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应用甲基化基因检测技术分析前列腺癌中HIC1的甲基化状态 被引量:4
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作者 单孟林 丁滔 +3 位作者 郑江花 程增辉 郭颖 夏前林 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期290-296,共7页
背景与目的:癌高甲基化基因1(hypermethylated in cancer 1,HIC1)因表观遗传甲基化修饰导致其在多种癌细胞和组织中表达沉默,可能与肿瘤的发生、发展有关。而这一现象在前列腺癌研究中的报道甚少。该研究采用甲基化基因检测技术对前列... 背景与目的:癌高甲基化基因1(hypermethylated in cancer 1,HIC1)因表观遗传甲基化修饰导致其在多种癌细胞和组织中表达沉默,可能与肿瘤的发生、发展有关。而这一现象在前列腺癌研究中的报道甚少。该研究采用甲基化基因检测技术对前列腺癌中HIC1启动子进行甲基化状态分析。方法:采用甲基化特异性聚合酶链式反应(methylation-specific polymerase chain reaction,MSP)和亚硫酸盐测序PCR(bisulfate sequencing PCR,BSP)技术,对前列腺癌细胞PC3、C4-2B和正常前列腺上皮细胞Pr EC,以及前列腺癌组织标本和正常前列腺穿刺标本,进行HIC1启动子甲基化分析;并使用去DNA甲基化酶5-Aza-Cd R处理PC3、C4-2B和Pr EC,经反转录PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)分析HIC1在基因水平和蛋白质水平上的变化。结果:MSP分析结果发现,在PC3、C4-2B和Pr EC中HIC1甲基化率分别为78.23%、72.15%和10.63%,差异有统计学意义(P<0.05)。对36例人前列腺癌实体瘤和36例人前列腺正常穿刺组织进行BSP测序,统计显示,甲基化率分别是80.30%和31.56%。5-Aza-Cd R处理后的PC3、C4-2B和Pr EC经RT-PCR和Western blot分析发现,与未处理对照相比,HIC1转录水平和蛋白水平表达均显著上调。结论:在前列腺癌中,抑癌基因HIC1启动子呈高度甲基化状态并出现表达沉默或下调,可作为前列腺癌的早期预测指标和潜在的治疗靶点。 展开更多
关键词 甲基化特异性PCR 亚硫酸盐测序PCR 前列腺癌 癌高甲基化基因1 甲基化
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前列腺癌差异表达基因的筛选及相互作用的生物信息学分析 被引量:4
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作者 夏前林 单孟林 +3 位作者 丁滔 朱延军 侯君 郑江花 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期169-176,共8页
背景与目的:基因芯片技术是利用杂交测序方法,可大规模高通量地检测不同组织、细胞中的基因表达水平的技术。该研究采用基因芯片技术筛选前列腺癌及前列腺炎症穿刺组织中差异表达的基因并对其进行生物学信息分析。方法:采用美国Affymetr... 背景与目的:基因芯片技术是利用杂交测序方法,可大规模高通量地检测不同组织、细胞中的基因表达水平的技术。该研究采用基因芯片技术筛选前列腺癌及前列腺炎症穿刺组织中差异表达的基因并对其进行生物学信息分析。方法:采用美国Affymetrix Human U133 plus 2.0基因表达谱芯片,按一步法分别抽提恶性程度较高的前列腺癌及前列腺炎症组织的总RNA,并分离纯化这两种组织的m RNA。经逆转录合成掺入生物素标记的c DNA合成探针,与芯片杂交和严格洗片后,用荧光扫描仪扫描芯片荧光信号图像。用生物信息学方法分析前列腺癌及前列腺炎症组织中差异表达基因。结果:按照表达差异倍数大于等于2,P<0.05的筛选条件,筛选出差异基因1 819条,其中上调表达基因1 025条和下调表达基因794条。采用GO富集分析发现这些差异基因主要涉及细胞周期、分子代谢等分子功能以及生物学过程;KEGG信号通路分析发现,这些差异基因主要涉及嘌呤核苷酸代谢等代谢通路。STING在线工具分析对差异基因编码的蛋白质间的相互作用进行分析,结果发现这些基因编码的蛋白间的相互作用主要集中在TPX2、ANLN、NUSAP1、MELK、DLGAP5、KIF11、TOP2A及RRM2等20个关键节点基因。最后对重要节点基因进行文献挖掘,发现CEP55和ANLN基因可能与前列腺癌的发生和转移有关。结论:在前列腺癌的发生、发展中,促使细胞进入增殖周期的相关基因的活化、代谢相关酶类基因活性的异常、细胞黏附功能相关基因的抑制以及细胞移行相关基因的激活等因素发挥了重要的作用。系统的分析这些基因发现,CEP55和ANLN基因与前列腺癌的发生和预后关系密切,为下一步研究实验提供有价值的线索。进一步研究相关差异基因将有望发现新的早期诊断指标,为建立个体化治疗方案和预后评估系统提供帮助。 展开更多
关键词 前列腺癌 基因芯片 差异基因 生物信息学
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“校园贷”类P2P平台涉嫌风险及规制
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作者 单孟林 《合作经济与科技》 2018年第15期46-47,共2页
近年来,随着金融科技的不断发展创新,互联网金融模式应运而生,"校园贷"P2P平台也呈现出爆发式的生长态势。而在新模式发展初期,由于监管真空的存在,必定会引起金融乱象。本文分析"校园贷"类P2P平台涉嫌的风险,并提... 近年来,随着金融科技的不断发展创新,互联网金融模式应运而生,"校园贷"P2P平台也呈现出爆发式的生长态势。而在新模式发展初期,由于监管真空的存在,必定会引起金融乱象。本文分析"校园贷"类P2P平台涉嫌的风险,并提出相关治理乱象的对策建议,以促进"校园贷"可持续发展。 展开更多
关键词 校园贷 风险 监管对策
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活化特异结核感染T淋巴细胞斑点法在获得性免疫缺陷综合征潜伏结核感染诊断中的应用 被引量:1
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作者 郑江花 夏前林 +1 位作者 单孟林 卢洪洲 《内科理论与实践》 2016年第5期273-277,共5页
目的:了解上海市公共卫生临床中心潜伏性结核感染(LTBI)比例,评价活化特异结核感染T淋巴细胞斑点试验(TSPOT.TB)筛查人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者/获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者、结核病患者、其他疾病就诊患者LTBI的可行性。方法:上... 目的:了解上海市公共卫生临床中心潜伏性结核感染(LTBI)比例,评价活化特异结核感染T淋巴细胞斑点试验(TSPOT.TB)筛查人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者/获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者、结核病患者、其他疾病就诊患者LTBI的可行性。方法:上海市公共卫生临床中心自2012年7月至2015年12月以来收治7 482例患者,其中HIV感染者/AIDS患者1 837例、结核病患者1 689例、其他疾病就诊患者3 956例,分别进行TSPOT.TB,筛查可能的LTBI者,并采用结核分枝杆菌涂片实验和X射线胸部透视(胸透)进一步证实。结果:HIV感染者/AIDS患者、结核病患者和其他疾病就诊患者中TSPOT.TB阳性者分别为301例(16.39%)、928例(54.94%)和1 509例(38.14%),并且结核分枝杆菌涂片实验结果均为阴性,而且经胸透结果证实。结论:活化特异TSPOT.TB筛查HIV感染者/AIDS患者、结核病患者、其他疾病就诊患者LTBI的方法可行,并且对HIV感染者/AIDS患者开展LTBI的检测非常重要。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒感染 获得性免疫缺陷综合征 潜伏性结核感染 结核感染T淋巴细胞斑点试验
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TSPOT.TB在HIV感染/AIDS合并分枝杆菌感染患者中的诊断价值 被引量:1
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作者 张桂红 夏前林 +1 位作者 单孟林 郑江花 《诊断学理论与实践》 2017年第4期404-408,共5页
目的 :探讨结核感染T细胞斑点试验(T cells spot test of Tuberculosis infection,TSPOT.TB)在人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染/获得性免疫缺乏综合征(acquired immune deficiency syndrome,AIDS)合并分枝杆菌... 目的 :探讨结核感染T细胞斑点试验(T cells spot test of Tuberculosis infection,TSPOT.TB)在人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染/获得性免疫缺乏综合征(acquired immune deficiency syndrome,AIDS)合并分枝杆菌感染患者中诊断结核杆菌感染的价值。方法:回顾性调查2012年7月至2016年12月复旦大学附属上海市公共卫生临床中心251例行TSPOT.TB检测的HIV感染/AIDS患者的临床资料,以MPB64胶体金菌型鉴定法为金标准,251例患者中135例诊断为结核分枝杆菌感染,116例诊断为非结核分枝杆菌感染,分析TSPOT.TB诊断HIV感染/AIDS合并分枝杆菌感染患者是否为结核分枝杆菌感染的价值,并将患者按感染部位分为肺外感染与肺部感染2组,按CD4+T细胞数目分为CD4+T≤200个/μL和CD4+T>200个/μL 2组,探讨TSPOT.TB在不同感染部位和不同CD4+T细胞数目患者中的诊断灵敏度和特异度。结果:251例HIV感染/AIDS合并分枝杆菌感染患者中,TSPOT.TB诊断结核分枝杆菌感染的灵敏度和特异度分别为83.70%和80.17%。其在肺外和肺部分枝杆菌感染患者中的诊断灵敏度分别为85.00%和82.67%,差异无统计学意义(χ~2=0.133,P=0.715);而其特异度分别为93.10%和75.86%,差异有统计学意义(χ~2=4.067,P=0.044)。在CD4+T≤200个/μL组和CD4+T>200个/μL组患者中,TSPOT.TB的诊断灵敏度分别为81.58%和80.95%,差异无统计学意义(χ~2=0.000,P=1.000);而其特异度则分别为85.86%和47.06%,差异有统计学意义(χ~2=11.408,P=0.001)。结论 :在HIV感染/AIDS合并分枝杆菌感染患者中,TSPOT.TB诊断结核分枝杆菌感染的灵敏度较高,在不同感染部位、不同CD4+T细胞数患者间,其诊断灵敏度均较稳定,不存在统计学差异;但其诊断特异度在肺外感染与肺部感染、CD4+T≤200个/μL与CD4+T>200个/μL组间差异存在统计学意义,提示其诊断特异度可能受感染部位和CD4+T细胞数目影响。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 非结核分枝杆菌 结核感染T细胞斑点试验 灵敏度 特异度
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