高效液相色谱法测定人全血中瑞芬太尼浓度

目的 :建立测定人血中瑞芬太尼的高效液相色谱 紫外检测方法 ,为临床监测血药浓度提供方法学。方法 :采用液 液萃取法 ,用 1 氯丁烷提取全血中的瑞芬太尼 ,选用GI97559(瑞芬太尼乙基类似物 )为内标定量。色谱柱为ZorbaxSB -CN(4.6mm× 2 50mm ,5μm) ,流动相为乙腈 甲醇 磷酸二氢钠缓冲液 (1∶2∶0 .43) ,柱温 30℃ ,流速 1 .5mL·min- 1 ,紫外 2 1 0nm检测 ,按内标法定量。结果 :标准曲线在 3～ 2 0 0 μg·L- 1 范围内 ,浓度与峰面积比有良好的线性关系 (r =0 .9966)。最低检测浓度为 2 μg·L- 1 。提取回收率 77.34 %～ 87.72 %。方法回收率 97.1 3 %～ 1 0 0 .99% ,日内RSD小于 5 .3 % ,日间RSD小于6 .3 %。结论 :本方法快速、准确、灵敏 ,可用于瑞芬太尼的临床药动学研究。

HPLC-荧光检测测定人全血中丙泊酚浓度

目的 建立反相高效液相色谱 (HPLC) 荧光检测测定人全血中丙泊酚浓度的方法。方法 用环己烷提取全血中的丙泊酚 ,以百里酚为内标定量 ,用HPLC 荧光检测器测定丙泊酚含量。结果 本法测定的线性范围为 5～ 30 0 0ng/ml,该方法回收率高 ,重现性好。结论 本方法灵敏 ,选择性强 ,快速、准确地测出全血中微量丙泊酚的含量 。

瑞芬太尼普鲁泊福靶控输注静脉麻醉用于腹腔镜胆囊切除术

目的 :评价普鲁泊福和瑞芬太尼靶控全静脉麻醉临床应用的可行性。方法 :ASAI Ⅱ级 ,择期行腹腔镜胆囊切除手术的病人 16例 ,诱导时设定普鲁泊福血浆靶浓度 3mg·L-1,瑞芬太尼血浆靶浓度 7μg·L-1,术中靶浓度维持不变 ,手术结束时停止输注普鲁泊福和瑞芬太尼。观察麻醉诱导和气管插管时的血压、心率 ,术毕停药后病人自主呼吸恢复时间、呼之睁眼时间、拔管时间、定向力恢复时间和离开恢复室时间。分别在靶控输注 15min、2 0min、术毕病人苏醒时采集桡动脉血样用高效液相色谱仪配二极管阵列紫外检测器测定瑞芬太尼全血浓度。结果 :麻醉诱导时收缩压由诱导前 (14 4± 2 7)mmHg降至 (10 1± 18)mmHg ,平均动脉压由 (10 2± 15 )mmHg降至 (6 9±13)mmHg ,心率由 (77± 14 )次·min-1降至 (6 3± 12 )次·min-1,插管前后血压和心率无显著变化 ,无一例插管反应。术毕停药后病人自主呼吸恢复时间 (12± 6 )min ,呼之睁眼时间 (9± 4 )min ,拔管时间 (13± 6 )min ,定向力恢复时间 (15± 5 )min ,离开恢复室时间 (19± 7)min。瑞芬太尼的实测浓度分别为 (4 .6± 9.5 ) μg·L-1、(6 .6± 11.5 )μg·L-1、(1.2± 8.7) μg·L-1。结论 :瑞芬太尼普鲁泊福靶控全静脉麻醉用于腹腔镜胆囊切除手术时 ,麻醉诱导平稳 。

冠状动脉旁路移植手术后早期谵妄与认知功能障碍的关系

目的：观察中国人冠状动脉旁路移植手术后谵妄与认知功能障碍的关系。方法：接受择期冠状动脉旁路移植手术的107例患者,记录术前基础指标、围术期相关指标及术后并发症发生情况。术后第17天采用CAM-ICU法（Confusion Assessment Method-Intensive Care Unit）每天2次评估是否发生谵妄;分别在术前1天和术后第7天进行9项认知功能测验,术后认知功能障碍的诊断采用与ISPOCD1研究同样的标准。结果：术后谵妄的发生率为47.7%（51/107）,术后认知功能障碍的发生率为55.3%（57/103）。多因素Logistic回归分析显示术后谵妄的独立危险因素有年龄增加（OR1.174,95%CI1.0851.269,P〈0.001）、术前糖尿病史（OR4.224,95%CI1.54311.563,P=0.005）、术后发生并发症（OR3.667,95%CI1.15211.670,P=0.028）和术后监护室停留时间长（OR1.024,95%CI1.0051.044,P=0.016）;术后认知功能障碍的独立危险因素有年龄增加（OR1.065,95%CI1.0011.134,P=0.047）和术后谵妄持续时间长（OR1.744,95%CI1.1732.593,P=0.006）。结论：谵妄和认知功能障碍是中国人冠状动脉旁路移植手术后早期常见的并发症,术后谵妄持续时间长是术后认知功能障碍的独立危险因素。

L-精氨酸和氨基胍对内毒素致肺损伤大鼠的影响

目的:观察L-精氨酸和氨基胍对内毒素(LPS)致肺损伤大鼠的影响,探讨其减轻肺损伤的机制。方法:将35只成年大鼠随机平均分为对照组(Con组)、LPS 1组、LPS+L-精氨酸处理组(L-Arg组)、LPS+氨基胍处理组(AG组)、LPS+复合L-精氨酸和氨基胍处理1组(AA 1组)。在注射LPS后240分钟开胸采集标本,检测肺组织NF-kB活性;测定血清中NO2-/NO3-浓度和肺血管通透性。另将22只大鼠分为LPS 2组(n=11)和复合L-精氨酸和氨基胍处理2组(AA 2组,n=11),观察大鼠5天内存活率,并对大鼠肺进行病理分析。结果:LPS 1组肺组织NF-κB活性、血中NO2-/NO3-浓度较Con组明显升高(P<0.05);肺血管通透指数上升(P<0.05)。L-Arg组和AA 1组肺组织NF-κB活性和血中NO2-/NO3-浓度以及肺的通透指数均较LPS 1组明显下降(P<0.05)。但AG组肺组织NF-κB活性较LPS 1组变化不明显(P>0.05)。AA 2组与LPS 2组大鼠病死率分别为18.2%和45.5%,两组比较无显著差异(P>0.05),但AA 2组存活大鼠肺的病理损害程度比LPS 2组轻。结论:L-精氨酸能明显抑制LPS诱导大鼠肺NF-κB活性,氨基胍不影响该活性,而复合用药可明显减轻内毒素所致肺损伤的病理改变。

双谱指数反馈调控靶控输注时异丙酚血药浓度的变化－－闭合环路靶控输注的可行性研究

目的：测定以双谱指数（BIS）作为控制变量的异丙酚反馈靶控输注系统在全凭静脉麻醉时异丙酚的血药浓度。方法：16例择期腹控镜胆囊切除手术的病人，用自行编制的反馈靶控程序控制Graseby 3500输液进行异丙酚靶控输注，BIS调定点设为50，靶浓度设为3μg/ml，在异丙酚靶控输注10分钟时，BIS值为50时，BIS值降到最低点时，BIS值在最高点时采集桡动脉血样，HPLC紫外线检测异丙酚血药浓度。记录BIS的最高值和最低值。结果：此反馈靶控输注系统的执行误差的中位数MDPE=-3.74%，执行误差绝对值的中位数MDPE=9.47%，BIS值50时血中异丙酚的浓度为（2.98±0.38μg/ml),BIS波动最低点（36.5±5.3)时异丙酚的浓度（3.1±0.31μg/ml），与BIS波动最高点（62.5±5.8）时异丙酚的浓度（2.63±0.28μg/ml）间差异显著。结论：在全凭静脉麻醉中，以BIS作为控制变量的异丙酚反馈靶控输注系统实测浓度常低于靶浓度，但整体上精确度较高，偏离性较小，麻醉可控性好。

利多卡因对逆行脑灌注脑保护的影响

目的:观察利多卡因能否改善逆行脑灌注的脑保护作用。方法:16只杂种犬接受体外循环并降温至20C,停循环,逆行脑灌注120分钟,恢复体外循环并复温至36℃。利多卡因组(n=8)实验期间持续给予利多卡因(4mg·kg^(-1)后0.2mg·kg^(-1)·min^(-1),逆行脑灌注期间为0.5mg·min^(-1));对照组(n=8)则给予等量生理盐水。结果:实验末利多卡因组脑组织磷酸肌酸、三磷酸腺苷含量和能量指数均明显高于对照组(分别为磷酸肌酸:2.44±0.53比1.61±0.49μmol/gwetw,P<0.01;三磷酸腺苷:0.71±0.18比0.50±0.17μmol/gwetw,P<0.05;能量指数:0.59±0.10比0.48±0.09,P<0.05)。但两组间脑组织丙二醛含量无显著差异。结论:围逆行脑灌注期间持续给予利多卡因改善脑保护作用,可能与恢复体外循环后犬脑组织高能磷酸盐含量增加有关。

一氧化氮在内毒素休克犬血流动力学及血管外肺水变化中的作用

进一步证实一氧化氮在感染性休克中的作用。方法选用成年杂种犬２４只，随机分成内毒素组（８只），Ｌ－精氨酸加内毒素组（８只）和内毒素加Ｎ－硝基－Ｌ－精氨酸组（８只）。测定注射内毒素前及注射内毒素后４小时血流动力学变化，并计算氧供、氧耗及测定血管外肺水的含量。结果Ｎ－硝基－Ｌ－精氨酸组与内毒素组相比，全身血管阻力指数（ＳＶＲＩ）、肺血管阻力指数（ＰＶＲＩ）明显上升（Ｐ＜０．０５），心脏指数（ＣＩ）显著下降（Ｐ＜０．０５），血管外肺水增加（Ｐ＜０．０５）。而Ｌ－精氨酸组表现为ＣＩ、每搏量指数（ＳＩ）增加（Ｐ＜０．０５），ＰＶＲＩ明显下降（Ｐ＜０．０５）。提示，抑制内毒素休克犬一氧化氮的生成能使其血流动力学和机体氧合进一步恶化。结论在感染性休克早期，给予一氧化氮合成抑制剂似不能提供有益的治疗效果。

利多卡因对缺氧大鼠脑细胞丙二醛及乳酸水平的影响

目的:探索利多卡因对缺氧脑细胞保护作用的途径。方法:选用出生24小时以内的Wistar大鼠乳鼠,分离其大脑皮层细胞进行培养,用MTT方法观察细胞在缺氧条件下培养24小时及48小时后OD值的变化,然后将细胞分为正常培养组,缺氧培养组,缺氧培养十利多卡因组,分别测定培养48小时后培养液中乳酸及丙二醛的含量。结果:大鼠大脑皮层细胞在缺氧培养24小时后,其存活率同正常培养组相比无显著差别;缺氧培养48小时后,其存活率显著下降。缺氧培养48小时后,大鼠脑细胞培养液中丙二醛和乳酸水平显著升高,而利多卡因组的升高则不明显。结论:利多卡因有抑制由缺氧引起的大脑皮层细胞丙二醛和乳酸水平升高的作用。

肠缺血/再灌注对肝脏自由基的影响及亚甲蓝的抗损伤作用

目的 研究肠缺血/再灌注(I/R)后氧自由基(ROS)对远隔器官肝脏的损伤作用,探讨亚甲蓝(MB)抗肝脏损伤的作用机制。方法 新西兰白兔32只,体重2.3～2.9 kg,随机分为4组,(1)正常组:本组仅做假手术处理。(2)I/R组:本组通过夹闭兔肠系膜前动脉1h复制肠I/R模型。(3)治疗A组:本组于松夹后静脉内给予MB 3 mg·kg-1。(4)治疗B组:本组于松夹后静脉内给予MB 15 mg·kg-1。颈总动脉置管,连续监测血压。于夹闭前、松夹即刻、松夹后30 min、1h和2h取血测定血中MDA浓度。实验结束后取一小块肝组织用于测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、黄嘌呤氧化酶(XO)及MDA。结果与I/R前基础值比较,I/R组血中MDA水平I/R后显著增加,同时血压显著下降;而治疗A组及B组血中MDA水平于I/R后均未显著增加。与正常组比较,I/R组肝组织MDA水平显著增高,而正常组与两个治疗组间肝组织中MDA无显著差异。结论 MB能减少肠I/R后ROS的生成并能对抗ROS对肝脏的损伤作用。

氯胺酮抑制内毒素诱导大鼠肺组织核因子-κB的表达

目的 观察氯胺酮对内毒素大鼠肺组织核因子-κB(NF-κB)活性的影响,探讨氯胺酮抑制炎性反应的机制。方法 成年大鼠24只随机分为四组(每组6只),对照组,静脉注射生理盐水;内毒素(LPS)组,静脉注射内毒素8mg/kg+气管内注射内毒素100μg/kg;处理组(K4、K8组),注射LPS后30min静脉分别注射氯胺酮4mg/kg或8mg/kg,随后每60min腹腔注射同等剂量氯胺酮。在注射生理盐水或LPS后240min开胸采集标本,用凝胶电泳迁移改变分析(EMSA)法检测肺组织NF-κB活性;同位素99mTc法测定肺血管通透性;并测血清中MDA和NO_2^-/NO_3^-浓度。结果 LPS组肺组织NF-κB活性较对照组明显升高,血中MDA和NO_2^-/NO_3^-浓度也较对照组明显增加;处理组肺组织NF-κB活性和血中NO_2^-/NO_3^-浓度较LPS组明显下降,与对照组比较差异无显著性。结论 氯胺酮能明显抑制内毒素诱导大鼠肺NF-κB活性,降低血中NO_2^-/NO_3^-含量,对内毒素所致肺损伤有保护作用。

内毒素休克时氨基胍选择性抑制诱导型一氧化氮合成酶的作用

目的:观察选择性诱导型NO合成酶抑制剂氮基胍对内毒素休克犬血流动力学的影响。方法:成年杂种犬40只.随机分成五组:Ⅰ组为单纯注射内毒素组。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组为内毒素处理组,分别注射左旋精氨酸(L-arginine300mg/kg)、N-硝基左旋精氨酸(N-nitrio-L-arginine,L-NNA20mg/kg)和氨基胍(aminoguanidine30mg/kg),Ⅴ组为对照组。观察对比内毒素前后血流动力学变化,并计算氧供、氧耗和血管外肺水(EVLW)的含量。结果:与Ⅰ组相比,左旋精氨酸有明显降低PVRI、增加CI、SI(P<0.05)的作用;氨基胍未引起明显升压效应,血流动力学变化与左旋精氨酸组相似,而L-NNA却使SVRI、PVRI明显增加(P<0.05),CI下降,EVLW增多(P<0.05),氧供减少。结论:一氧化氮(NO)在内毒素休克早期对心肺功能以保护作用为主;非选择性抑制NO的生成会加重休克程度,维持机体一定量NO或应用选择性诱导性NO合成酶制剂对治疗休克可能是有利的。

冠脉搭桥术患者载脂蛋白Eε4基因与术后认知功能障碍的关系

目的评价载脂蛋白Eε4(ApoEε4)基因在冠脉搭桥术(CABG)患者术后认知功能障碍(POCD)中的作用。方法选取230例CABG手术患者,用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术测定患者ApoE基因型。术前1d及术后1周、3月对患者行认知功能测试,以术后20％以上测试项目下降至少20％为POCD的诊断标准;以手术前后认知标准化值(Z值)反映认知下降程度。用多因素的方法分析发生POCD的危险因素。结果CABG手术患者术后1周和3月POCD的发病率分别为59.1％和21.0％,230例患者中ApoEε4的基因频率为7.4％。是否携带ApoEε4等位基因和CABG手术患者POCD的发病率无关。高龄、应用体外循环、术后拔除气管导管时间延长为患者术后1周认知功能下降的相关因素。术后1周的认知水平为术后3月认知功能下降的相关因素。结论是否携带ApoEε4等位基因与CABG手术患者POCD无关。高龄、体外循环、术后拔除气管导管时间延长是术后1周认知功能下降的危险因素。术后1周较低的认知水平预示着术后3月的认知功能较差。

闭胸式体外循环用于兔脑复苏及预测神经功能有关因素的实验研究

利用高钾致心搏停止制成兔全脑缺血，以阔胸式体外循环进行复苏，观察复苏过程中生理生化指标，并在实验终行神经功能缺陷记分，采用单、多因素相关回归分析方法，找出预测神经功能的因素，供临床工作参考。结果表明，神经功能缺陷记分分别与停循环时间、脑电恢复时间、呼吸．瞳孔光反射、角膜反射恢复时间的对数、升压药、机械通气时间及复苏后９０分钟ｐＨ、乳酸有较好相关性（｜ｒ｜＞０．４，Ｐ＜０．００７），其中角膜反射恢复时间、脑电恢复时间、瞳孔光反射恢复时间对预测预后有较高价值，并经多元相关回归分析，得出了预测神经功能的多元回归方程。

深低温停循环变温期间鼻咽温、直肠温、耳膜温的比较研究

比较变温期间鼻咽温、直肠温、耳膜温、血温间的差异为临床提供参考。杂种犬６只行常规体外循环降温６０～７０分钟，使鼻咽温达１６～１８℃，直肠温达２０℃左右停循环１小时，然后血流复温１小时，使鼻咽温达３６～３７℃，直肠温３４℃左右撤离人工循环。结果表明，鼻咽温与耳膜温相关极好（ｒ＝Ｏ．９１８，Ｐ＜０．００１），鼻咽温可以代替耳膜温反映脑温，但同一时刻耳膜温比鼻咽温高１℃；鼻咽温与直肠温相关尚好，但降温期直肠温比鼻咽温高２．８Ｃ±１℃，复温期比鼻咽温低３．Ｓ℃±０．９℃，两者温度差别甚明显，因此鼻咽温不能代替直肠温反映核心温度的变化。复温期血温与耳膜温回升几乎一致，提示复温期脑代谢可能骤增，因此此时期保证充分的脑血流和氧供以满足代谢需要是十分重要的。

血清铁与脂质过氧化物在脑缺血再灌注损伤中的变化及铁离子螯合剂的作用

家兔（ｎ＝１６），随机分为对照组（Ｃ组）和去铁胺组（Ｄ组）。实验过程监测血清铁、ＬＰＯ、乳酸，复苏１５０分钟行神经功能记分。结果：血清铁：Ｃ组复苏１５０分钟时显著升高，Ｄ组复苏３０分钟时即下降，组间差异极显著（Ｐ＜０．０１）；ＬＰＯ：Ｃ组升高，Ｄ组基本不变，组间差异显著；乳酸两组都处于较高水平，Ｃ组虽更高但组间无差异；ＮＤＳ：Ｃ组高于Ｄ组（３２±１２Ｖｓ１９±６）Ｐ＜０．０５。提示螯合剂螯合再灌注释放的“游离”铁从而减免了再灌注损伤，保护了神经细胞功能。