自产氧抗菌光动力纳米体系对炎症调节和成骨分化的影响

目的:探讨自产氧的抗菌光动力纳米体系--F@Ce6⁃M对炎症调节和成骨分化的影响。方法:构建F@Ce6⁃M并对其进行表征、生物安全性的评价。使用630 nm光照射牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)菌液处理小鼠成纤维细胞L929,建立炎症模型,分别加入F@Ce6和F@Ce6⁃M并设立相应对照组。实时荧光定量PCR检测促炎因子和抗炎因子的基因表达水平,评价F@Ce6⁃M介导的抗菌光动力治疗(aPDT)对炎症调节的影响;通过免疫荧光检测NF⁃κB/p65亚基易位情况,分析F@Ce6⁃M的免疫调节机制;通过实时荧光定量PCR检测成骨相关基因表达,并采用碱性磷酸酶(ALP)进行染色,评价F@Ce6⁃M在炎症微环境中对前成骨细胞成骨分化的调控作用。结果:实时荧光定量PCR结果显示,与阴性对照组相比,F@Ce6⁃M介导aPDT能明显降低白细胞介素(IL)⁃6、IL⁃1β、肿瘤坏死因子(TNF)⁃α基因表达,并且效果明显优于F@Ce6⁃M未光照组(P<0.05);而各组间转化生长因子(TGF)⁃β1、精氨酸(Arg)⁃1和IL⁃10的基因表达差异无统计学意义(P>0.05)。在巨噬细胞中NF⁃κB/p65易位的免疫荧光实验中,F@Ce6⁃M光照组可抑制NF⁃κB/p65亚基转位(P<0.05)。对于成骨标志物基因表达水平,与阴性对照组相比,光照组ALP、Runt相关转录因子2(RUNX2)、Ⅰ型胶原蛋白(COL⁃1)、骨钙蛋白(OCN)基因表达量显著上升,F@Ce6⁃M光照组的基因表达量升高最为显著(P<0.05)。在ALP染色实验中,光照组的ALP活性水平显著上升,F@Ce6⁃M光照组ALP活性水平升高最为显著(P<0.05)。结论:自产氧的抗菌光动力纳米体系能够减少促炎因子的释放,并对成骨细胞的成骨潜能有显著的恢复作用,从而增强aPDT治疗牙周炎的效果。