家兔肝低密度脂蛋白受体的提取和初步纯化

为了研究肝细胞LDL受体在细胞摄取、降解血浆LDL过程中的作用,我们从家兔肝脏提取并初步纯化了LDL受体。肝匀浆经离心分别除去细胞核、线粒体和溶酶体后,100000g离心获得质膜,在4℃、pH6和Ca^(2+)存在下加Triton X-100提取膜受体,再经DEAE纤维素柱层析初步纯化,用酶联免疫受体分析法检测LDL与受体结合活性。结果表明,提取和初步纯化的得率分别为29.7％和4.3％;纯化倍数分别为1.9和8.9倍。在提取、纯化受体的操作过程中,作者特别强调预先除去溶酶体的重要性。本文还比较了不同处理方法所得膜沉淀物的稳定性。