纳米模拟酶的制备与活性

游离酶价格昂贵,活性不稳定,在高温、强酸和强碱条件下易失活。纳米模拟酶性能稳定,成本低,具有类酶活性。通过同步还原法制备一种具有类过氧化氢酶活性的纳米模拟酶(Cu-rGO),并负载磁性纳米粒子,制备磁性纳米模拟酶(Cu-rGO-Fe_(3)O_(4)),进行谱学表征以及条件优化,最后用于H_(2)O_(2)的分解。

一个Ⅱ型甲烷氧化菌中甲烷单加氧酶羟基化酶的分离纯化和理化性质

甲烷氧化细菌能够催化甲烷和一系列小分子烃类化合物的羟基化反应,对控制全球变暖起着重要作用,在工业催化和生物除污中具有非凡的潜能。应用层析方法纯化了Ⅱ型甲烷氧化细菌MethylosinustrichosporiumIMV3011中甲烷单加氧酶的羟基化酶,并对其进行了表征。凝胶过滤法测定了该酶分子量为201.3kD;SDS-PAGE表明羟基化酶含有三个亚基(αβγ),分子量分别为58kD、36kD和23kD,比较两种方法证明该羟基化酶是一个同型二聚体构型(αβγ)2,总分子量为234kD。薄层等电聚焦测定该酶的等电点为5.2。酶的比活力为603.6nmol/(min.mg),活力回收为34.3%。HPLC法测定该酶的纯度在95%以上。原子吸收光谱显示每分子羟基化酶中含有3.02个Fe原子。羟基化酶的稳定性pH值为6.2～7.5,稳定性温度为低于35℃。菌株IMV3011的细胞表观构型呈现了长型、稍微弯曲的杆状形态。

马铃薯凝集素的制备

甘肃马铃薯（2．2kg）经缓冲液提取、硫酸铵分级沉淀、DEAE－纤维素、CM－纤维素离子交换、SephadexG150，Senharose6B葡聚糖凝胶层析纯化、水透析和冻干后制得凝集素，总活力为495120u，比活为6641．89u／mg；经聚丙烯改胺凝胶电泳证明是均一的；氨基酸分析表明富含天冬氨酸、谷氨酸、亮氨酸和赖氨酸。

牦牛血红细胞Cu Zn-SOD稳定性的研究

研究了牦牛血红细胞Cu、Zn-SOD的部分理化性质,结果表明其分子量、紫外吸收率与黄牛SOD的接近,而在Cu和Zn的含量方面存在较大差异。牦牛Cu、Zn-SOD对pH及温度的变化不敏感,但抗胰蛋白酶和抗H_2O_2的能力稍差。

甘肃马铃薯凝集素部分理化性质的研究

目的 :研究甘肃马铃薯凝集素的部分理化性质。方法 :采用SephadexG 15 0凝胶过滤法测定马铃薯凝集素 (STL)的分子量 ;加热法测定其热稳定性 ;硫酸 苯酚法测定中性糖含量 ;光谱法测定其紫外、红外光谱特征。结果 :该凝集素分子量为 10 2kD ,含有 48.5 %的中性糖 ,富含天冬氨酸。热稳定性试验表明 ,在 5 0℃以下对热不敏感 ,在 5 0℃以上对热敏感。光谱分析表明 :该凝集素的最大紫外吸收波长为 2 76nm ,在中红外区有三个特征吸收频率 16 40cm-1,3 15 0cm-1和 3 40 0cm-1。结论 :该研究为马铃薯凝集素的进一步研究、开发提供了科学依据。

邻苯三酚自氧化法测定牦牛血Cu、Zn-SOD活力的研究

超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)是对超氧阴离子起歧化作用的金属酶,按其所含金属原子不同分为Cu、Zn-SOD,Fe-SOD,Mn-SOD三大类。目前对牦牛血SOD的研究及其测定尚属空白。自1985年我们从事牦牛血SOD研究中选用了邻苯三酚自氧化法,并对部分条件进行了改进,经过对牦牛血SOD多次测定,结果表明,该方法在18℃,pH8.5等条件下,变异系数(CV％)为1.61％,重现性好,准确,完全适合牦牛血Cu、Zn-SOD活力测定。

EM生物技术和中草药促生长素育肥绵羊效果研究

以秸秆为主的日粮类型应用中草药促生长素和EM发酵秸秆对夏洛来、无角陶赛特和边区来斯特 3品种的杂交一代羊进行育肥试验 ,中草药促生长素组和EM发酵秸秆组平均日增重分别达到 81 4 8g和 76 54g ,比对照组分别提高 12 0 8%和 5 2 6% ;秸秆为主的日粮类型利用率达到97 80 %以上 ;3个肉羊品种对秸秆饲料类型的利用效果有差异 ,夏洛来、无角陶赛特和边区来斯特杂交一代的平均日增重分别为 94 1g、70 4 g和 64 3g。

天然抗菌剂──抗菌肽的研究进展

抗菌肽是生物体内诱导产生的一种具有强抗菌作用的多肽类物质，分子量为４０００道尔顿左右，由３０多个氨基酸组成，它的两亲性α螺旋结构可使细胞膜形成通道，破坏了膜势，使细胞内物质外漏，导致细胞死亡，起到杀菌作用。世界上第一个被发现的抗菌肽是由瑞典科学家Ｂｏ...

甲烷氧化菌Methylomonas sp.GYJ3中甲烷单加氧酶基因与16S rRNA序列分析

甲烷氧化细菌中的关键酶系甲烷单加氧酶是一个含双核铁的多组份氧化酶,常温、常压下能够催化甲烷转化为甲醇。对甲烷氧化细菌Methylomonas sp.GYJ3中溶解性甲烷单加氧酶基因和16SrDNA进行了测序与分析。利用已知相关基因数据库信息,设计了PCR引物和测序引物,获得了满意的测序结果。全长的溶解性甲烷单加氧酶基因为5690bp,部分16S rDNA的序列长度为1280bp。与已发表的甲烷氧化细菌中甲烷单加氧酶进行了比较,结果表明MMOX组份中氨基酸序列的同一性为78%到99%,基因序列的同一性为71%到97%,6个组份中orfY片段的同一性相对较低。MMOX氨基酸序列的多序列联配表明,MMOX序列具有高度保守性,特别是在双核铁中心区域。16S rDNA进化分析显示Methylomonas sp.GYJ3与γ蛋白细菌是相关联的,基于MMOX氨基酸序列的进化分析证明,与Methylomonas sp.GYJ3最近似的菌株是Ⅰ型甲烷氧化细菌Methylomonas sp.KSWⅢ。综合分析表明,菌株GYJ3属于Ⅰ型甲烷氧化细菌Methylomonas sp.属。这个结果为Ⅰ型甲烷氧化细菌也能表达溶解性甲烷单加氧酶提供了新的证据。羟基化酶的理论等电点是6.28,理论分子量为248874.41Da。

SOD口服液的研制

介绍了ＳＯＤ口服液的制备工艺，质量标准，制剂的稳定性及毒理学研究，该口服液的主要成分为ＳＯＤ、Ｖｃ、并含有１８种游离氨基酸，包括人体必需的８种氨基酸，动物实验表明：无毒、无任何副作用。

动物血Cu、Zn-SOD药用价值

机体生命活动是一系列酶促化学反应的过程。在这个过程中有大量超氧化物阴离子自由基（O2-）产生,其本身及由它衍生的一系列中间产物有很强的毒性,对机体有毒害作用。但体内同时存在着超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase,SOD）,成为O2-的重要清除剂,从而使机体仍能维持正常的生理功能。自从英国学者Harman等1956年提出自由基学说之后,Mocord与Fridovich等首先从牛红细胞中提纯了Cu、Zn-SOD,引起生化界、医药界的高度重视。几十年来,随着科学技术的发展,SOD已进入临床试验。

磁性壳聚糖微球的研究进展

磁性氧化铁纳米粒子(Fe3O4,γ-Fe2O3等)因具有尺寸小、超顺磁性和低毒性等特点,已经引起了生物化工、医药工业研究领域的广泛关注。磁性壳聚糖微球具有表面非常光滑的球形结构。近年来,已经制备出了平均粒径在10～2.5×105 nm之间的磁性壳聚糖微球,并在生物医药、食品工程和污水处理等许多领域已经取得了初步的应用,特别是在污水处理和酶固定化领域。本文综述了近年来磁性氧化铁纳米粒子和磁性壳聚糖微球的制备方法、磁性壳聚糖微球的改性方法及应用的最新研究成果。

利用微藻生产生物柴油的研究进展

在世界能源危机的影响下,生物质能源由于可再生、低污染等优势,被认为是在未来一个较短时期内最有潜力缓解能源危机的石油替代品。而微藻由于具有生物量大、光合效率高、生长周期短、油脂含量高和环境友好等优点,有望破解后石油时代的能源危机。重点阐述了产油微藻的种类,提高微藻油脂含量的策略,微藻细胞的采收技术,微藻油脂的提取和转酯化反应等内容;分析了微藻生物柴油产业发展中亟待解决的一些问题。

磁性壳聚糖微球的制备及其用于甲酸脱氢酶的固定化

分别采用乳化交联法和共沉淀法制备磁性壳聚糖微球载体,并对形貌结构进行比较,结果表明,采用共沉淀法制备的磁性壳聚糖微球负载Fe3O4的效果好,故将其作为载体固定甲酸脱氢酶。最佳固定化条件:添加酶量9 U.g-1,pH=7.0,固定化时间5 h。游离酶和固定化酶的最适宜反应温度分别为50℃和30℃;游离酶的最适宜pH=7.0,固定化酶的最适宜pH=6.0;将游离酶和固定化酶分别置于60℃恒温水浴放置180 min后,游离酶和固定化酶的相对酶活力分别为0.78%和40.39%;将游离酶和固定化酶置于不同pH的缓冲液中保存1 h后,在强酸(pH=2.0)和强碱(pH=10.0)条件下,固定化酶的相对酶活力分别为11.03%和38.43%,游离酶已全部失活;固定化酶重复使用6次后,相对酶活力为73.53%,表明固定化酶具有较好的热稳定性、酸碱稳定性和操作稳定性。

牦牛血铜锌超氧化物歧化酶的提纯研究

本文首次以牦牛血红细胞为原料,采用乙醇-氯仿处理,丙酮沉淀和DE AE-32纤维素柱层析等分离手段提取纯化出铜锌超氧化物歧化酶。本法每升血红细胞可获得纯化的超氧化物歧化酶总活力为360000单位,比活为13000U/mg蛋白(邻苯三酚法),活力回收为64.3％。聚丙烯酰胺凝胶电泳(pH8.9,Tris-Gly缓冲液)显示清晰的两条带。

添加EM发酵秸秆的日粮对绵羊育肥增重的试验效果

本试验以开发农区秸秆资源，运用ＥＭ微生物发酵秸秆，开展一岁龄肉羊全舍饲育肥研究为目的。在对天的饲喂试验中，添加ＥＭ发酵秸秆组比对照组体重净增２０.６％～２９.９％，组间差异显著（Ｐ＜０.０５）。比秸秆地放牧加补饲且提高５３.９％－６５.７％，差异达到极显著（Ｐ＜０.００１）。舍饲组高于放牧组２７.６％，达到差异显著（Ｐ<０.０５）。为农区应用秸秆养畜开辟了有效途径。

旱农寿阳类型区引进肉羊品种开展杂交的示范

引入夏洛莱、无角陶赛特和边区莱斯特三个肉羊品种与当地细毛杂种羊开展杂交示范。结果表明 :杂交一代 4月龄断奶羔羊平均活重分别达到 2 2 11、2 2 2 0和 2 1 77kg ,差异不显著 (P >0 0 5 )。受胎母羊断奶羔羊重依次为 18 17、2 0 79和2 0 5 1kg ,前者较后者分别降低 14 3 %和 12 6%

牦牛血白蛋白的提取试验

我们在进行动物血液综合利用研究开发中,对牦牛血浆白蛋白的提取纯化程序进行了多次试验,研制成功一条简单易行的提取工艺,报道如下。(一)试验材料 ①硫酸铵:分析纯(北京化学试剂厂)、化学纯(兰州化学试剂厂)。②辛酸钠:化学纯(上海化学试剂总厂二分厂)。③透析用玻璃纸。④醋酸纤维薄膜电泳设备及试剂。⑤健康牦牛血浆,来源于甘肃省甘南藏族自治州。(二)试验方法 血提取白蛋白操作如下:

模拟煤炭气化废水中苯酚的微生物降解

苯酚是煤炭气化废水中一种典型的有机污染物,其处理受到广泛关注和研究。本文采用连续驯化和平板划线法从焦化废水和气化废水中筛选出两种苯酚高效降解菌株,分别命名为JHFS-1和QHFS-1;通过苯酚溶液的微生物降解实验研究了温度、pH、摇床转速、细菌接种量、Cu^(2+)和Mn^(2+)等对苯酚降解效果的影响,还考察了模拟煤炭气化产生的煤气洗涤水的微生物净化修复效果。结果发现:经16S rDNA基因测序和微生物学鉴定,两种菌株均为醋酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcoaceticus);30℃、pH=6.0、摇床转速120r/min、接种量13%是苯酚的最优降解条件,经24h处理,苯酚降解率可达94.31%;Cu^(2+)对JHFS-1降解苯酚有一定的抑制作用,Mn^(2+)一定程度上促进JHFS-1对苯酚的降解;微生物对苯酚的降解遵从羟基化途径和羧基化途径;JHFS-1菌可有效降解煤气洗涤水中的有机污染物,其总有机碳(TOC)降解率达58.43%。