胸腺五肽纳米粒的制备及其处方优化

目的建立制备胸腺五肽纳米粒的方法并对其处方进行优化,为制备符合要求的压力定量吸入气雾剂奠定基础。方法将胸腺五肽、卵磷脂、乳糖溶于叔丁醇-水的混合溶剂中,冷冻干燥,将冻干产物用异丙醇混悬,离心除去多余的卵磷脂以得到纯药物纳米粒。采用星点设计-效应面法对其中水、卵磷脂、胸腺五肽的用量进行优化,因胸腺五肽的含量受此处方影响不显著,所以只选取纳米粒的粒径、粒径分布为结果考察指标。结果最优处方:水∶叔丁醇、卵磷脂∶叔丁醇、胸腺五肽∶水的比例分别为0.5(mL∶mL)、213.5(mg∶mL)、17.0(mg∶mL),即水的用量1.5 mL、卵磷脂的用量640.57 mg、胸腺五肽的用量25.57 mg、叔丁醇的用量3.0 mL。按此处方制备的纳米粒粒径在150 nm左右,多分散系数为0.1以下,含量均能保持在98%以上。结论采用该方法制备胸腺五肽纳米粒,质量佳,重现性好,方法简便,具有良好的应用前景。

高效液相色谱法测定鲑鱼降钙素混悬型气雾剂的含量

目的建立测定鲑鱼降钙素混悬型气雾剂中鲑鱼降钙素含量的高效液相色谱法。方法采用Phenomenex Jupiter C18300ù色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相A（0.02 mol/L四甲基氢氧化铵,pH=2.5）、流动相B（乙腈）进行二元梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,紫外检测波长为220 nm,柱温为40℃。结果鲑鱼降钙素质量浓度在0.8~50 μg/mL范围内与峰面积成良好线性关系,回归方程为A=4.5087×104ρ-7.3948×103,r=0.9997（n=7）,加样回收率为98.24%,RSD为1.18%。测得鲑鱼降钙素混悬型气雾剂中鲑鱼降钙素平均含量为每瓶1.41 mg。结论该法准确、可靠、操作简便,适用于鲑鱼降钙素混悬型气雾剂的含量测定。

林蛙皮胶原蛋白的提取及其生物学特征分析

目的：建立林蛙皮胶原蛋白低温提取及纯化方法,保证胶原蛋白的活性,并对其生物学特性进行初步探讨。方法：采用低温酸酶提取结合的方法提取林蛙皮中的胶原蛋白,并对提取过程中过氧化氢的加入量进行考察;对纯化的胶原蛋白进行含量、相对分子质量分布等定性及定量检测,同时观察其对间充质干细胞增殖情况的影响。结果：在4℃经脱色脱脂处理（过氧化氢浓度为0.025%）后,用0.5 mol/L的醋酸提取48 h,沉淀再分别用0.67%、1.34%、2%的胃蛋白酶提取,在此工艺条件下,酸溶性胶原蛋白（ASC）的提取率为8.77%±0.44%,纯度为75.83%±3.78%;酶溶性胶原蛋白（PSC）的提取率为30.69%±0.83%,纯度为66.39%±1.79%。紫外扫描图谱表明提取物具有胶原蛋白的特征吸收。SDS-PAGE分析表明所得ASC与PSC均由2条α1链与1条α2链组成,为保持了三股螺旋结构特征的Ⅰ型胶原蛋白。对细胞生长影响的实验表明,ASC与PSC在0.05~20 mg/m L浓度范围对间充质干细胞的生长无抑制作用,并且在某些浓度下具有促进干细胞增殖的作用。结论：低温酸酶法可高效提取林蛙皮粉中的胶原蛋白,提取的胶原蛋白具有良好的生物学活性,本方法及提取的胶原蛋白在组织工程等领域具有良好的应用前景。