P-HPLC法同时测定不同产地不同采收期墨旱莲中6种成分的含量

目的建立同时测定不同产地、不同采收期墨旱莲药材中咖啡酸、木犀草苷、异绿原酸B、异绿原酸C、木犀草素、蟛蜞菊内酯6种化学成分的HPLC含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.3%甲酸水溶液,梯度洗脱;检测波长340 nm;流速0.9 mL·min^(-1);柱温30℃。结果咖啡酸线性范围为0.02008~0.20080μg(r=0.9998),平均回收率(n=6)为99.07%;木犀草苷线性范围为0.04084~0.40840μg(r=0.9999),平均回收率(n=6)为99.13%;异绿原酸B线性范围为0.08186~0.81860μg(r=1.0000),平均回收率(n=6)为98.46%;异绿原酸C线性范围为0.07966~0.79660μg(r=0.9995),平均回收率(n=6)为97.84%;木犀草素线性范围为0.08104~0.81040μg(r=1.0000),平均回收率(n=6)为97.89%;蟛蜞菊内酯线性范围为0.40280~4.02800μg(r=0.9992),平均回收率(n=6)为98.18%。不同产地的墨旱莲药材6种成分含量差异较大,江苏宿迁含量最高。结论该方法稳定可靠、准确、重复性好。适合于墨旱莲药材中多种成分的含量测定研究,为墨旱莲药材寻找更佳产地及采收期提供了科学依据。

柴芎头痛颗粒中阿魏酸含量的HPLC测定

目的 探究柴芎头痛颗粒中指标性成分阿魏酸含量测定方法,为柴芎头痛颗粒的质量控制提供实验依据。方法 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱;乙腈-0.1%磷酸溶液(13:87);检测波长320 nm。结果该方法阿魏酸峰面积和质量浓度之间线性关系良好,r为0.999 9,精密度、稳定性均符合要求,平均加样回收率为98.73%,RSD为0.68%。结论 本文建立的柴芎头痛颗粒HPLC指标性成分阿魏酸含量测定方法,可以为柴芎头痛颗粒的质量控制提供参考。

UPLC-Q Exactive Plus-MS分析高粱壳化学成分及黄嘌呤氧化酶体外抑制活性筛选

采用高效液相色谱串联四极杆静电场轨道阱质谱对高粱壳中的化学成分进行分析鉴定,并通过高效液相色谱法筛选抑制黄嘌呤氧化酶活性成分。该实验使用Hypersil GOLD C_(18)色谱柱(2.1 nm×30 nm,3μm),以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)进行梯度洗脱,流速1.0 m L/min,进样量10μL。质谱分析采用ESI离子源,在正离子模式下采集数据,利用Xcalibur 4.1软件结合数据库对所得数据进行分析,共鉴定出27种化学成分。对刺槐素、葛根素、芹菜素、根皮苷、异鼠李素和3,3’,4’,7-四羟基黄酮6种化学成分进行活性筛选,发现芹菜素和3,3’,4’,7-四羟基黄酮对黄嘌呤氧化酶(XO)表现出较强的抑制活性,IC_(50)分别为18.11和34.59μmol/L。

人参益元颗粒质量控制方法研究

目的:采用薄层色谱法和高效液相色谱法建立人参益元颗粒的质量控制方法。方法:采用薄层色谱法定性鉴别人参益元颗粒中人参、黄芪、炙甘草、白术;高效液相色谱法(HPLC)对人参益元颗粒中芍药苷进行含量测定。结果:采用薄层色谱法建立了益元颗粒中人参、黄芪、炙甘草、白术的定性鉴别方法,斑点清晰,阴性无干扰。采用高效液相色谱法建立了益元颗粒中芍药苷含量测定的方法,具体为采用Alphasil VC-C 18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.2%磷酸溶液(17∶83)为流动相,检测波长230 nm,流速1.0 mL·min^(-1),柱温25℃,进样量10μL。该方法专属性强,芍药苷在23.35~116.74μg·mL^(-1)(r=0.9998)范围内线性关系良好,平均回收率为99.56%,RSD为1.40%。结论:本研究所建立的薄层色谱法鉴别及HPLC含量测定方法专属性强、重现性好,可用于人参益元颗粒的质量控制。

藤黄健骨丸HPLC指纹图谱的建立及7种成分的含量测定

目的建立藤黄健骨丸HPLC指纹图谱,并同时测定淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、柚皮苷、松果菊苷、毛蕊花糖苷的含量。方法采用高效液相色谱法,Agilent ZORBAX Extend C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱;流速1.0 ml/min;柱温为25℃;检测波长280 nm;进样量为10μl。结合《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012年版)建立11批藤黄健骨丸的指纹图谱并进行相似度评价。结果从11批藤黄健骨丸指纹图谱中共标定20个共有峰,相似度均在0.98以上。7种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9997),平均加标回收率97.70%~99.25%,RSD 0.53%~1.57%。结论所建指纹图谱重复性好,准确,可用于藤黄健骨丸的质量控制。

稳心安神颗粒HPLC指纹图谱的建立及6种成分测定

目的:建立稳心安神颗粒的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并同时测定2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、盐酸小檗碱、丹酚酸B、槲皮素、五味子醇甲、丹参酮ⅡA的含量。方法:采用高效液相色谱法,Alphasil VC-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱,流速为0.9 mL·min^(-1),检测波长为280 nm,进样量为10μL,柱温为25℃;建立指纹图谱,采用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012.130723版)”对10批稳心安神颗粒进行相似度评价,对2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、盐酸小檗碱、丹酚酸B、槲皮素、五味子醇甲、丹参酮ⅡA色谱峰进行指认,同时测定6种成分的含量。结果:10批稳心安神颗粒中标定25个共有峰,相似度均在0.950以上。6个成分分别在0.0210~0.2100、0.4168~4.1680、0.4044~4.0440、0.0102~0.1020、0.0426~0.4260、0.0448~0.4480μg进样量范围内线性关系良好,平均回收率为98.61%~100.69%,RSD为0.75%~1.26%。结论:该方法重复性好,可操作性强,可用于控制稳心安神颗粒的质量。

八味通里颗粒的质量标准研究

目的建立院内制剂八味通里颗粒的质量标准。方法采用薄层色谱法(TLC)对八味通里颗粒中炒莱菔子、大黄、槟榔进行定性鉴别;采用高效液相色谱法(HPLC)对枳壳和枳实中新橙皮苷进行含量测定,使用ACE-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)分析柱,流动相为乙腈(A)-0.25%磷酸溶液(B)=19∶81,检测波长为283 nm,流速为0.9 ml/min,柱温为25℃,进样量为10μl。结果TLC斑点清晰、阴性无干扰专属性强、重现性好;HPLC含量测定方法简便准确,阴性无干扰、专属性强,新橙皮苷分别在0.21~2.10μg(r=0.9998)范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.91%(RSD=0.43%)。结论本研究建立的TLC薄层鉴别及HPLC含量测定方法可操作性强、方法简单、专属性好,可有效控制八味通里颗粒的质量。

HPLC法测定不同产地返魂草中绿原酸的含量

目的建立同时测定不同产地返魂草中绿原酸含量的方法。方法采用HPLC法。色谱柱为Diamonsil ODS C18柱（4．6mm×250mm，5μm），流动相为乙晴-体积分数为0．4％的磷酸水溶液，检测波长为326nm；流速为1mL·min^-1。结果绿原酸质量在62～301ng内与峰面积呈良好的线性关系，平均回收率为99．2％，RSD为0．91％（n=9）；5个产地返魂草中绿原酸含量分别为0．95、0．72、0．55、0．64、0．44mg·g^-1。结论HPLC法可用于返魂草中绿原酸的含量测定；5个产地的返魂草中绿原酸含量有明显差异，吉林通化返魂草中绿原酸含量最高。

救必应酸酯类衍生物的合成、鉴定及其体外抗肿瘤活性研究

目的:合成并鉴定救必应酸酯类衍生物,并评价其体外抗肿瘤活性。方法:以救必应酸为原料,通过28位酯化、3β位和23位羟基与酸酐反应合成救必应酸酯类衍生物;采用高分辨质谱、核磁共振氢谱、核磁共振碳谱及理化性质对合成的救必应酸酯类衍生物进行结构鉴定。采用MTT法评价紫杉醇(阳性对照)、救必应酸及救必应酸酯类衍生物对人宫颈癌细胞He La、人恶性黑色素瘤细胞A375、人肺腺癌细胞SPC-A1、人肝癌细胞HepG2的体外抗肿瘤活性[以半数抑制浓度(IC50)为指标]。结果:共合成了6个救必应酸酯类衍生物,分别为救必应酸甲酯(化合物1)、3,23-O-双(乙酰基)救必应酸甲酯(化合物2)、3,23-O-双(丙酰基)救必应酸甲酯(化合物3)、3,23-O-双(丁酰基)救必应酸甲酯(化合物4)、3,23-O-双(邻苯二甲酰基)救必应酸甲酯(化合物5)及3,23-O-双(丁二酰基)救必应酸甲酯(化合物6)。与紫杉醇比较,化合物5和化合物6对HeLa、A375、HepG2、SPC-A1细胞的抗肿瘤活性与其相似,差异无统计学意义(P>0.05),救必应酸及其他化合物的IC50显著减小(P<0.05)。结论:本研究合成了6个救必应酸酯类衍生物,其中化合物5、6具有显著的体外抗肿瘤活性,可为后续研究提供参考。

救必应酸在大鼠体内的口服生物利用度研究

目的:研究救必应酸在大鼠体内药动学和口服生物利用度。方法:建立测定大鼠血浆中救必应酸浓度的RP-HPLC法。考察大鼠经灌胃和尾静脉给予40 mg·kg^(-1)的救必应酸后血药浓度变化。采用3p97软件计算分析药动学参数和口服生物利用度。结果:灌胃组大鼠的Cmax为(0.81±0.22)μg·ml^(-1),Tmax为(45.24±5.13)min,T1/2为(101.47±8.25)min,AUC为(76.3±13.68)μg·min-1·ml^(-1);静脉注射组的T1/2为(73.68±11.02)min,AUC为(1 687.4±29.54)μg·min^(-1)·ml^(-1)。救必应酸口服利用度为4.52%。结论:救必应酸的口服生物利用度较差。

金莲花不同溶剂提取物抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的谱-效关系研究

目的:研究金莲花11种不同溶剂提取物抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的谱-效关系。方法:利用高效液相色谱-串联质谱法建立金莲花11种不同溶剂提取物的指纹图谱,通过与对照品、文献信息比对,指认共有峰对应的化合物。采用MTT法检测金莲花11种不同溶剂提取物对缺氧/复氧损伤大鼠心肌细胞H9c2存活率的影响,采用酶联免疫吸附测定法检测细胞中丙二醛(MDA)含量、活性氧(ROS)水平和上清液中乳酸脱氢酶(LDH)含量。通过灰色关联度分析法(GRA)和偏最小二乘法(PLS)联合分析共有峰对应成分与抗心肌细胞缺氧/复氧损伤(药效)的谱-效关系。结果:金莲花11种不同溶剂提取物的指纹图谱中有22个共有峰,指认出22个化合物。与缺氧/复氧损伤组比较,缺氧/复氧+S1~S6、S9、S10组细胞的存活率均显著升高,MDA含量、ROS水平、LDH含量均显著降低(P<0.05);缺氧/复氧+S8组细胞的ROS水平、LDH含量均显著降低(P<0.05)。22个化合物与药效的GRA关联度均大于0.8;除峰1、2、7、13、14、21外,其余峰对应化合物与药效的PLS分析回归系数均大于0(即成正相关);贡献排名前9位的共有峰均为峰6>11>4>5>8>9>12>10>15。结论:荭草苷(峰6)、牡荆苷(峰11)、荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷(峰4)、荭草素-2″-O-β-D-吡喃木糖苷(峰5)、槲皮素-3-O-吡喃葡萄糖苷(峰8)、牡荆素-2″-O-β-L-半乳糖苷(峰9)、金丝桃苷(峰12)、牡荆素-2″-O-β-D-吡喃木糖苷(峰10)、2″-O-(2″′-甲基丁酰基)-荭草苷(峰15)可能是金莲花抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的主要成分。

不同提取方法对西洋参中人参皂苷Rb_1含量的影响

为了考察不同提取方法对西洋参中人参皂苷Rb1含量的影响。用HPLC法,对不同的提取方法得到的样品进行含量测定。结果表明:4种提取方法人参皂苷Rb1含量分别为1.36%、0.87%、1.42%、1.43%。经过实验确定,以乙醚脱脂甲醇超声提取,提取率高、杂质较少、重现性好,是最理想的提取方法。

熊胆救心滴丸的成型工艺研究

目的 :确立熊胆救心滴丸的最佳成型工艺。方法 :采用正交实验法 ,从药物与基质 (聚乙二醇 6 0 0 0 )的比例、冷凝液(液体石蜡 )的温度、药液的温度、滴速等方面进行选择。结果 :药物与基质的比例为 1∶ 5 ,冷却温度 12～ 13℃ ,药液温度为85℃ ,滴速为 6 0滴 / min时熊胆救心滴丸质量最好。结论 :证明此工艺是可行的 ,适合产业化大生产。

抑制脂肪酶活性成分研究进展

世界卫生组织在1997年宣布肥胖是一种慢性疾病[1],肥胖可导致心血管疾病、糖尿病、高血压、高血脂,且与多种慢性疾病的产生密切相关[2],因此寻找治疗肥胖的药物已成为医学界研究的热点.脂肪酶在人类的健康和疾病中发挥着重要作用,除在人体消化、运输和加工食用脂类中发挥作用外还参与水解各种脂质底物以调节膜完整性.

金莲花多苷片中四种黄酮类化合物的含量测定

目的测定金莲花多苷片中四种黄酮类成分的含量。方法采用高效液相色谱法,以乙腈-0.2%磷酸溶液为流动相,流速为1.0 mL/min,柱温为室温,在360nm波长处,同时测定金莲花中四种黄酮类成分的含量。结果荭草素-2"-O-β-L-半乳糖苷、荭草苷、牡荆苷及槲皮素进样量分别在0.1976~1.9760μg、0.1010~1.0100μg、0.0604~0.6040μg、0.0608~0.6080μg范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.17%、98.09%、99.15%、98.54%,RSD分别为1.05%、0.90%、0.54%。0.73%。结论本方法简单准确,重复性良好,适用于金莲花多苷片的含量测定。

忍冬叶不同溶剂提取物与抗氧化的谱效关系研究

目的通过研究忍冬叶色谱峰与抗氧化活性之间的相关性分析,揭示忍冬叶抗氧化活性的可能的物质基础。方法采用HPLC-MS/MS建立忍冬叶11种不同极性提取物的指纹图谱,通过与对照品、文献信息比对、二级碎片信息指认共有峰对应的化合物。以DPPH自由基清除率及总还原力为指标,评价11种提取物抗氧化作用,通过灰色关联度法和偏最小二乘法联合分析共有峰与抗氧化作用的谱效关系,确认各共有峰的贡献程度。结果忍冬叶11种不同溶剂提取物中有20个共有峰,指认出18个化合物。S9清除DPPH自由基作用及总还原力活性均最强,其IC_(50)值分别为(1.08±0.15)mg·mL^(-1)、(3.41±0.10)mg·mL^(-1);18个化合物与药效的灰色关联度分析关联度均>0.8,除峰8、6、10、11外,其余峰与药效的偏最小二乘法分析回归系数均大于0,成正相关,其贡献程度排名前九位的共有峰为:峰5>4>16>17>18>20>19>1>9。结论忍冬叶中3,4-二羟基肉桂酸(峰5)、绿原酸(峰4)、3,4-二咖啡酰奎宁酸(峰16)、3,5-二咖啡酰奎宁酸(峰17)、4,5-二咖啡酰奎宁酸(峰18)、木犀草素(峰20)、槲皮素(峰19)、5-咖啡酰奎宁酸(峰1)、4-咖啡酰奎宁酸(峰9)可能是抗氧化的主要活性成分。

淫羊藿苷转化产物的制备及活性研究

目的旨在分析淫羊藿苷及转化产物抑制α-葡萄糖苷酶活性研究。方法对淫羊藿苷进行酶水解、酸水解、酶水解与酸水解相结合的方式进行结构转化,采用薄层色谱法、理化方法、核磁共振波谱法对转化产物进行结构鉴定,分别得到淫羊藿次苷Ⅰ、淫羊藿次苷Ⅱ、水合淫羊藿素、环淫羊藿素及脱水淫羊藿素。采用pNPG法建立α-葡萄糖苷酶筛选模型,对淫羊藿苷及其产物进行α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选。结果体外活性试验果表明,脱水淫羊藿素、淫羊藿次苷Ⅰ及淫羊藿次苷Ⅱ体外活性较淫羊藿苷好,其中脱水淫羊藿素(IC_(50)=0.102 mg/mL)的活性最好,与拜糖平(IC_(50)=0.850 mg/mL)相比抑制活性更强。结论淫羊藿苷转化产物可作为继续进行结构修饰的先导化合物,具有深入研究和开发的前景。

姜侧柏叶炮制工艺的实验研究

目的采用正交试验法优选姜侧柏叶的炮制工艺。方法以芸香苷、槲皮苷、杨梅素的含量为指标,选择炮制温度、炮制时间和生姜用量3个因素,每个因素取3个水平,进行姜侧柏叶炮制工艺优选考察。结果生姜用量对姜侧柏叶炮制工艺有显著影响,最佳工艺为:生侧柏叶与姜汁按照10∶1比例拌匀,120℃炮制15 min,取出,自然放凉。结论正交试验确定的姜侧柏叶炮制工艺合理可靠,稳定性好。

蓬子菜多糖分离纯化及其性质的研究

目的:从蓬子菜中提取分离水溶性多糖,并分析其理化性质,为板蓝根质量控制与进一步开发利用提供参考。方法:主要采用Sephadex G-100凝胶色谱柱分离纯化,测定各部位中性糖和酸性糖的含量。结果:从蓬子菜水溶性多糖中分离纯化得到2种不同的均一多糖组分TP-1、TP-2,总糖含量均达到90%以上。结论:2种均一多糖首次从蓬子菜中分离得到。

靶向亲和-液相色谱-质谱联用技术快速筛选黄藤总生物碱中乙酰胆碱酯酶抑制剂

采用靶向亲和-液相色谱-质谱联用技术(Target molecule affinity-LC-ESI-MS^n)快速筛选黄藤总生物碱中能够抑制乙酰胆碱酯酶活性的成分,共筛选出12种具有潜在抑制乙酰胆碱酯酶的活性成分,并鉴定了6种成分,分别为黄藤素(Palmatine)、小檗碱(Berberine)、药根碱(Jatrorrhizine)、巴马汀红碱(Palmatrubine)、7,8-二氢-8-羟基小檗碱(7,8-Dihydro-8-hydroxyberberine)、Groenlandicine,结合体外酶学实验对这6种化合物进行了活性验证实验。结果表明,黄藤素抑制活性最强,其抑制作用强于阳性对照药盐酸多奈哌齐,说明黄藤素具有开发成抗阿尔茨海默症药物的潜力。本方法简单、快速、准确地从复杂的中药提取物中筛选出具有抑制乙酰胆碱酯酶活性的成分,适用于复杂体系中的高通量筛选。