血清乙醇脱氢酶活性测定及其临床意义

本文建立一种用自动生化分析仪双试剂法检测血清乙醇脱氢酶（ADH）活性的方法。同时对100例肝功正常者与9例原发性肝癌、10例肝硬化、40例肝炎患者测定血清该酶活性。在反应体系中，NAD+和乙醇浓度分别为10．0mmol／L和25．0mmol／L，缓冲液为pH9．00的0．1mol／L甘氨酸-NaOH溶液。ADH对NAD+和乙醇的Km值分别为1．67mmol／L和3．03mmol／L。批内CV为0．7％～5.4％。肝功正常者血清ADH活性为1．4±1．2U／L。原发性肝癌为11．4±2．5U／L，肝硬化为4．6±1．5U／L和肝炎为5．5±1．6U／L。这些患者血清ADH活性显著高于肝功正常者。原发性肝癌患者血清ADH活性显著高于肝硬化和肝炎患者。这种简便、准确、灵敏的测定ADH活性方法可用于临床常规分析。

畲族Gc、PGM1、AcP_1、6-ΡGD、ADA和AK1的遗传多态性

对畲族血浆组特异性成分（Ｇｃ）、红细胞磷酸葡萄糖变位酶１（ＰＧＭ１）、酸性磷酸酶（ＡｃＰ１）、６－磷酸葡萄糖酸脱氢酶（６－ＰＧＤ）、腺苷脱氨酶（ＡＤＡ）、腺苷酸激酶（ＡＫ１）的遗传多态性进行了研究。Ｇｃ与ＰＧＭ１是用薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦分析的，ＡｃＰ１、６－ＰＧＤ、ＡＤＡ及ＡＫ１是用淀粉凝胶电泳分析的。各基因座的基因频率分别为Ｇｃ＊１Ｆ０．４７２２、Ｇｃ＊１Ｓ０．２４２１、Ｇｃ＊２０．２７３８；ＰＧＭ１＊１Ａ０．５３５７、ＰＧＭ１＊１Ｂ０．１６２７、ＰＧＭ１＊２Ａ０．１５８７、ＰＧＭ１＊２Ｂ０．１４２９；ＡｃＰ＊１Ａ０．１８２５、ＡｃＰ１＊Ｂ０．８１７５；６－ＰＧＤ＊Ａ０．９６８３、６－ＰＧＤ＊Ｂ０．０２７８；ＡＤＡ＊１０．９８８１、ＡＤＡ＊２０．０１１９；ＡＫ１＊１１．００００。畲族Ｇｃ、ＰＧＭ１、ＡｃＰ１、６－ＰＧＤ和ＡＤＡ基因为多态，而ＡＫ１基因为单态。发现１例带有６－ＰＧＤ＊Ｒ和３例带有Ｇｃ＊１Ａ２变异等位基因的个体，其中Ｇｃ＊１Ａ２基因频率为０．０１１９，达到多态水平。

2型糖尿病并发高血压患者内皮功能的血浆生物指标的变化

目的探讨2型糖尿病患者并发高血压时内皮细胞损伤或功能紊乱的血浆生物指标的变化。方法测定31例糖尿病并发高血压患者、35例单纯糖尿病患者和32例正常人血压、空腹血糖、血浆甘油三酯、胆固醇、血栓调节蛋白(Tm)、一氧化氮(NO)、vW因子水平。统计学方法用t检验和直线相关分析。结果2型糖尿病并发高血压患者收缩压、舒张压、空腹血糖、血浆甘油三酯、胆固醇、Tm和vW因子高于正常人(P<0.01),NO低于正常人(P<0.01)。单纯糖尿病患者空腹血糖、血浆甘油三酯、胆固醇、Tm和vW因子高于正常人(P<0.01或P<0.05)。糖尿病并发高血压患者收缩压、舒张压、血浆甘油三酯、胆固醇、Tm和vW因子高于单纯糖尿病患者(P<0.01或P<0.05),NO低于单纯糖尿病患者(P<0.01)。2型糖尿病患者Tm与收缩压、舒张压、甘油三酯、胆固醇和vW因子呈正相关(r=0.353、r=0.324、r=0.257、r=0.265、r=0.404,P<0.01或P<0.05),vW因子与收缩压、舒张压、甘油三酯和胆固醇呈正相关(r=0.329、r=0.289、r=0.254、r=0.256,P<0.01或P<0.05),NO与收缩压、舒张压、Tm及vW因子呈负相关(r=-0.432、r=-0.402、r=-0.415、r=-0.467,P<0.01)。结论2型糖尿病合并高血压患者存在内皮细胞损伤或功能紊乱,其高血压的发生发展可能与血管内皮细胞的损伤或功能紊乱相关。

冠心病患者红细胞ATP酶、超氧化物歧化酶、钠、钾、钙、镁离子和血浆脂质过氧化物的变化及其意义

目的探讨冠心病患者红细胞ＡＴＰ酶、超氧化物歧化酶、钠、钾、钙、镁离子和血浆脂质过氧化物的变化。方法测定３８例冠心病患者和４２例正常人红细胞超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶、Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性及Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋含量和血浆脂质过氧化物（ＬＰＯ）含量。统计方法采用ｔ检验和直线相关分析。结果冠心病患者红细胞ＳＯＤ、Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶、Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性及Ｋ＋、Ｍｇ２＋含量显著低于正常人（Ｐ＜０．０１），红细胞Ｎａ＋、Ｃａ２＋含量和血浆ＬＰＯ含量显著高于正常人（Ｐ＜０．０１）。冠心病患者红细胞Ｎａ＋与Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶、Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性呈负相关，与红细胞Ｃａ２＋含量呈正相关（Ｐ＜０．０１）。红细胞Ｃａ２＋与Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶、Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性都呈负相关（Ｐ分别＜０．０１和＜０．０５）。红细胞Ｋ＋与Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性及Ｍｇ２＋含量呈正相关（Ｐ分别＜０．０５和＜０．０１）。血浆ＬＰＯ与红细胞Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶、Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶及ＳＯＤ活性呈负相关（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。红细胞Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性与Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性呈正相关（Ｐ?

糖尿病性血管病和红细胞膜三磷酸腺苷酶活性的关系

目的：探讨Ⅱ型糖尿病患者红细胞膜Ｎａ＋，Ｋ＋—三磷酸腺苷（ＡＴＰ）酶和Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性改变参与糖尿病性血管病的可能机制。方法：测定５０例正常人、３６例无血管病和４１例有血管病的Ⅱ型糖尿病患者的血压、空腹血糖、平均红细胞容积、平均血小板容积、红细胞膜Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性。统计方法用ｔ检验和直线相关分析。结果：无血管病的Ⅱ型糖尿病患者血压显著高于正常人（Ｐ＜０．０１），红细胞膜Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性均显著低于正常人（Ｐ＜０．０１）。有血管病患者血压、平均红细胞容积和平均血小板容积均明显高于无血管病患者及正常人（Ｐ＜０．０１），红细胞膜Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性明显低于无血管病患者及正常人（Ｐ＜０．０１～Ｐ＜０．０５）。Ⅱ型糖尿病患者红细胞膜Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性和平均红细胞容积或平均血小板容积均呈负相关（ｒ＝－０．２３，－０．２９，Ｐ＜０．０５）。收缩压和Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性呈负相关（ｒ＝－０．２４，Ｐ＜０．０５），和病程呈正相关（ｒ＝０．２４，Ｐ＜０．０５）。舒张压和病程呈正相关（Ｐ＜０．０５）。结论：糖尿病性血管病的发生发展和?

根据基因频率探讨畲族的起源

目的根据基因频率探讨畲族的起源。方法根据畲、侗、回、白、土家、苗、彝、藏、满、瑶、哈尼、布依、蒙古、朝鲜、壮、维吾尔及汉族（漳州、成都、哈尔滨、贵阳）等２０个人群的ＡｃＰ１、６－ＰＧＤ、ＡＤＡ、ＡＫ１、ＰＧＭ１基因座的基因频率，计算基因分化系数和群体之间的标准遗传距离（Ｄ）。根据人群之间的Ｄ值进行聚类分析。结果基因分化系数为０．８１％。畲和维吾尔及藏族的Ｄ值较大，分别为０．０１５７和０．０１１７。畲和汉（漳州）及回族的Ｄ值最小，都为０．０００８，畲族和其他人群间的Ｄ值在０．００１４～０．００９９之间。畲和苗、汉族（漳州）较先聚类，和瑶族较后聚类，和维吾尔族最后聚类。结论畲族可能源于古代“南蛮”

输血相关急性肺损伤的发病机制

在开展临床输血的早期,人们就已经观察到肺部存在输血反应。从上世纪50年代开始,输血相关非心源性肺水肿以各种名称被广泛报道,1983年Popovsky等已经创造了“输血相关急性肺损伤（transfusion-related acute lung injury,TRALI）”这一术语,但是直到1999年英国“输血的严重危害”（serious hazards of transfusion,SHOT）结果公布后,TRALI才获得广泛的认同。

Ⅱ型糖尿病患者红细胞膜ATPase活性改变及其影响因素

糖尿病患者红细胞膜 ATPase 活性往往降低,这是发生糖尿病并发症的主要因素之一。目前,对Ⅱ型糖尿病患者红细胞膜 ATPase 活性改变的影响因素尚缺乏全面报道。我们测定了Ⅱ型糖尿病患者血浆空腹血糖（FBG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、脂质过氧化物（LPO）、红细胞谷胱甘肽（GSH）、血红蛋白 Alc（HbAlc）水平和红细胞膜 Na+,K+-ATPase及Ca++-ATPase 活性,以探讨 NIDDM

输血相关急性肺损伤的发生率和预防策略

输血相关急性肺损伤(TRALI)是输血相关死亡的首要原因,也是输血相关发病的最常见原因之一。在某些患者人群中有较高的TRALI发生率和死亡率。目前尚无治疗TRALI的特效方法,主要通过预防达到降低TRALI发病;已有多个国家实施排除女性献血者血浆、或有妊娠史的女性献血者血浆、或白细胞抗体筛查有反应性的有妊娠史女性献血者血浆的策略,有效降低了免疫性TRALI发生率。排除所有女性献血者捐献机采血小板似乎不可行,会导致献血者大量损失,影响临床供应。用献血者健康问卷调查识别具有任何妊娠史的同种免疫的高风险献血者,筛查这些献血者的抗-HLA-A2、抗-HLA-Ⅱ类和抗-HNA-3a等白细胞抗体,排除具有这些抗体的献血者献血,可能是1种即经济又有效的TRALI缓解策略。

输血相关急性肺损伤的临床特征、诊断、治疗和预后

虽然在1983年Popovsky等[1]已经创造了＂输血相关急性肺损伤（transfusion-related acute lung injury,TRALI）＂这一术语,但是直到1999年英国＂输血的严重危害（serious hazards of transfusion,SHOT）＂结果公布后,TRALI才获得广泛的认同[2]。美国FDA统计显示,2005—2011财政年度每财年TRALI死亡病例数占输血相关死亡人数的30％--65％，TRALI是输血相关死亡的首要原因”0J，也是输血相关发病最常见的原因之一。TRALI发病急，不易辨别，部分病例病情重，迫切需要及时发现和快速处理；但是目前尚未引起我国广大临床医生和输血医学工作者的重视，临床上得不到准确的诊断和及时有效的治疗。

三明市318名汉族骨髓捐献志愿者HLA的多态性

目的 分析三明市汉族骨髓捐献志愿者HLA，A、B和DRB1多态性。方法 用聚合酶链反应结合序列特异性寡核苷酸探针反向杂交和序列特异性引物为基础的聚合酶链反应技术，鉴定318名三明市汉族骨髓捐献志愿者HLA-A、B、DRB1座位的等位基因，计算基因频率。结果 三明市汉族人群中HLA-A＊01、A＊02、A＊11、A＊24、A＊26、A＊30、A＊31、A＊33基因频率在0．0158～0．3656，HLA-B＊13、B＊27、B＊35、B＊38、B＊39、B＊46、B＊48、B＊51、B＊54、B＊55、B＊56、B＊58、B＊4001组、B＊4002组、B＊1501组、B＊1502组基因频率在0．0127～0．1971，HLA-DRB1＊0301组、DRB1＊04、DRB1＊07、DRB1＊08、DRB1＊09、DRB1＊11、DRB1＊12、DRB113、DRB1＊14、DRB1＊15、DRB1＊16等基因频率在0．0336～0．1422。A、B、DRB1的空白基因频率分别为0．74％、2．79％、0．14％。结论 三明市汉族骨髓捐献志愿者具有中国汉族人群HLA-A、B和DRBl基因共有的遗传特征，但也有其自身的特点。带有达到多态水平的HLA等位基因的患者在三明市汉族人群中寻找到HLA相匹配的供者的机会较大。

红细胞膜Na^+,K^+-ATPase活性与糖尿病、原发性高血压病的关系

采用改良Garay法(CV7.8%)测定107例正常人、34例糖尿病人和18例原发性高血压病人红细胞膜钠,钾三磷酸腺苷酶(Na^+,K^+-ATPase)活性。结果显示正常人Na^+,K^+-ATPase活性随年龄增长而降低(r=-0.754);糖尿病人和原发性高血压病人Na^+,K^+-ATPase活性明显低于正常人(P均<0.01),分别低于正常值17%～44%和12%～29%。

非胰岛素依赖型糖尿病患者红细胞膜ATPase活性改变及其影响因素

目的探讨非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ及Ｃａ２＋－ＡＴ－Ｐａｓｅ活性改变的影响因素。方法测定７７例ＮＩＤＤＭ患者和５０例正常人血糖、总胆固醇（ＴＣ）、甘油三酯（ＴＧ）、高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬＣ）、脂质过氧化物（ＬＰＯ）、谷胱甘肽（ＧＳＨ）、糖化血红蛋白（ＨｂＡｌｃ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨＰＸ）、红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴ－Ｐａｓｅ和Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性。ｔ检验、直线相关分析和多元逐步回归分析。结果ＮＩＤＤＭ组血糖、ＨｂＡｌｃ、ＴＣ、ＴＧ、ＴＣ／ＨＤＬＣ、ＬＰＯ显著高于对照组（Ｐ＜０．０１），ＨＤＬＣ、ＧＳＨ、ＳＯＤ、ＧＳＨＰＸ、红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ和Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性低于对照组（除ＧＳＨ的Ｐ＜０．０５外，其他Ｐ＜０．０１）；不同ＨｂＡｌｃ、ＴＣ／ＨＤＬＣ、ＧＳＨ、ＬＰＯ、ＴＣ组的红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ活性有显著性差别。红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ活性＝１２．８０＋０．２７（ＧＳＨ）－０．１２（ＬＰＯ）－０．０９（ＴＣ／ＨＤＬＣ），红细胞胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性＝１０８．２０＋１．?

糖尿病性肾病与凝血酶调节蛋白及vW因子的关系

目的探讨2型糖尿病患者血管内皮损伤或功能紊乱参与糖尿病性肾病的可能机制。方法测定20例单纯糖尿病(SDM)、20例早期糖尿病肾病(EDN)、21例临床糖尿病肾病(CDN)患者和32例体检正常人凝血酶调节蛋白(TM)、vW因子(vWF)水平。统计学方法用t检验和直线相关分析。结果SDM、EDN、CDN患者TM和vWF显著高于正常人(P<0.01或P<0.05)。EDN和CDN患者TM和vWF显著高于SDM患者(P<0.01)。CDN患者TM和vWF显著高于EDN患者(P<0.01)。尿白蛋白排泄率与TM及vWF呈正相关(r=0.476和r=0.545,P<0.01)。TM与vWF呈正相关(r=0.376,P<0.01)。结论2型糖尿病患者存在血管内皮损伤或功能紊乱,糖尿病性肾病的发生发展与血管内皮损伤或功能紊乱有密切关系。

福建省RhD阴性个体RHD基因多态性

为了探讨RhD阴性福建个体的RHD基因结构，设计14对序列特异性引物，应用PCR—SSP技术检测104名福建省RhD阴性献血者的RH基因型，并对部分样本进行吸收放散试验，同时对2例携带RHD基因RhD阴性样本进行DNA序列测定。结果显示，61．54％阴性福建个体完全缺失RHD基因（RHD^-／RHD^-），25．97％RhD携带RHD1227A等位基因（其中62．96％为RHD^＋／RHD^-杂合子，37．04％为RHD^＋／RHD^＋纯合子），8．65％携带RHD-CE（2—9）-D等位基因，1．92％携带RHD710delC等位基因；多数RHD基因缺失存在于dce单倍体中，发现6例RHD基因缺失存在于dCe单倍体（RH基因型为dce／dCe）中，2例存在于dcE单倍体（RH基因型为dce／dcE）中；同时检测8个RHD基因外显予以及RHD1227A等位基因，以预测RhD表型的准确性明显高于单独检测某个RHD基因外显子的准确性（Χ^2=24．43，P〈0.005）。结论：RhD阴性福建个体RHD基因具有多态性；在中国用RHD基因分型完全替代血清学检测RhD表型的条件尚未成熟。

糖尿病患者血细胞体积增大在微血管病变中的作用

目的 探讨糖尿病患者血细胞体积增大的原因及在微血管病变中的作用。方法 5 2例糖尿病患者部分血细胞参数和红细胞膜 Na+ - K+ - ATPase、Ca2 + - ATPase活性分别采用全自动血细胞分析仪和改良的 Hanahan法、L uthra法测定 ,并设对照组比较。结果 糖尿病患者红细胞膜 Na+ - K+ - ATPase、Ca2 + - ATPase活性降低 ,以合并微血管病变组最为明显 ;微血管病变组平均红细胞体积 (MCV)、平均血小板体积 (MPV)增大 ,平均红细胞血红蛋白浓度 (MCHC)降低 ;而无微血管病变组则正常。 MCV、MCHC和 MPV的变化与红细胞膜两种 ATPase活性降低有关。结论 与 ATPase活性改变有关的血细胞体积增大可能是糖尿病微血管病变发生的重要因素。

用噬菌体展示随机12肽库筛选HCV B细胞抗原表位

目的用患者血清中抗丙型肝炎病毒(HCV)抗体从噬菌体展示随机12肽库筛选HCV抗原表位.方法用硫酸铵粗提HCV患者血清中Ig后用DEAE-Sephadex A50层析纯化并作为筛选的配基;对噬菌体展示随机12肽库采用配基亲和富集、阴性血清吸收的方法进行生物淘洗;ELISA鉴定筛选克隆的结合特性;测定阳性克隆所携带DNA序列并进行计算机辅助分析.结果三轮生物淘洗后特异性克隆得到了富集.用第3轮淘洗出的26个克隆进行结合实验,其中有3个克隆与HCV患者血清结合力较高而与正常人血清结合能力较弱;序列分析发现2个序列与HCV蛋白第1 082～1 093和1 954～1 965位(1082YHGAGTRTIASP 1093和1954TQLLRRLHQWIS 1965)氨基酸有较高的同源性;计算机辅助分析提示这两个位点具有形成表位的性质.结论获得了两个HCV抗原表位,在HCV感染的检测中具有潜在的应用价值.

TMA技术在献血者HBV-DNA检测中的应用

目的:了解无偿献血人群乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染情况,评估TMA技术应用于献血者HBV-DNA筛查的效果及其必要性。方法:采用平行检测ELISA/NAT模式,对2016年3月-2018年2月169160人(次)献血者及部分归队献血者进行常规血清学和NAT检测,对NAT筛查阳性标本行核酸鉴别试验;对单边试剂HBsAg+、HBV-DNA-献血者进行中和确证试验。结果:169160人(次)献血者中,双边试剂HBsAg检测阳性的为803例,占0.476%,单边试剂检测阳性的为243例,占0.144%。对40名HBV-DNA-、单边试剂检测HBsAg+标本经中和确证试验确证,仅有4名为阳性,确证阳性率为10%。检出1003例HBV-DNA+标本,HBsAg和HBV-DNA均为阳性的739例,2者一致率为73.7%。3种试剂阳性检出率比较有统计学差异(P<0.05);Murex试剂和新创试剂2种试剂检出阳性率有统计学差异(P<0.125)。2016年3月-2017年2月和2017年3月-2018年2月期间HBsAg-/HBV-DNA+检出率比较,没有统计学差异(P>0.05)。60名HBsAg-/HBV-DNA+归队献血者中有1名发生HBsAg阳转,该名献血者为HBV窗口期感染;其余59名献血者HBsAg阴性;HBVDNA检测显示,28名献血者HBV-DNA-,31名献血者HBV-DNA+,1名结果为不确定。结论:结合HBsAg检测,常规应用TMA技术检测HBV-DNA能缩短HBV感染的检测窗口期,检出HBV隐匿性感染,避免HBV漏检,从而有效地降低输血后传播乙型肝炎潜在风险。