海南省39株幽门螺杆菌的耐药性及毒力基因特征

目的了解海南省幽门螺杆菌(Hp)耐药性及其毒力基因vacA、cagA和iceA基因型特征。方法对146例上消化道症状疾病患者进行胃镜检查,取胃黏膜组织进行Hp的分离和培养,对Hp进行药敏检测;通过聚合酶链式反应(PCR)对毒力基因cagA、vacA和iceA进行检测和分型,cagA测序进行聚类分析、并构建系统进化树;使用Fisher确切概率法分析各型毒力基因和患者疾病发生的相关性。结果共培养出39株Hp,对阿莫西林和克拉霉素的耐药率分别为2.6%和48.7%;39株均为vacA^(+)菌株,iceA 1型26株、2型13株;33株为cagA^(+)菌株,其中5株为西方型(EPIYA-ABC型),28株为东亚型(EPIYA-ABD型);cagA^(+)和vacA^(+)菌株与胃和十二指肠疾病有显著的相关性(P<0.05),iceA则无显著性差异(P>0.05)。结论海南省胃和十二指肠Hp患者中Hp毒力基因多样化,vacA s1am2/cagA^(+)基因型在消化性溃疡患者中占优势,不同毒力基因型对胃和十二指肠疾病的发生具有明显的差别,阿莫西林可作为该地区根除Hp首选抗生素。

VSD联合表皮生长因子治疗皮肤软组织缺损的效果研究

目的:探讨负压封闭引流(Vacuum sealing drainage,VSD)联合表皮生长因子治疗皮肤软组织缺损的效果。方法:选取2017年1月-2018年1月治疗的四肢皮肤软组织缺损患者102例,根据最终采取的治疗方案分为联合组(n=41)、VSD组(n=31)和表皮生长因子组(n=30),所有患者行手术清创并行自体皮片移植修复,联合组给予VSD联合表皮生长因子治疗,VSD组给予单纯VSD治疗,表皮生长因子组给予表皮生长因子治疗,观察各组植皮存活率、瘢痕评分及疼痛程度,同时检测治疗前后干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)和C反应蛋白(C-reactiveprotein,CRP)。结果:联合组植皮存活率为95.12%(39/41),明显高于VSD组的74.19%(23/31)和表皮生长因子组的73.33%(22/30),差异有统计学意义(P<0.05)。联合组瘢痕柔软度、血管分布、厚度、色泽评分及总分明显低于VSD组和表皮生长因子组,差异有统计学意义(P<0.05)。各组治疗后7dIFN-γ、IL-6和CRP明显高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);联合组治疗后7dIFN-γ、IL-6和CRP明显低于VSD组和表皮生长因子组,差异有统计学意义(P<0.05)。联合组术后1周、1个月VAS评分明显低于VSD组和表皮生长因子组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:VSD联合表皮生长因子治疗皮肤软组织缺损有较好的效果,值得临床应用。

TIM-1和TIM-4 mRNA在HAV患者中的表达及其临床意义

目的观察典型病程甲型病毒性肝炎(HAV)患者外周血中T细胞免疫球蛋白域蛋白-1(TIM-1)和T细胞免疫球蛋白域蛋白-4(TIM-4)mRNA的表达水平,探讨HAV患者病情进展的不同时期TIM-1和TIM-4 mRNA水平与HAV RNA含量,HAV免疫球蛋白M(Ig M)、免疫球蛋白G(Ig G)浓度及肝功能指标的关系。方法选取HAV典型病程的30例患者作为HAV组,分别于潜伏期或黄疸前期、黄疸期及恢复期留取血液标本,以同期30例健康体检者作为对照组,收集血液标本。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测TIM-1和TIM-4 mRNA表达水平,同时检测HAV患者外周血HAV RNA含量,酶联免疫吸附法检测HAV患者外周血HAV抗体IgM、IgG滴度水平,全自动生化分析仪检测肝功能指标谷丙转氨酶、谷草转氨酶及总胆红素。结果 HAV组患者外周血TIM-1和TIM-4 mRNA表达水平高于对照组患者(P<0.05)。随着疾病进程的继续,TIM-1及TIM-4 mRNA表达水平于黄疸期达峰值,恢复期下降。TIM-1 mRNA表达水平与HAV患者Ig M滴度、AST及TBIL呈正相关(P<0.05),与Ig G滴度无关(P>0.05)。结论 HAV患者外周血中TIM-1和TIM-4 mRNA的表达水平与HAV的疾病进展有较好的拟合性,TIM-1和TIM-4 mRNA可能在HAV的发生、发展中发挥作用。

甲型肝炎患者黏蛋白域蛋白1和4表达与抗体产生的相关性研究

目的探讨甲型肝炎患者恢复期T细胞免疫球蛋白及黏蛋白域蛋白(TIM)1和4 mRNA水平与体液免疫的关系,了解TIM-1和TIM-4在体液免疫抗体产生过程中的相关作用。方法选取甲型病毒性肝炎典型病程的60例患者于恢复期留取血液标本,以同期60例健康体检志愿者血液标本作为对照,qRTPCR检测TIM-1和TIM-4 mRNA水平,ELISA检测外周血白介素4(IL-4)、白介素10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和血清总Ig(IgG、IgM和IgA)水平。结果甲型病毒性肝炎患者外周血TIM-1及TIM-4 mRNA的表达水平高于对照组(P<0.05);甲型病毒性肝炎患者血清中IL-4和IL-10水平高于对照组(P<0.05);甲型病毒性肝炎患者血清总Ig(IgG、IgM和IgA)水平高于正常对照组(P<0.05)。结论TIM-1及TIM-4水平升高可能通过提高IL-4、IL-10和TNF-α来增强体液免疫的功能。

白藜芦醇对实验性兔肺动脉高压相关炎症因子表达的影响

目的通过检测白藜芦醇(Res)干预后实验性兔肺动脉高压(PAH)模型肺组织中相关细胞因子表达水平的差异,探讨其在PAH发病机制中的作用。方法将36只新西兰兔随机分为6组。对照组(A组):动物皮下注射二甲基亚砜30 mg/kg。造模组:实验组动物适应性饲养1周后,皮下注射野百合碱30 mg/kg,连续注射7 d造模,然后将造模动物随机分为5组:模型组(B组)、实验药物组(C组)、高剂量组(D1组)、中剂量组(D2组)、低剂量组(D3组),每组6只。注射后第45天,分别进行B超、心肌细胞苏木精-伊红染色和Tunnel染色,检测造模是否成功,造模成功后按体重计算给药剂量,受试药物高剂量120 mg/(kg·d),中剂量60 mg/(kg·d),低剂量30 mg/(kg·d),阳性对照药物前列腺环素1 mg/(kg·d)喂饲相应的动物,1次/d,连续6周,每日观察动物的食量、活动、毛色及大小便变化,每周称体重。每隔2周随机采集各组实验动物外周血样本,采用酶联免疫吸附法试剂盒,分别对实验动物血清3种生物学标志物[转录因子-κB(NF-κB)、环氧化酶-2(COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)]的含量进行检测。结果 Res干预实验性兔PAH模型后,NF-κB、COX-2、i Nos血清表达水平改善,其中高剂量组改善效果优于阳性对照药物前列腺环素。且在实验中经对比发现,NF-κB的特异性最明显,其他指标虽然有变化,但显著性不如NF-κB。结论 Res抑制血清中分泌NF-κB、COX-2、i Nos的能力优于前列腺环素,Res可以通过抑制NF-κB/i NOS/COX2通路避免细胞损伤,改善PAH症状,表现出和前列腺环素相同或更好的作用。

血清载脂蛋白A1及B对老年肝细胞癌患者术后生存率的预测价值

目的探讨血清载脂蛋白(Apo)A1与ApoB对老年肝癌患者术后生存率的预测价值。方法选择接受手术治疗的患者100例为研究对象,收集患者的临床指标及血清学和生化指标。通过电话或嘱患者来院复查的方式进行随访,每月随访1次。结果多因素Cox回归模型中年龄、肿瘤直径、门静脉癌检(PVTT)、甲胎蛋白(AFP)、白蛋白(Alb)、ApoA1、ApoB与患者术后总生存率有关。将患者分别按照ApoA11.5 g/L与ApoB 1.1 g/L分为低水平组与高水平组。低水平ApoA1组平均生存时间显著低于高水平组(P<0.01)。高水平ApoB组平均生存时间显著低于低水平组(P<0.01)。结论血清ApoA1与ApoB对老年肝癌患者术后生存率有较好的预测价值,低水平ApoA1与高水平ApoB与患者术后预后不良相关。

胰腺导管腺癌中microRNA-21与TGF-β1信号通路相关

目的:对胰腺导管腺癌样本进行基因分析,筛选与胰腺导管腺癌相关的microRNA(miRNA),并初步分析目标miRNA与胰腺癌转化生长因子-β1(TGF-β1)信号通路的相关性。方法:收集在海南省中医院住院的胰腺导管癌患者术前外周静脉血血清标本19份,健康体检人群的外周静脉血血清标本21份作为非胰腺导管癌对照组。利用GCBI(Gene-Cloud Biotechnology Information)数据平台筛选与胰腺导管腺癌样本有关的基因并对其进行生物信息学分析,将筛选出的基因作为研究对象,用real-time PCR和蛋白质印迹法验证该基因在胰腺导管腺癌中的表达。通过改变胰腺导管腺癌细胞中该基因的表达水平观察其与TGF-β1之间的关系。结果:通过聚类分析和基因功能富集分析筛选出miRNA-21为胰腺导管癌相关基因。MiRNA-21在胰腺导管腺癌患者体内高表达。在miRNA-21过表达的PANC-1细胞中,TGF-β1表达受到抑制;但当miRNA-21的表达受到抑制时,TGF-β1的表达明显上升。结论:MiRNA-21在胰腺导管腺癌患者体内高表达,可调控TGF-β1的表达,从而参与胰腺导管腺癌的发生发展。

MicroRNA-21对肺高压血管平滑肌细胞增殖的影响

目的研究micro RNA-21(mi RNA-21)在Wnt/β-catenin信号通路中抑制肺高压(PH)血管平滑肌细胞增殖的可能机制。方法复制外源性mi RNA-21干扰的野百合碱大鼠肺高压原代肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)模型,分别用Western blot和实时荧光定量PCR检测外源性mi RNA-21对Wnt通路中β-catenin、Cyclin D1和拮抗剂DDK1表达的影响。结果外源性抑制mi RNA-21表达时,PASMCs中β-catenin、Cyclin D1表达水平增高,拮抗剂DDK1表达降低,拮抗作用减弱;而外源性上调mi RNA-21表达时,PASMCs中β-catenin、Cyclin D1表达水平降低,拮抗剂DDK1表达增高,拮抗作用增强。结论mi RNA-21的早期干预可通过调控Wnt通路的拮抗剂DKK1作用与Wnt/β-catenin信号通路参与PH肺血管重构。

PLT-I、PLT-F、RDW、MCHC指标变化与检验标本不同保存条件的关系

目的探讨电阻抗法血小板计数(PLT-I)、荧光通道血小板计数(PLT-F)、红细胞分布宽度(RDW)和红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)指标变化与检验标本不同保存条件的关系。方法选取2017年1月至2018年10月体检的健康者460例,均采集静脉血标本,每个标本等分2份,在4℃、25℃下保存,分别于即刻、1 h、3 h、6 h、12 h和24 h检测PLT-I、PLT-F、RDW和MCHC水平。结果 4℃条件下,保存24 h后PLT-I和MCHC水平与即刻检测时的比较,差异有统计学意义(P<0.05),即刻、1 h、3 h、6 h、12 h和24 h PLT-F和RDW比较差异无统计学意义(P>0.05);25℃条件下,保存6 h、12 h和24 h后RDW和MCHC明显高于即刻检测时的,差异有统计学意义(P<0.05),保存24 h后PLT-I明显低于即刻检测时(P<0.05),即刻、1 h、3 h、6 h、12 h和24 h PLT-F比较差异无统计学意义(P<0.05);保存6 h、12 h和24 h时,25℃条件下,RDW水平明显高于4℃下的水平(P<0.05);保存12 h、24 h时,25℃下MCHC明显高于4℃下的水平(P<0.05)。结论 PLT-I、PLT-F、RDW和MCHC指标变化与样本保存的温度、时间有关,以4℃,保存24 h内为宜,日常检测中应注意样本保存的时间和温度。

海口市公务员体检空腹血糖水平调查研究

目的:了解海口市公务员空腹血糖分布情况,为预防糖尿病提供依据。方法:用葡萄糖己酶法测定空腹血糖(FPG),以FPG≥6.11mmol/L为高血糖症,并按不同年龄段分组统计分析。结果:8816例体检者中,高血糖率为0.30,其中男性高血糖率为0.23,女性高血糖率为0.23,两组间差异无统计学意义。男性60~69岁组高血糖率最高,占0.34,与其余各组相比差异有统计学意义(P均<0.05)。女性高血糖率高发段也在60~69岁组,患病率高达0.36,与60岁以前各组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:70岁前高血糖率的发生随年龄的增长而增加。

血清淀粉样蛋白A在胃癌诊断中的应用

目的:探讨胃癌患者血清淀粉样蛋白A含量在胃癌诊断中的应用价值。方法:选取在本院收治的120例胃癌患者和30例健康体检者血清为实验对象,采用ELISA法检测血清中SAA1的表达水平,分析其与临床病理因素的相关性。结果:胃癌患者血清中SAA1表达含量显著高于健康体检者,差异具有统计学意义(t=-9.725,P<0.001)。ROC曲线分析显示,SAA1诊断AUC为0.907(95%CI:0.838~0.976),检测阈值为29.02μg/mL,其诊断敏感性和特异性分别为93.3%和86.7%。患者SAA1的表达水平与胃癌患者的性别(r=0.056,P>0.05)、年龄(r=-0.032,P>0.05)、肿瘤转移(r=-0.173,P>0.05)情况无明显相关,与肿瘤的大小(r=-0.228,P<0.05)和侵袭程度(r=-0.409,P<0.05)具有相关性,且随着肿瘤侵袭程度的增加而增加。结论:胃癌患者血清SAA1表达水平显著升高,可作为胃癌诊断的新型潜在标志物。

卡介菌多糖对胰腺癌细胞系增殖及凋亡影响的研究

目的探讨卡介菌多糖对胰腺癌细胞系增殖和抗凋亡机制。方法 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT)比色法MTT法检测卡介菌多糖对胰腺癌PANC-1、SW1990、原代细胞的增殖抑制作用;流式细胞术检测卡介菌多糖对胰腺癌PANC-1、SW1990、原代细胞的凋亡率。结果高、中、低浓度的卡介菌多糖组对PANC-1、SW1990、原代细胞增殖抑制率(高浓度分别为:9.53±0.82%、10.02±0.95%、9.08±0.78%;中浓度分别为:8.84±0.77%、9.62±0.95%、8.18±0.71%;低浓度分别为:5.72±0.48%、6.48±0.48%、5.06±0.44%)明显高于空白对照组的3.92±0.28%、4.72±0.40%、2.91±0.26%和卡介菌多糖核酸组的4.82±0.48%、5.46±0.46%、4.22±0.38%;卡介菌多糖与吉西他滨联用对PANC-1、SW1990、原代细胞增殖抑制率分别为16.54±1.56%、18.28±1.86%、15.88±1.92%,优于GEM或卡介菌多糖单独使用,也高于卡介菌多糖核酸与吉西他滨联用的13.82±1.42%、14.88±1.72%、12.32±1.18%,其差异有统计学意义(均P<0.05)。在对PANC-1、SW1990、原代细胞凋亡率方面同样高、中、低浓度的卡介菌多糖组明显高于空白对照组和卡介菌多糖核酸组,卡介菌多糖与GEM联用,优于GEM或卡介菌多糖单独使用,也高于卡介菌多糖核酸与GEM联用,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论卡介菌多糖具有抗肿瘤作用,其作用效果优于卡介菌多糖核酸,与吉西他滨联合作用效果更显著。