波纹龙虾蜕壳周期的呼吸排泄和血淋巴生理学

【目的】研究波纹龙虾(Panulirus homarus)蜕壳周期内呼吸排泄、血淋巴生化指标和免疫酶活力的变化。【方法】选取蜕壳后期(A 期和B 期)、蜕壳间期(C 期)和蜕壳前期(D0,D1,D2,D3期)的波纹龙虾测定耗氧率和排氨率,并测定血淋巴中的离子含量、总蛋白含量和血细胞数量及免疫酶活力。【结果】波纹龙虾的耗氧率和排氨率从蜕壳后期到蜕壳间期均显著降低。耗氧率在D0 期显著上升,而排氨率在蜕壳前期逐渐减少,在D3期达到最低水平。血清Ca^2+含量在D1 期最高,并显著高于A期(P < 0.05)。K^+含量在D1 期则最低,在蜕壳周期中整体变化不显著(P>0.05)。Mg^2+和无机磷(Phos)含量在蜕壳周期中也无显著变化(P > 0.05)。血淋巴总蛋白含量在蜕壳后大幅减少,至蜕壳间期又显著提升(P <0.05),但与蜕壳前期相比差异不显著(P > 0.05)。血细胞数量在D2 期最高,而 B 期最低,分别为4.22×10^7 和2.40×10^7 mL-1。酚氧化酶活力在蜕壳周期中呈先下降后上升的变化趋势,而一氧化氮合酶活力在A 期最低,在其他时期之间未发现显著性差异(P >0.05)。【结论】波纹龙虾的呼吸排泄、血淋巴生化指标和免疫酶活力与蜕壳周期密切相关。

Cd^2+和Hg^2+对波纹龙虾的急性毒性

采用毒理学方法,在水温28.0~29.0℃下于0.5 m^3的圆形玻璃钢桶中,用氯化镉和氯化汞配成不同质量浓度的Cd^2+和Hg^2+试验溶液,研究Cd^2+和Hg^2+对体质量49.10~52.10 g波纹龙虾的毒性,用直线内插法求得Cd^2+和Hg^2+的半致死质量浓度及安全质量浓度。试验结果显示,Cd^2+对波纹龙虾的24、48、72、96 h半致死质量浓度分别是2.5169、1.3378、1.0445、0.9500 mg/L,安全质量浓度为0.0095 mg/L;Hg^2+对波纹龙虾的24、48、72、96 h半致死质量浓度分别是0.0560、0.0333、0.0246、0.0227 mg/L,安全质量浓度为0.000227 mg/L。Hg^2+对波纹龙虾的毒性作用强于Cd^2+的毒性作用。

切除眼柄与触角对波纹龙虾存活、蜕壳、摄食和生长的影响

为了探讨切除眼柄或第二触角对波纹龙虾Panulirus homarus幼虾存活、蜕壳、摄食和生长的影响,以体质量为(18.15±1.85)g的波纹龙虾为研究对象,试验设置对照组(无任何处理)、眼柄切除组和触角切除组,每组设3个平行,每个平行放15尾虾,共养殖120 d,试验结束后分析测定波纹龙虾的存活、蜕壳和生长变化情况。结果表明:眼柄切除组波纹龙虾存活率显著高于其他组(P<0.05),而触角切除组与对照组间存活率无显著性差异(P>0.05);切除眼柄对波纹龙虾的蜕壳周期无显著性影响(P>0.05),而切除触角则显著延长了波纹龙虾第1次蜕壳的时间(P<0.05),切除的触角经过2次蜕壳后再生,前后两次蜕壳对整体的蜕壳周期无显著性影响(P>0.05),但切除触角的波纹龙虾平均蜕壳周期显著大于其他两组(P<0.05);与对照组相比,切除眼柄显著提高了波纹龙虾的摄食率(P<0.05),并显著降低了饵料系数(P<0.05),而切除触角则显著提高了波纹龙虾的摄食率和饵料系数(P<0.05);切除眼柄显著促进了龙虾的生长,眼柄切除组龙虾各时间点的体质量增长率、体长增长率和特定生长率均显著高于其他组(P<0.05),而切除触角对上述各项指标均无显著性影响(P>0.05)。研究表明,波纹龙虾眼柄的切除有助于提高养殖存活率,促进其摄食和生长,在养殖生产上值得借鉴和推广,而触角的切除对其生长无益处,还可能因病原入侵而导致龙虾死亡,因此,在养殖生产中应谨慎捕捉波纹龙虾,以保持其触角完整。

过氧化氢和过氧化硫酸钠复合物对高位池尾水的净化效果研究

[目的]研究不同使用量和处理时间下过氧化氢和过氧化硫酸钠复合物对养殖尾水各项水质指标的处理效果。[方法]从湛江市东海岛对虾高位池采集养殖尾水,使用过氧化氢和过氧化硫酸钠复合物处理后测定水样的pH、悬浮物、氨氮、亚硝酸氮(NO_(2)^(-)-N)、磷酸盐和COD浓度。[结果]过氧化氢和过氧化硫酸钠复合物处理会使水体pH有所下降,仍保持在7.0以上,但并不能有效降低悬浮物浓度。过氧化氢可以有效降低尾水中氨氮、NO_(2)^(-)-N、磷酸盐和COD的浓度,当过氧化氢浓度为4.00 mL/L时处理效果最佳,氨氮、NO_(2)^(-)-N、磷酸盐和COD去除率分别为93.79%、57.88%、75.10%和76.70%。与过氧化氢相比,过氧化硫酸钠复合物对尾水中氨氮和NO_(2)^(-)-N的去除效果并不理想,但对磷酸盐和COD的去除效果较好,当过氧化硫酸钠复合物浓度为0.12 g/L时,尾水中磷酸盐和COD的去除率分别达到87.96%和76.51%。[结论]过氧化氢和过氧化硫酸钠复合物在对虾高位池养殖尾水的处理中发挥了良好的作用,可为水产养殖尾水的处理提供一些参考依据。

波纹龙虾性腺抑制激素(GIH)基因克隆、表达及其对光周期的响应

为探讨波纹龙虾Panulirus homarus性腺抑制激素(gonad-inhibiting hormone,GIH)基因(PhGIH)的时空表达及其对不同光周期的响应,采用RACE技术克隆获得波纹龙虾眼柄组织GIH全长cDNA序列,通过卵巢颜色与形态、石蜡组织切片和性腺发育指数,比较不同光周期(12L∶12D、13L∶11D和14L∶10D)对波纹龙虾卵巢发育的影响,采用qPCR技术检测波纹龙虾不同卵巢发育时期(增殖期、发育期和成熟期)、不同组织GIH的表达情况及其对光周期的表达响应。结果表明:波纹龙虾GIH的cDNA序列全长为1206 bp,开放阅读框(ORF)为354 bp,编码117个氨基酸,预测该蛋白质包括39个氨基酸组成的信号肽和78个氨基酸组成的成熟肽,具有高血糖激素家族(CHH家族)Ⅱ型肽激素的典型特征;同源性分析显示,波纹龙虾GIH氨基酸序列与非洲龙虾Jasus lalandii的一致性最高,为56.76%;系统进化分析显示,波纹龙虾GIH与非洲龙虾亲缘关系最近;qPCR结果显示,波纹龙虾GIH在各组织中广泛表达,其中眼柄中表达量最高(P<0.01),GIH在眼柄中的表达量随卵巢成熟而下降;光周期试验显示,采用14L∶10D光周期处理92 d时能更好地促进卵巢发育,波纹龙虾性腺发育指数(GSI)显著升高(P<0.05),其眼柄GIH表达量显著下降(P<0.05),石蜡组织切片观察显示,此时的卵巢为橘红色,以成熟卵母细胞为主。研究表明,波纹龙虾GIH基因可能在波纹龙虾卵巢发育过程中起着重要作用,14L∶10D光周期处理对卵巢发育促进效果最明显。

锦绣龙虾幼虾耗氧率和窒息点研究

[目的]研究锦绣龙虾(Panulirus ornatus)幼虾不同环境条件下的耗氧率和最适温度、盐度、pH范围内的窒息点。[方法]采用封闭静水式试验方法,设置温度20、23、26、29、32℃,盐度15‰、20‰、25‰、30‰、35‰,pH 6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0,研究体质量(2.5~5.5)g的锦绣龙虾幼虾在不同温度、盐度、pH条件下的耗氧率和在最适温度、盐度、pH范围内的窒息点。[结果]锦绣龙虾幼虾耗氧率与温度呈正相关,温度越高,耗氧率越大,20℃时耗氧率为0.57 mg/(g·h),而32℃时耗氧率升至1.12 mg/(g·h)。锦绣龙虾幼虾耗氧率与盐度的关系呈“U”字型,在盐度25‰和30‰时,耗氧率较低,分别是0.40和0.37 mg/(g·h)。pH由6.0升至8.0时,耗氧率从2.82 mg/(g·h)降至0.76 mg/(g·h);在pH 8.0~8.5,耗氧率较低。在温度28℃、盐度30‰、pH 8.15的条件下,锦绣龙虾幼虾的窒息点为0.45 mg/L。[结论]根据研究结果推测,锦绣龙虾幼虾的最适温度在26~29℃,最适盐度在25‰~30‰,最适pH在8.0~8.5。

波纹龙虾对亚硝酸盐胁迫响应的转录组学分析

为了探究波纹龙虾Panulirus homarus对亚硝酸盐的胁迫响应机理,采用转录组学测序分析方法,进行了正常养殖条件下波纹龙虾(体质量为39.00 g±5.31 g)肝胰腺和质量浓度为80 mg/L亚硝酸盐胁迫7 d的肝胰腺转录组比较研究。结果表明:转录组共筛选得到264个差异表达基因,其中,86个基因上调表达,178个基因下调表达;GO功能注释显示,被注释的差异表达基因主要与结合、催化和代谢等功能有关;KEGG通路富集分析显示,差异表达基因在黏着斑、白细胞跨内皮层迁移、胰岛素抵抗、紧密连接、淀粉与蔗糖代谢等通路中显著富集;随机挑选9个差异表达基因进行qRT-PCR验证,发现荧光定量结果与测序结果基本一致。研究表明,在亚硝酸盐胁迫下,通过GO和KEGG分析发现差异表达基因主要富集在能量代谢、生长和免疫等通路中,挖掘出的数据可为后续研究提供科学参考。