衰老过程中大白鼠脾细胞的DNA单链断裂与重接能力的变化

DNA被紫外线损伤后,由DNA切除修复酶切除嘧啶二聚体,随之以另一条正常的DNA链为模板修复合成DNA片段,最后由DNA连接酶将新合成的DNA片与原有的DNA链连接。本文用荧光法测定DNA修复过程中DNA单链的断裂及重接能力与衰老的关系。结果表明,不同年龄大鼠脾细胞均具有修复DNA单链断裂的能力,DNA单链断裂重接的能力与年龄有相关性,断乳鼠及青年鼠的脾细胞当保温至30min时,即开始了DNA链的重接,保温90min后则恢复到原有水平;而老年鼠脾细胞保温至90min时才开始DNA链的重接,保温150min,尚未恢复到原有水平。还发现,断乳鼠及老年鼠脾细胞的单链DNA含量高于青年鼠。

快速检测DNA链断裂的DNA解螺旋荧光分析法

快速检测ＤＮＡ链断裂的ＤＮＡ解螺旋荧光分析法杨业鹏，徐厚恩，南新升ＤＮＡ损伤作用的检测是致突变／致癌物短期筛选试验的重要内容之一。即往对ＤＮＡ链断裂的检测大多采用碱性蔗糖梯度的离心、碱性洗脱和ＤＮＡ解螺旋层析分析等方法，因操作繁琐，在实际应用中受到一...

衰老的遗传控制

当前,关于生物衰老的机制还不甚明了。但事实说明,除了环境因素,生物的内在遗传因素在衰老及生物的最高寿命上也起着重要作用。目前认为衰老起源于DNA的学说大致可归纳为以下几方面:一种观点是生命过程中DNA损伤及修复的错误(即引起突变)是致衰老的主要原因,DNA损伤及突变的积累将使细胞功能丧失,最终导致细胞死亡;另一种观点是衰老与分化相似,系由早已安排好的遗传程序控制,生物生长到成年期后。

老年大鼠肝细胞核与染色质对DNA酶Ⅰ消化敏感性的研究

生物衰老时,活性基因数减少,本实验以DNA_(ase)I为活性基因探针,以断奶大鼠为对照,研究老年大鼠肝细胞核与染色质对DNA_(ase)I消化的敏感性。发现老年大鼠肝细胞核与染色质对DNA_(ase)的消化敏感性明显低于断奶大鼠,经统计学处理差异显著,其P值分别<0.02。

衰老过程中大白鼠脾细胞DNA聚合酶催化DNA合成的忠实性研究

从大鼠脾细胞提取DNA聚合酶,经DEAE纤维素分离可分为DNA聚合酶α及β,DNA聚合酶的活性与衰老无关,而DNA聚合酶α催化DNA合成的忠实性在衰老过程中明显降低,当DNA合成的反应体系中缺失三种脱氧核苷酸时,断乳鼠、青年鼠及老年鼠脾细胞DNA聚合酶α的活性分别相当于4种脱氧核苷酸均存在时的4.0％,7.6％及13.9％。DNA聚合酶α催化DNA合成的忠实性还受二价阳离子的影响,当以M■^(++)代替Mg^(++)时,其忠实性降低。DNA聚合酶β催化DNA合成的忠实性与衰老无关。

DNA的甲基化水平与衰老的关系

用限制性内切酶Ｍｓｐ Ｉ及ＨｐａⅡ的酶切实验，测定了不同年龄大鼠的脾，肝及脑组织中ＤＮＡ的甲基化程度。结果发现，ＤＮＡ被Ｍｓｐ Ｉ切割成较小的片段，有一条分子大小为４．８Ｋｂｐ的主带及一条分子大小为０．１Ｋｂｐ的很弱的带；而ＤＮＡ被ＨｐａⅡ切割后，分子片段仍较大，有一条分子大小为２３Ｋｂｐ的主带。估算约有８０％的ＣＣＧＧ位点被甲基化，但未观察到随增龄的变化。以ｐＲＳＡ５７为清蛋白基因探针，发现肝…