏性、溶血性和血管刺激性反应,为临床研究提供依据。方法（1）分别给豚鼠肌肉注射注射用头孢他啶舒巴坦钠12.5和25mg/kg致敏,随后分别进行静脉内给药激发试验。观察动物是否出现竖毛、抓鼻、颤抖、咳嗽、喷嚏、呼吸困难、干呕、站立不稳和休克等过敏症状并记录,按症状分级标准判断每只动物反应症状出现的程度和持续时间。（2）采用体外溶血试验方法分别于15、30、45、60、120、180和240min,观察注射用头孢他啶舒巴坦钠对兔红细胞的溶血或红细胞凝集作用。（3）通过家兔耳缘静脉注射头孢他啶舒巴坦钠（8.0,2ml/kg）,对照组注射等容积的氯化钠注射液（2ml/kg）。经肉眼和病理组织学检查有否与药物相关的刺激反应产生。结果（1）结果显示该批注射用头孢他啶舒巴坦钠制剂两剂量在受试动物致敏期即造成陆续死亡,尸检发现肠胀气等急性肠炎症状及病理改变。经增加动物数重复试验并选用市售的注射用头孢他啶作对照。对照品出现致敏期近半数动物死亡,经激发后出现强阳性过敏反应;供试药仍然出现同前的试验结果。（2）试验浓度为8.0mg/ml的注射用头孢他啶舒巴坦钠（终浓度0.16-0.80mg/ml）未发生溶血和红细胞凝集现象。（3）注射用头孢他啶舒巴坦钠在注射浓度为8.0mg/ml连续给药5天的试验结果显示,家兔血管壁局部组织经肉眼和病理组织学检查未见明显与药物相关的血管壁刺激反应。结论结果提示,该批注射用头孢他啶舒巴坦钠对豚鼠特别敏感,推测死亡原因可能是豚鼠对该头孢类复方药物不耐受所致,非过敏死亡;注射用头孢他啶舒巴坦钠无溶血和红细胞凝集作用;在临床拟用浓度为8.0mg/ml连续给药时未见明显与药物相关的局部血管刺激反应。

羟基喜树碱纳米晶体抗肿瘤作用及其机制评价

目的:观察羟基喜树碱纳米晶体(hydroxycamptothecine nanocrystals,HCPT-NCs)与羟基喜树碱注射液(hydroxycamp-tothecine injection,HCPT-I)比较的体外抗肿瘤作用并作出评价。方法:应用MTT法检测HCPT-NCs对肝癌细胞SMMC-7721的增殖抑制作用;流式细胞术分析细胞凋亡率,RT-PCR方法检测survivin基因表达的变化。结果:HCPT-NCs与HCPT-I相比,对SMMC-7721细胞的抑制作用,有较明显差异的剂量和时间依赖性,在促进SMMC-7721细胞凋亡和下调survivin表达方面亦存在显著性差异(P<0.05)。结论:HCPT制成纳米晶体后提高了对SMMC-7721肿瘤细胞的抑制和杀伤作用。

川芎嗪对肝星状细胞α-平滑肌肌动蛋白及核因子-κB的影响

目的：探讨川芎嗪对肝星状细胞（hepatic stellate cells,HSC）表达α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）、核因子-κB（NFκ-B）的影响。方法：体外培养人肝星状细胞,免疫细胞化学法检测HSC中α-SMA的表达以及NFκ-B表达的核迁移。结果：在50-800mg/L浓度范围内,川芎嗪处理组α-SMA表达量不同程度减少,且抑制作用随剂量增加而增强;川芎嗪处理组NF-κB表达量较少并且主要位于细胞质,很少发生核迁移。结论：川芎嗪可以使活化的HSC中α-SMA、NFκ-B表达下降。

乌杞蝎精酒对失血性血虚动物的补血作用

乌杞蝎精酒对急性失血模型小鼠及慢性失血模型大鼠均具有明显的改善作用，可加速动物RBC及Hb的恢复，并可有效地刺激网织红细胞的生成。

肝纤维化的治疗和展望

当前由病毒性肝炎、酗酒、过度肥胖导致的肝纤维化急剧增高,肝纤维化是多种慢性肝病发展至肝硬化的必由之路,主要表现为细胞外基质成分,即胶原、非胶原的糖蛋白和蛋白多糖过度积聚在细胞外间隙,肝纤维化的治疗迄今仍处在探索阶段,还无特效药问世,其治疗主要包括去除致病因素的治疗和抗肝纤维化治疗。

注射用头孢他啶舒巴坦钠静注的急性毒性试验

目的通过化药1类（5）新药注射用头孢他啶舒巴坦钠及其拆方的急性毒性试验研究,观察并比较单次给药后复方与单方制剂对试验动物的毒性反应和死亡分布情况,了解同样条件下新的复方制剂与各组份在急性毒性方面的差异,为临床研究提供依据。方法分别在预初毒性试验的基础上。（1）取清洁级昆明种小鼠随机分为6组,每组10只。将注射用头孢他啶舒巴坦钠按照设置的剂量0、4.60、5.42、6.37、7.50和8.82g/kg分组静脉注射给药,组间距为0.85,给药容量为0.2ml/10g体重。（2）取清洁级昆明种随机分组的小鼠将注射用头孢他啶按照设置的剂量0、5.00、6.10、7.44、9.07和11.06g/kg分组静注给药,组间距为0.82,给药容量为0.2ml/10g体重。（3）取清洁级昆明种随机分组的小鼠将注射用舒巴坦钠按照设置的剂量0、3.00、3.66、4.46、5.44和6.63g/kg分组静注给药,组间距为0.82,给药容量为0.2ml/10g体重。各供试药静注后即该观察并记录各组动物出现的症状、体征及其死亡数目和时间,连续观察一周,对死亡动物及时进行尸检,肉眼可见主要脏器有异常者应进一步作病理组织学检查。结果按Bliss法程序统计处理。结果试验结果显示（1）注射用头孢他啶舒巴坦钠静注给药后,动物即刻出现中毒症状,首先表现为中枢兴奋,跳跃,四肢抽搐或痉挛,角弓反张,多数动物在0.5-10min内呼吸困难,小便失禁,随即呼吸衰竭死亡。裸眼下观察主要器官心、肝、脾、肺、肾及脑等未见明显改变。少数动物在出现中毒症状2-15min后呼吸困难逐渐改善,但仍表现为四肢抽搐,安静不动,精神萎糜等,2-6h左右恢复至正常活动状态。经DASver1.0软件正规Bliss法统计显示注射用头孢他啶舒巴坦钠对小鼠静脉注射的LD50及其95%可信限为6.70g/kg（6.11-7.29g/kg）。（2）注射用头孢他啶中毒小鼠首先表现为呼吸急促,四肢痉挛,全身肌肉抽搐,小便失禁,多数动物在5min内因呼吸抑制死亡。裸眼下观察主要脏器心、肝、脾、肺、肾及脑等未发现明显改变。幸存动物大约在10min后逐渐恢复至正常呼吸,但仍有安静少动,精神萎糜等体征,1-6h后恢复至正常状态。头孢他啶对小鼠静注的LD50及其95%可信限为7.89g/kg（7.14-8.64g/kg）。（3）注射用舒巴坦钠静注给药后,动物即刻出现躁动不安,呼吸急促,全身肌肉震颤,惊厥或四肢抽搐,10min内呼吸抑制,小便失禁死亡。裸眼下观察主要脏器心、肝、脾、肺、肾及脑等未发现明显改变。毒性反应较明显的幸存动物大约在15min后逐渐恢复至正常呼吸,个别动物仍有静卧,全身颤抖等体征,3-6h后恢复至正常状态。舒巴坦钠对小鼠静注的LD50及其95%可信限为4.93g/kg（4.49-5.37g/kg）。各供试药雌、雄动物之间死亡分布未见明显差异。结论化药1类（5）新药注射用头孢他啶舒巴坦钠的毒性经单次静注给药对动物急性毒性试验表明与其单方制剂比较未见明显的增加。

中药有效成分调控肝纤维化细胞因子研究进展

近年来肝纤维化发生机制研究取得了重大进展,为肝纤维化的治疗提供了新的途径和治疗靶点。但目前临床仍缺乏抗肝纤维化的良药,中药尤其是中药有效成分在治疗肝纤维化方面的作用已引起研究者的广泛关注。中药有效成分丹酚酸B、氧化苦参碱、川芎嗪、姜黄素等在调控肝纤维化相关细胞因子方面的研究取得了进展。

注射用头孢他啶舒巴坦钠静注的一般药理学试验

目的通过化药1类(5)新药注射用头孢他啶舒巴坦钠的一般药理学试验研究,观察供试药静注后对试验动物的神经精神系统、心血管系统和呼吸系统是否产生明显的影响,为临床研究提供依据。方法(1)取雌雄各半的健康Beagle犬16只,随即分为4组,每组4只。将注射用头孢他啶舒巴坦钠按0.28g/kg体重、0.14g/kg体重和0.07g/kg体重剂量给Beagle犬静脉注射(对照组给于等容量的氯化钠注射液)后,连续观察该药对麻醉犬的影响,即于给药前、给药开始后5、10及给药结束后5、10、30、60、90和150min各记录一次Ⅱ导联心电图(ECG)、心率(HR)、外周动脉平均血压(MAP)、呼吸频率(RF)、呼吸幅度(RD)。(2)取雌雄各半的清洁级小鼠随即分组,将注射用头孢他啶舒巴坦钠按1.34g/kg体重、0.67g/kg体重和0.33g/kg体重剂量给小鼠静脉注射(对照组给于等容量的氯化钠注射液)后,分别观察该药对小鼠神经精神活动、自主活动、爬竿运动为指标的神经精神系统的影响。结果(1)试验结果表明注射用头孢他啶舒巴坦钠高、中、低剂量分别给Beagle犬静注后,不同时间内对麻醉犬的心率、心律、心电图QRS间期、R波电压、ST偏移幅度与T波等、外周动脉平均血压、呼吸频率、呼吸幅度均无明显影响。(2)小鼠静注头孢他啶舒巴坦钠高、中、低剂量后,翻正反射均正常,其步态活动、攻击和逃避反应均无改变,无肌颤或流涎等体征,与正常对照组比较差异无统计学意义。结果提示该药对小鼠神经精神系统无明显影响;其各剂量静注给药后,分别测试60min内小鼠的一般行为均无异常,各剂量组动物自主活动次数计分与正常对照组比较差异无统计学意义,结果提示该药对小鼠中枢神经系统无明显兴奋作用;其各剂量静注给药后,分别测试5、30、60、120和180min小鼠的爬竿时间,结果各剂量组和正常对照组间差异均无统计学意义,提示该药对小鼠中枢神经系统无明显抑制作用。结论结果提示,化药1类(5)新药注射用头孢他啶舒巴坦钠静注对小鼠的神经精神系统,对麻醉犬的呼吸和循环系统功能无明显影响。

乌杞蝎精酒的主要药效学研究

乌杞蝎精酒可明显降低大鼠全血、血浆粘度和红细胞比积，可有效地改善小鼠耳廓微循环，促进瘀血模型小鼠腹腔内红细胞的吸收。结果表明。

乙双吗啉对阿霉素诱导的大鼠脂质过氧化水平的影响

对阿霉素诱导的大鼠脂质过氧化代谢异常以及乙双吗啉(Bimolane,AT-1727)的拮抗作用进行了研究。发现阿霉素使大鼠心肌脂质过氧化水平升高,应用乙双吗啉后可显著得到抑制(P<0.005),两药合用对血浆及肝脏的脂质过氧化代谢无影响。结果提示:乙双吗啉对阿霉素致心脏毒性的保护作用与抗脂质过氧化有关。

冬凌草甲素诱导HL-60细胞凋亡

目的 研究冬凌草甲素诱导人白血病HL 6 0细胞凋亡的作用。方法 形态学观察 ,DNA凝胶电泳及流式细胞术。结果 冬凌草甲素能显著地诱导HL 6 0细胞发生凋亡 ,其作用呈明显的浓度效应关系和时间依赖性。形态学观察可见凋亡小体的形成 ,琼脂糖凝胶电泳可见明显的DNA梯带 ;流式细胞仪检测到G1亚峰。结论 冬凌草甲素能诱导HL 6 0细胞凋亡 ,并与其细胞杀伤活性相互平行 。

冬凌草甲素对肿瘤细胞钠泵活性的影响

以（８６）Ｒｂ示踪法，观察３种肿瘤细胞的钠系转运活性及冬凌草甲素（Ｏｒｉｄ．）对其的影响。结果表明：（Ｏｒｉｄ．）腹腔注射及体外作用均能显著抑制艾氏腹水瘤细胞的钠系转运功能；体外作用１２小时，半数抑制浓度约为５μｇ／ｍｌ，在此浓度下，药物作用１小时的抑制率为２２％。同时测定人癌细胞系７９０１，Ｈｅｐ－２的钠泵活性高于人胚肺纤维母细胞系ＳＬ，且对Ｏｒｉｄ．较敏感。本文结果提示Ｏｒｉｄ．抗癌机理可能与钠泵活性抑制有关，从生物膜转运角度进一步证明Ｏｒｉｄ．的抗肿瘤作用。

姜黄素对四氯化碳诱导大鼠肝纤维化的影响

目的:观察姜黄素(Cur)预防给药对四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化的影响,并探讨其相关的分子机制。方法:64只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(10只),模型对照组(14只)和水飞蓟宾组(10只),Cur低、中、高剂量组(各10只)。模型对照、水飞蓟宾和Cur组均采用皮下注射体积分数40%CCl4复制肝纤维化模型,水飞蓟宾组大鼠同时给予0.5g/L水飞蓟宾,Cur低、中、高剂量组大鼠同时分别给予1、2、4g/L的Cur灌胃7周。HE染色观察各组大鼠肝组织的病理形态,进行肝纤维化分级;血清生化学检测谷氨酸氨基转移酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及碱性磷酸酶(ALP)含量,计算白球蛋白比值(A/G);放射免疫法测定透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)、层粘连蛋白(LN)以及胶原Ⅳ(C-Ⅳ)的含量变化;免疫组织化学染色法检测肝组织过氧化物酶增殖体激活受体γ(PPAR-γ)和CollagenⅠ的含量。结果:Cur预防给药可明显降低ALT、AST的活性,升高A/G,同时降低血清HA、LN、PⅢNP、C-Ⅳ含量(F=11.535,19.927,4.831,16.415,17.596,19.692,21.535,P<0.05);病理形态显示Cur对大鼠的肝纤维化进展有明显的抑制作用;Cur预防给药使受试动物肝组织PPAR-γ表达明显增加、CollagenⅠ的表达明显减少(F=6.519,7.541,P<0.05)。结论:Cur预防给药能明显抑制CCl4诱导的大鼠肝纤维化形成,可能与激活PPAR-γ,减少CollagenⅠ的产生,预防细胞外基质的过量沉积有关。

白细胞介素-6基因多态性与高脂血症的相关性

目的探讨高血脂患者白细胞介素-6（IL-6）启动子-634C/G基因多态性是否为高脂血症的遗传因素。方法筛选高脂血症患者197例,健康志愿者200例。采用酚-氯仿法提取外周血DNA,PCR-RFLP技术检测IL-6基因多态性。结果高脂血症组CC、CG和GG基因型的频率分别为51.3%（101/197）,37.6%（74/197）和11.1%（22/197）,与正常对照组〔CC：65%（130/200）;CG：28.5%（57/200）;GG：6.5%（13/200）〕相比差异具有显著性（P〈0.05）。关联分析显示G等位基因是高脂血症的一个独立危险因素（OR=1.736,95%CI=1.257~2.397）。高脂血症组中,CG及GG基因型者的总胆固醇（TC）水平明显高于CC型,GG基因型高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平明显低于CC型。结论 IL-6-634 CG及GG基因型和G等位基因携带者具有高脂血症易感性。