特基拉芽孢杆菌WRN032对稻瘟病菌的生物防治潜力

植物病原真菌是农作物病害的主要致病菌,导致作物减产,严重阻碍农业发展.病原真菌种类繁多,作用机制复杂,防治难度大,传统化学防治手段无法满足当今发展需求,而生物防治是一种安全、绿色、高效的防控手段.以来源于土壤和植物根茎的多种细菌为研究对象,以菌种的抑菌活性为指标,采用牛津杯法,筛选出一株具有生物防治潜力的细菌WRN032,对黑腐皮壳菌(Rhizoctonia solani)、禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)和稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)的生长均具有不同程度的拮抗作用,其中对稻瘟病菌的抑制作用较强.使用石油醚、正丁醇和乙酸乙酯依次对菌株WRN032的发酵液进行萃取,发现其乙酸乙酯提取物对稻瘟病菌有强拮抗作用.结合生理生化鉴定及16S rDNA序列分析对其菌种进行鉴定,结果表明该细菌为特基拉芽孢杆菌(Bacillus tequilensis).对特基拉芽孢杆菌WRN032代谢产物中的活性物质进行稳定性试验,表明其在高温、强酸性、中性和弱碱性条件下均具有良好的稳定性,且对紫外光不敏感.采用柱层析法和半制备层析法对特基拉芽孢杆菌WRN032发酵液中的活性物质进行分离纯化,其纯化物对稻瘟病菌的相对抑制率与相同浓度的75%三环唑可湿性粉剂相近.当浓度为100.0μg/mL时,相对抑制率为51.2%,与75%三环唑可湿性粉剂(56.4%)基本相同.研究表明,特基拉芽孢杆菌WRN032具有作为农业生物防治剂的潜力.

应用LAMP实时浊度法检测转基因大豆

DNA环介导等温扩增(Loop Mediated Isothermal Amplification,LAMP)方法是一种新型的核酸扩增检测方法,该方法操作简便、所需时间短、灵敏度高、特异性强。实时浊度法可以实时检测反应过程中所产生的白色沉淀,从而实现对LAMP整个反应过程的实时监控。本研究以抗草甘膦转基因大豆为研究对象,针对外源基因cp4-epsps的保守区域设计特异性引物,通过实时浊度法在63℃恒温条件下完成转基因大豆的检测工作。结果显示,LAMP实时浊度法能够特异性检测cp4-epsps基因,其检测灵敏度是常规定性PCR方法的10倍。本研究建立了针对转基因大豆cp4-epsps基因的LAMP实时浊度检测方法,该方法具有高度的稳定性与特异性,结果准确,适合于转基因抗草甘膦大豆的快速检测。

慢性镉诱导小鼠巨噬细胞的吞噬功能活性抑制研究

选用60只健康雌性ICR小鼠,随机分为对照组、低剂量氯化镉组(L-Cd组)、高剂量氯化镉组(H-Cd组),每组20只.对照组每天给予普通全价饲料,L-Cd和H-Cd组分别饲喂含镉2和10 mg/kg的全价饲料,连续9周.分别在第3、6、9周观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数的变化,并检测血浆TNF-α水平.结果显示,在整个实验期内,L-Cd和H-Cd组腹腔巨噬细胞吞噬率明显低于对照组,且随剂量增加和时间的延长而明显下降,而吞噬指数虽较对照组下降但无显著差异;血浆TNF-α水平变化不明显.提示慢性镉染毒诱发小鼠巨噬细胞吞噬功能低下.

电力输送系统高压电缆输电技术工程探讨与研究

在实际生活中,电厂输送的电力基本属于高压电,为此输送网络都是由高压电缆进行的远距离输送,而后经过一系列的变电压处理再转由普通的电缆输送。该文对电力输送系统高压电缆输电技术工程进行探讨与研究,首先从高压电缆在电力输送系统应用中的优点出发,然后对高压电缆线路与电力输送系统的连接及绝缘配合要求进行了分析,包括电力输送系统中应用的3种方式及对系统绝缘的配合要求两个方面。最后从电缆金属护套或屏蔽层接地方式、电缆金属护套或屏蔽层接地方式选择分析以及高压电缆的载流量三个方面对高压电缆的主要技术特点进行了全面的阐述,希望对今后电力输送系统高压电缆输电技术工程实践操作工作提供一个有价值的参考依据。

hsBAFF对小鼠脾脏B淋巴细胞增殖与免疫应答及胞内Ca^(2+)水平的影响

目的:探讨大肠杆菌表达的人源可溶性B淋巴细胞激活因子hsBAFF对小鼠脾脏B淋巴细胞免疫反应及其对胞内游离Ca2+信号变化的影响。方法:选择20只健康ICR小鼠,雌雄各半,随机分成两组(n=10):①对照组;②hsBAFF实验组。实验组小鼠腹腔注射含hsBAFF(0.1mg/kgbw)的PBS溶液,对照组注射同等剂量的PBS溶液,连续8d。用MTT法检测小鼠脾脏B淋巴细胞的增殖及其对LPS刺激的免疫反应,并用激光共聚焦显微镜分析脾脏B淋巴细胞胞内钙离子水平([Ca2+]i)变化。结果:hsBAFF注射小鼠的脾脏B淋巴细胞增殖和对LPS刺激的免疫反应均明显高于对照组(P<0.05);hsBAFF注射组[Ca2+]i荧光强度维持在相对稳定的高水平上波动,平均荧光强度显著高于对照组(P<0.01),且荧光强度变化率小于对照组。结论:大肠杆菌表达的hsBAFF能促进B淋巴细胞的增殖和免疫应答,从而增强机体免疫功能。hsBAFF激活小鼠脾脏B淋巴细胞可能与[Ca2+]i升高有关。

基于QbD理念优化苦参生物碱的分离工艺

将质量源于设计(QbD)理念应用于苦参生物碱的纯化工艺,建立稳定可控的操作空间.以苦参总生物碱(TASF)、苦参碱(MT)和氧化苦参碱(OMT)的解吸量为工艺评价指标,静态吸附和解吸试验选取性能最优的大孔树脂作为纯化过程中的吸附剂,单因素和多因素显著性试验(PBD)筛选并确定关键工艺参数(CPPs),中心点复合试验(CCD)进一步优化工艺参数,建立工艺参数和工艺评价指标之间的数学模型,以此获得操作空间,在空间内、外选点,对模型及设计空间进行验证.NK-109型大孔树脂吸附性能良好,为该试验的最优树脂.上样液pH值、洗脱剂乙醇浓度和洗脱流速为该试验的显著性影响因素.关键工艺参数与工艺评价指标之间回归方程的P值均小于0.05,而失拟项均大于0.05,表明回归方程显著.在苦参总生物碱解吸量≥0.87 mg/g,苦参碱解吸量≥32.50μg/g,氧化苦参碱解吸量≥244.10μg/g的工艺指标下,设计空间为:洗脱流速≤25.0 m L/h,洗脱剂乙醇体积分数82.0%~87.0%,上样液pH值5.3~6.2.验证结果表明模型的预测能力良好,空间内的点满足工艺指标,而空间外的点无法达到生产要求,设计空间稳定.质量源于设计理念的引用可以为中药的分离纯化过程提供稳定可控的操作空间,在确定工艺指标的基础上,灵活设置工艺参数,保证产品质量可控.

基于POE的城市广场公共设施研究——以淮南市会战纪念文化广场为例

公共设施设计的合理与否会直接影响到使用者对广场的印象。本文以淮南市会战纪念文化广场为例,利用使用后评价理论(POE),对使用人群、行为和广场内公共设施的实际使用情况进行调研和评价。并在此基础上提出改造设计策略,以期为城市广场公共设施的建设提供有益的借鉴。

一株对稻瘟病菌有抗菌活性的特基拉芽孢杆菌WRN032的筛选及发酵条件优化

采用牛津杯法抑菌试验,根据多种芽孢杆菌对不同植物病原真菌的生长抑制效果进行筛选,得到特基拉芽孢杆菌WRN032对稻瘟病菌的生长抑制效果最佳。以吸光度和抑菌圈直径为指标,设计进行单因素试验、多因素显著性筛选试验和中心点复合试验对特基拉芽孢杆菌WRN032的发酵条件进行优化,得到该菌株抗菌活性最优的发酵条件为:接种量1%,摇瓶装液量40%,葡萄糖浓度2%,摇床转速220 rpm,初始pH6.5,培养时间48 h,培养温度30℃。在此条件下,特基拉芽孢杆菌WRN032的发酵液吸光度和萃取物的抑菌圈直径与优化前相比分别提高了186.63%和154.10%。

有机酸是有益于动物健康的饲料添加物

1有机酸的抑菌作用有机酸通过多种假定的生理机制抑制致病菌的生长,其中最能被人们接受的一种机制是可阻断细胞膜的转运,该转运通过吸收养分和排出废物使细菌和其所处的环境处于一种相对平衡的状态。有机酸进入致病菌内部(细胞质)后,由于细胞质内较高的pH环境,于是会将其所携带质子(氢离子)释放出来。

泰安市老年人社区居家养老护理服务需求研究

目的:了解泰安市老年人社区居家养老服务需求,并探索其影响因素。方法:随机抽取泰安市320名老年人进行问卷调查。结果:配餐服务、突发疾病紧急救助及娱乐活动需求分别是三类养老服务中需求最多;婚姻状态、受教育程度等5个因素对老年人社区居家养老意愿的影响有统计学意义。结论:泰安市老年人对社区居家养老服务需求较高,受多种因素影响。应以老年人的养老需求为导向,提供多样化、个性化社区居家养老服务。

河北地区食源性单核细胞增生李斯特菌脂肪酸的分型研究

对脂肪酸分型方法在单核细胞增生李斯特菌（LM）菌株鉴定、菌株相似性分析等方面的应用价值进行评价。本研究选取2005~2007年从河北地区六大类食品中分离到的90株LM菌,提取脂肪酸,利用MIDI公司Sherlock系统进行菌体脂肪酸成分分析,使用SPSS 19.0软件对获得的数据资料进行统计分析及聚类分型,并将脂肪酸分型与传统的血清分型和分型金标准PFGE分型进行比较。结果表明,脂肪酸分析法判定LM菌的符合率为96.67%,所有菌株共检出20种脂肪酸成分,主要脂肪酸成分有3种,分别为脂肪酸15：0anteiso、17：0 anteiso和15：0 iso。各血清型间脂肪酸含量存在一定差异,血清1/2c型菌株与血清1/2a、1/2b和4b型菌株相比,有2种主要脂肪酸含量差异有统计学意义（P〈0.01）。与PFGE分型相比,在对结构简单的小样本资料的菌株亲缘关系鉴定中脂肪酸分型更具优势。将脂肪酸分型与血清学分型和PFGE分型相结合能够更好的分析LM菌菌株之间的相关性。

基孔肯雅病毒LAMP检测方法的建立及其应用研究

目的:建立快速、灵敏、特异的基孔肯雅病毒(CHIKV)环介导等温基因扩增(LAMP)检测方法,将该方法应用于基孔肯雅热(CHIK)可疑患者的快速筛查。方法:根据CHIKV核酸序列多重比对结果设计并合成LAMP专用的扩增引物,摸索最佳反应条件,建立灵敏、特异的CHIKV核酸LAMP检测新方法;应用该方法对疑似患者血清中提取的核酸进行快速检测。结果:本方法对CHIKV样本的检测灵敏度达到27拷贝/反应,检测灵敏度高于普通PCR法,略低于实时荧光PCR法。本方法快速、灵敏,并具有较高的特异性和很好的重复性,可在两小时内对CHIK疑似病例进行准确诊断。利用本方法对入境CHIK患者及国内患者样本进行检测,均取得了良好的效果。结论:本方法适合国境口岸一线及基层卫生机构对CHIK可疑患者进行快速检测,对防止CHIK疫情向我国的传播及保障我国公共卫生安全均具有重要意义。