抗肿瘤细胞免疫治疗肿瘤患者的疗效评价

肿瘤生物治疗是继传统手术、化疗、放疗之后又一类新型的肿瘤治疗方法,主要包括抗肿瘤细胞免疫治疗、分子靶向治疗、基因治疗、细胞因子治疗和疫苗治疗等。其中,抗肿瘤细胞免疫治疗在临床的应用越来越广泛,正确评价抗肿瘤细胞免疫治疗的疗效对肿瘤患者的生活质量和生存期的影响尤为重要。

多学科联合微创修复病例报告1例

患者,男性,54岁,2012年曾因牙齿松动于大连市口腔医院牙周科进行系统牙周治疗,现牙周恢复稳定,2014年于特诊科就诊要求恢复咀嚼功能。口内检查(图1-图8)│7/6缺失,7松动Ⅱ°,余牙松动Ⅰ°,下颌牙齿磨耗见淡黄色牙本质,上前牙唇侧扇形移位,覆盖6mm,深覆(牙合),牙龈质地颜色正常,面下1/3短。

单次大剂量与多次小剂量输注CIK治疗鼠肠癌效应的实验研究

探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cell,CIK)单次大剂量与分次小剂量输注两种治疗模式的抗肿瘤的作用。建立BALB/c小鼠结肠癌模型;体外诱导培养小鼠CIK细胞,7天后CIK单次大剂量组荷瘤鼠接受总剂量为1×107的CIK细胞一次性输注;CIK分次小剂量组荷瘤鼠分5次(隔天1次)接受总剂量与单次组相同的CIK细胞输注,绘制肿瘤生长曲线;治疗后第14天,采用流式细胞术检测各治疗组小鼠脾细胞CD3+、CD4+、CD8+、NK1.1+、DX5+等细胞表型;建立CIK治疗后小鼠脾细胞对C26皮下移植瘤的预防和治疗模型,预防模型统计一周出瘤率,治疗模型生存资料分析采用Kaplan-Meier法及log-rank检验;ELISPOT法检测小鼠脾淋巴细胞经C26抗原刺激后分泌IFN-γ的能力。结果CIK单次治疗组小鼠肿瘤生长平均体积(253.30±43.59)mm3明显小于CIK分次治疗组(384.36±43.59)mm3,差异有统计学意义(P=0.042);CIK单次治疗组小鼠脾细胞相对于CIK分次治疗组、PBS对照组对C26结肠癌移植瘤表现出更好的预防和治疗效应(P<0.05);CIK单次治疗组小鼠脾细胞较其余各组CD4+T细胞比例下调,而CD8+T细胞比例上调,差异有统计学意义(P<0.05),而CD3+、NK1.1+、DX5+等细胞表型各组之间差异无统计学意义(P>0.05);CIK单次治疗组小鼠脾细胞在经C26抗原刺激后分泌IFN-γ的能力最强,差异较其余各组有统计学意义(P<0.05)。提示CIK单次大剂量输注较分次小剂量输注对BALB/c皮下结肠癌(C26)荷瘤小鼠具有更好的激发机体免疫应答效应以及肿瘤预防和治疗作用。

肿瘤射频消融裂解物负载的DC—CIK细胞体外抗肿瘤活性实验研究

目的研究负载射频消融肿瘤原位裂解物的树突状细胞（Dc）联合细胞因子诱导杀伤活性细胞（CIK）体外抗肿瘤活性。方法制备BALB／C小鼠脾脏来源的CIK细胞及骨髓来源的Dc。建立射频消融灭活小鼠皮下结肠癌的实验模型，将其原位裂解的肿瘤组织反复冻融后取上清，lowry蛋白定量法定量，以终浓度5μg／ml载培养第5天的Dc（即Ag-Dc），2d后再与培养第7天的CIK细胞共培养48h，流式细胞术分析其表面共刺激分子的表达，细胞增殖与毒性检测试剂盒（CCK-8试剂盒）检测其体外杀伤活性。结果DC表面分子表达共刺激分子CD86＋ CD11c＋、MHCⅡ＋ CD11c＋、MHCⅡ＋ CD80＋双阳性细胞百分含量分别为9．50％、42．4％、53．4％；Ag-DC表面分子表达共刺激分子双阳性细胞百分含量明显提高，分别为19．2％、74．2％、61．1％。CIK细胞培养第1天，CD3＋ NK1．1＋双阳性的百分含量为1．45％，第7天CD3＋ NK1．1＋双阳性表达明显提高为36．9％。Ag—DC—CIK细胞对结肠癌细胞C26的杀伤活性明显高于DC-CIK、CIK细胞，且相同效靶比下前者的杀伤活性明显高于后者。效靶比为5：1时，Ag-DC-CIK细胞杀伤率为（74．9±3．5）％，DC-CIK细胞杀伤率为（71．2±2．1）％，CIK细胞杀伤率为（68．7±2．9）％，差异有统计学意义（F=7．007，P=0．007）；效靶比为10：1时，Ag—DC-CIK细胞杀伤率为（82．3±4．5）％，DC-CIK细胞杀伤率为（77．1±5．1）％，CIK细胞杀伤率为（72．7±2．8）％，差异有统计学意义（F=7．727，P=0．005）；效靶比为20：1时，Ag-DC-CIK细胞杀伤率为（83．2±1．9）％，DC-CIK细胞杀伤率为（77．2±4．2）％，CIK细胞杀伤率为（73．0±2．6）％，差异有统计学意义（F=16．594，P=0．000）。结论负载肿瘤射频消融原位裂解产物的DC联合CIK细胞可以提高体外细胞毒活性，为肿瘤综合治疗提供新策略。

肿瘤射频消融裂解物致敏树突状细胞的抗肿瘤活性研究

目的 观察射频消融（RFA）肿瘤原位裂解物负载树突状细胞（DCs）抗肿瘤活性.方法 制备BALB/c小鼠骨髓来源的DCs,对BALB/c小鼠结肠癌（C26）皮下种植瘤进行RFA灭活,将其原位裂解的肿瘤组织反复冻融后取上清,Lowry蛋白定量法定量,以终质量浓度5 mg/L负载培养第5天的DCs（即Ag-DCs）,采用流式细胞仪分析Ag-DCs与未负载抗原的DCs的表面分子[CD11c、人类主要组织相容性复合体（MHC）-Ⅱ、CD80与CD86]表达的差异.建立3组肿瘤治疗与预防模型分别是Ag-DC组（n=5）、DC组（n=5）与磷酸盐缓冲液（PBS）对照组（n=5）,采用ANOVA方差分析比较3组间种植瘤体积的变化趋势,Log-rank检验比较3组小鼠的生存时间.结果 Ag-DCs的CD80、CD86、MHC-Ⅱ、CD11c表达率分别为86.3％、29.4％、75.4％、82.5％;未处理的DCs表面分子的CD80、CD86、MHC-Ⅱ、CD11c表达率分别为68.6％、15.1％、64.5％、66.7％;小鼠肿瘤预防模型提示7d成瘤率分别为：Ag-DC组60％（3/5）、DC组80％（4/5）、PBS对照组100％（5/5）;且Ag-DC组小鼠的肿瘤体积生长缓慢,与PBS和DC组的免疫小鼠比较,差异有统计学意义（P＜0.01）.治疗模型提示：Ag-DC组小鼠的平均生存期为（39±8）d,DC组小鼠的平均生存期为（28±4）d,PBS对照组小鼠的平均生存期为（22±3）d,差异有统计学意义（P＜0.01）;且Ag-DC组小鼠的肿瘤体积生长缓慢,与PBS和DC组的免疫小鼠比较,差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 肿瘤射频消融原位裂解物作为抗原可有效刺激DC产生特异性抗肿瘤免疫效应.

肿瘤射频消融联合免疫治疗的研究进展

射频消融（RFA）是一种微创治疗手段，不仅使局部肿瘤产生凝固性坏死，而且能激发机体特异性免疫反应。近年来，大量证据表明，射频消融伴随的危险信号对固有免疫和适应性免疫反应有影响，但是消融诱导机体的免疫反应往往处于低水平。消融联合免疫治疗可以消除消融后肿瘤的复发，研究对射频消融联合免疫旨在消融联合免疫治疗提供证据，为肿瘤的治疗提供新思路。肿瘤的复发和转移是肿瘤治疗过程中的难题，建立肿瘤主动性免疫治疗模式可望成为解决肿瘤转移和复发的有效途径。